程遠(yuǎn)

(五常市寶龍店種子林場，黑龍江 哈爾濱 150200)

大球蓋菇菌種及培養(yǎng)基的篩選

程遠(yuǎn)

(五常市寶龍店種子林場，黑龍江 哈爾濱 150200)

通過實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的5種大球蓋菇(Strophariarugoso-annulata)菌種在PDA培養(yǎng)基上的生長速度及生長勢的比較分析試驗(yàn)，結(jié)果表明：3號菌種(培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g)生長速度最快，且菌絲濃白、粗壯，所以3號菌種為實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有最優(yōu)菌株。進(jìn)一步比較最優(yōu)菌株的菌落形態(tài)、菌絲的顏色和密度以及菌絲長勢，得出最優(yōu)培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，蛋白胨2 g·L-1，酵母膏1 g·L-1，玉米粉10 g·L-1，維生素B 1片·L-1，稻草15 g·L-1。

大球蓋菇；菌種；培養(yǎng)基

AbstractThe growth rate & growth potential of five kinds ofStrophariarugoso-annulatastrains on the PDA medium were analyzed.Result shows that the growth rate of No. 3 strain(the medium is : potato 200 g, sucrose 20 g, agar 20 g, water 1 000 mL, peptone 3 g, yeast extract 2 g, KH2PO43 g, MgSO42 g is fastest, and hyphae are thick,white and stout, so No. 3 strain for the laboratory is the optimum.The colony morphology, mycelial color and density, and mycelial growth were compared.The optimum culture medium is as follows: potato 200 g ·L-1, sucrose 20 g ·L-1, peptone 2 g ·L-1, yeast extract 1 g·L-1, corn flour 10 g·L-1, vitamin B1 tablets·L-1, straw 15 g ·L-1.

KeywordsStrophariarugoso-annulata; strain;culture medium

大球蓋菇(Strophariarugoso-annulata)，又名皺環(huán)蓋菇，隸屬于擔(dān)子菌門(Basidomycota)，層菌綱(Hymenomycetes) ,傘菌目(Agaricales)，球蓋菇科(Strophariaceae)，球蓋菇屬(Stropharia)[1]，是國際菇類交易市場上的十大菇類之一，也是聯(lián)合國糧農(nóng)組織向發(fā)展中國家推薦栽培的食用菌之一[2,3]。在我國，野生大球蓋菇多產(chǎn)于云南、四川、西藏、吉林等地。

單個(gè)的大球蓋菇菇團(tuán)可達(dá)數(shù)公斤重，具有近半球形的菌蓋，濕潤時(shí)表面微黏。初期子實(shí)體呈白色，隨著子實(shí)體逐漸長大其顏色會逐漸加深至灰褐色，菌肉白且肥厚，圓柱形菌柄長5～20 cm，柄粗0.5～4 cm[4,5]。大球蓋菇可生于林中、草地、路旁、園地、垃圾場或牧場的牛馬糞堆上等處。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用大球蓋菇菌種。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌種篩選 采用常規(guī)方法制備PDA培養(yǎng)基1 000 mL，分裝制成PDA平面培養(yǎng)基，接入直徑為3 mm且菌齡一致的5種菌種，每個(gè)菌種接種3個(gè)平板。

1.2.2 母種培養(yǎng)基篩選 將篩選出的大球蓋菇優(yōu)質(zhì)菌株接種到不同配方制備的培養(yǎng)基中，進(jìn)行25 ℃黑暗恒溫培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中定時(shí)對大球蓋菇菌絲的生長密度、菌絲色澤、菌絲生長勢等生長狀況進(jìn)行觀察評估，通過菌絲的生長指標(biāo)篩選出最佳配方。

根據(jù)查閱大量文獻(xiàn)以及實(shí)驗(yàn)室原有的實(shí)驗(yàn)成果，擬定如下5個(gè)母種培養(yǎng)基配方，并按照如下配方使用常規(guī)培養(yǎng)基配制方法配制培養(yǎng)基，經(jīng)高溫高壓濕熱滅菌(121 ℃，20 min)后制成斜面或平板培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方如下：

(1)PSA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL。

(2)PSA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g。

(3)馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g。

(4)馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g，玉米粉10 g。

(5)馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，蛋白胨2 g，酵母膏1 g，玉米粉10 g，維生素B 1片，稻草15 g，水1 000 mL。

