郭建超，李 亮，樊福好

（1.農(nóng)業(yè)部種豬質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心，廣東 廣州 510500；2.廣東省畜牧技術(shù)推廣總站，廣州 510500）

華南地區(qū)集約化豬場豬等孢球蟲病的流行情況調(diào)查

郭建超1，2，李 亮1，2，樊福好1，2

（1.農(nóng)業(yè)部種豬質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心，廣東 廣州 510500；2.廣東省畜牧技術(shù)推廣總站，廣州 510500）

豬的球蟲病是由多種球蟲引起的，病原主要寄生在豬腸上皮細(xì)胞內(nèi)，破壞上皮細(xì)胞導(dǎo)致腸黏膜出血，可導(dǎo)致感染仔豬出現(xiàn)腹瀉（圖1）、發(fā)熱、畏寒等癥狀，嚴(yán)重者脫水死亡，成年豬常為良性經(jīng)過，但豬只會(huì)增重緩慢，影響料重比增加飼養(yǎng)成本。其中感染力最強(qiáng)的豬等孢球蟲專性寄生于豬腸道上皮細(xì)胞內(nèi)，最早報(bào)道于1934年[1]，其生活史包括裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖3個(gè)階段。裂殖生殖階段和配子生殖階段是在機(jī)體內(nèi)完成，稱為內(nèi)生性發(fā)育階段。糞便中的卵囊從未孢子化的、不具感染性的階段發(fā)育為有感染力的階段稱為孢子生殖階段。豬等孢球蟲的潛隱期為4～6 d，顯露期為3～10 d。28℃恒溫條件下卵囊最早完成孢子化時(shí)間為26 h。為了解現(xiàn)階段華南地區(qū)集約化豬場的等孢球蟲感染情況，本文采用飽和食鹽水漂浮法對華南地區(qū)32個(gè)集約化豬場保育豬等孢球蟲的感染情況進(jìn)行調(diào)查。

圖1 豬等孢球蟲引起的腹瀉

1 材料方法

1.1 樣品采集

糞便樣品來自華南地區(qū)32個(gè)規(guī)?；i場保育仔豬。2016年8月21個(gè)豬場參測，2017年2月22個(gè)豬場參測，其中重復(fù)參加兩次測定的豬場有11個(gè)。每場單獨(dú)一欄飼養(yǎng)，在欄內(nèi)選取3點(diǎn)，采集欄內(nèi)混合樣品。

1.2 球蟲卵檢查

飽和食鹽水，每1 000 mL開水中加入380 g食鹽，不斷攪拌，比重為1.18。取糞便5 g，加入10倍的飽和食鹽水中，充分?jǐn)嚢?，靜置半小時(shí)以上。

1.3 卵囊形態(tài)觀察

用接種環(huán)蘸取上清液，在顯微鏡下觀察。取陽性樣品上清液加入離心管中，以3 000 r/min離心，收集沉淀，加入2.5%的重鉻酸鉀溶液中，充分混勻，在27℃恒溫箱中孵育26 h，觀察孢子化卵囊形態(tài)。

2 結(jié)果

用接種環(huán)取蘸取浸泡樣品的飽和食鹽水上清液，在顯微鏡下觀察到未孢子化球蟲卵囊（圖2），收集陽性樣品，孵育26 h后，在顯微鏡下觀察，可見孢子化卵囊（圖3），確定為等孢球蟲感染。

圖2 豬等孢球蟲未孢子化

圖3 豬等孢球蟲已孢子化

2016年8月至2017年2月期間，我們應(yīng)用飽和食鹽水漂浮法和形態(tài)學(xué)鑒定方法，對華南地區(qū)32個(gè)規(guī)?；i場保育豬球蟲的流行情況進(jìn)行了2次調(diào)查。2016年8月調(diào)查結(jié)果表明，華南地區(qū)保育豬球蟲感染率較高達(dá)47.6%，等孢球蟲感染率達(dá)33.3%；2017年2月調(diào)查結(jié)果表明，豬球蟲感染率40.9%，等孢球蟲感染率為22.7%。11個(gè)參加重復(fù)測定的豬場中5個(gè)兩次測定均為陽性，1個(gè)由陰性場轉(zhuǎn)變?yōu)殛栃浴?/p>