1.2.3 不同培養(yǎng)基上生長情況測試 利用孔徑為3mm的打孔器在培養(yǎng)皿內(nèi)旺盛生長的供試菌種的同一半徑上打孔，將菌絲塊隨機(jī)地轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)皿和試管斜面，恒溫培養(yǎng)(25 ℃)，每兩天定時(shí)測量菌落中心垂直的一組直徑，并求得其平均值作為菌落直徑。同時(shí)每天定時(shí)觀察記錄菌絲的密度、菌絲粗壯程度、菌絲色澤以及菌絲生長勢等菌絲生長指標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌種篩選

表1不同菌種在PDA培養(yǎng)基中生長速度及菌絲生長勢的比較

菌種編號菌落生長速度/mm·d-1重復(fù)1重復(fù)2重復(fù)3平均生長速度/mm·d-1菌絲長勢評價(jià)13．513．533．483．47++23．563．583．533．56++33．673．63．73．67+++43．513．553．53．52++53．473．493．453．47+++

表2 不同菌種在PDA培養(yǎng)基中生長速度方差分析

由表1中對菌絲生長勢的評價(jià)可知，在PDA培養(yǎng)基上生長勢最好的3號菌種和5號菌種。同時(shí)，由表2方差分析結(jié)果得出，1號菌種與5號菌種之間sig.=0.986，差異不顯著；而4號菌種與2號菌種之間sig.=0.55，差異亦不明顯；但3號菌種與其他各組之間都存在顯著差異。由此可知，在生長速度上，各組菌種存在差異，其中3號菌種菌絲生長速度最快。結(jié)合以上兩點(diǎn)得出，根據(jù)在PDA培養(yǎng)基上菌絲生長速度及長勢的評價(jià)可以篩選出最優(yōu)菌種為3號菌種。

2.2 培養(yǎng)基的篩選

如表3，④、⑤號菌絲生命力明顯強(qiáng)于其他組，菌絲雪白，能形成密度大且邊緣整齊的菌落；②、③菌落邊緣不整齊，此外密度和色澤也略差；①號菌絲細(xì)弱，顏色灰白，且隨著培養(yǎng)時(shí)間延長菌絲會形成索狀菌絲。大球蓋菇菌絲在以上5種培養(yǎng)基中的生長情況為(表4)，⑤號生長速度最快，達(dá)到6.82 mm·d-1，高于④號的6.57 mm·d-1，并明顯高于其他3組，5組間差異顯著。

表3 不同培養(yǎng)基所培養(yǎng)的菌絲生長情況

表4 大球蓋菇菌絲在5種培養(yǎng)基上的菌絲生長速度

培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)表明：添加稻草玉米粉能明顯促進(jìn)大球蓋菇的生長，能夠明顯提高菌絲長速、長勢。

3 結(jié)論

本文通過對實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的大球蓋菇菌種及母種培養(yǎng)基篩選實(shí)驗(yàn)，得出以下結(jié)果：

(1)本試驗(yàn)通過實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的5種大球蓋菇菌種在PDA培養(yǎng)基上的生長速度及生長勢的比較分析得出：3號菌種生長速度最快，相比1號、2號、4號、5號菌種分別提高了5.44%、3.00%、4.09%、5.45%，且菌絲濃白、粗壯，所以3號菌種為實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有最優(yōu)菌株。

(2)通過對篩選出的最優(yōu)菌株在常見的5種培養(yǎng)基中生長速度及菌絲在培養(yǎng)基中菌落邊緣整齊度、菌絲密度、菌絲生長勢、菌絲色澤的比較得出，大球蓋菇最適母種培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，蛋白胨2 g·L-1，酵母膏1 g·L-1，玉米粉10 g·L-1，維生素B 1片·L-1，稻草15 g·L-1。

[1] Hawksworth D L,Kirk P M, Sutton B C, et al. Ainsworth and Bisby's Dictionary of the fungi Ⅷ[M].London:CABI, 1995

[2] 王新娜,李紅超,楊勇岐.利用農(nóng)作物秸稈種植大球蓋菇新技術(shù)[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005 (5):134-135

[3] 黃年來.大球蓋菇的分類地位和特征特性[J].食用菌, 1995(6):11

[4] 黃年來.美國波蘭大球蓋菇的栽培技術(shù)[J].食用菌,1996(1):27

[5] 薩仁圖雅,圖力古爾.大球蓋菇研究進(jìn)展[J].食用菌學(xué)報(bào),2005,12(4):57-64

StrainandCultureMediumofScreeningofStrophariarugoso-annulata

Cheng Yuan

(Wuchang City Baolong shop seed forest, Heilongjiang Haidian 150200)

Q949.329.81

A

10.13601/j.issn.1005-5215.2017.09.018

1005-5215(2017)09-0057-02

2017-05-25

程遠(yuǎn)(1982-)，男，黑龍江巴彥人，大學(xué)，工程師，從事小漿果及食用菌等培養(yǎng)研究.