3 討論

本文就華南地區(qū)集約化豬場的豬球蟲流行情況調(diào)查結(jié)果表明，該病華南地區(qū)感染率較高，且季節(jié)性明顯，8月華南地區(qū)溫度較高，適合蟲卵發(fā)育成具有感染力的孢子化卵囊所需的較高溫度，因此本病8月份調(diào)查的感染率明顯高于2月份，這與該病多發(fā)生于春末夏季規(guī)律相符[2]。11個(gè)重復(fù)測定的豬場中5個(gè)兩次測定均為陽性，1個(gè)由陰性場轉(zhuǎn)變?yōu)殛栃浴＜s化豬場每年都有詳細(xì)驅(qū)蟲計(jì)劃，但仍存在持續(xù)感染問題，主要是由于球蟲很容易產(chǎn)生耐藥性，并且一般消毒藥不能殺死卵囊，全進(jìn)全出欄舍也很難徹底清除消毒干凈，尤其是產(chǎn)房很容易造成持續(xù)感染。另一方面牧場主的不重視，仔豬出現(xiàn)腹瀉后都考慮細(xì)菌和病毒感染，很少采取針對性治療手段，但從近年流行狀況看等孢球蟲的感染率很大，而且致病性很強(qiáng)。黃儀娟2015年對廣東多個(gè)集約化豬場的30日齡內(nèi)哺乳仔豬進(jìn)行豬等孢球蟲的流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示所調(diào)查豬場的球蟲陽性率為100%，總體感染率達(dá)26.48%[3]。Zhang等從2009年到2010年對中國17個(gè)省的80多個(gè)農(nóng)場779份哺乳仔豬的糞便樣品進(jìn)行檢查，確定等孢球蟲感染率63.9%、蒂氏艾美耳球蟲46.9%、光滑艾美耳球蟲19.2%、豬艾美耳球蟲20.8%、極細(xì)艾美耳球蟲13.9%、粗糙艾美耳球蟲4.6%、楊陵艾美耳球蟲新種1.5%[4]?？梢娯i球蟲病雖然在集約化豬場中不會(huì)成暴發(fā)式發(fā)生，導(dǎo)致的死亡率也很低，但豬球蟲的感染率仍然很高，尤其是產(chǎn)房和保育階段的仔豬最易受到感染，是引起仔豬腹瀉的重要誘因。

3.1 致病情況

Lindsay等的人工感染試驗(yàn)表明，分別給3日齡、4周齡和2～3月齡的仔豬感染400萬～1 000萬個(gè)蒂氏艾美耳球蟲，均未出現(xiàn)臨床癥狀[5]。Stuart等用孢子化的等孢球蟲進(jìn)行人工感染試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)接種3 000和10 000個(gè)卵囊的10日齡仔豬，未發(fā)現(xiàn)臨床癥狀，只是在十二指腸、空腸和回腸有細(xì)微的組織學(xué)變化，接種15 000、200 000、400 000個(gè)卵囊的仔豬出現(xiàn)典型的腹瀉、脫水、消瘦和精神不振等癥狀，臨床癥狀伴隨接種卵囊數(shù)量的增加而嚴(yán)重[6]。在豬球蟲病中等孢球蟲感染力較強(qiáng)，是引起哺乳仔豬腹瀉的重要病原，臨床癥狀可能持續(xù)5～8 d，期間可能發(fā)生繼發(fā)感染，引起豬只病情加重甚至死亡，隨著日齡增長臨床癥狀會(huì)逐漸消失，但感染豬仍處于隱性感染狀態(tài)，其進(jìn)行繁殖過程中會(huì)破壞腸上皮細(xì)胞，嚴(yán)重影響腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率，增加飼養(yǎng)成本。本次調(diào)查針對的是臨床正常的保育豬只，隨著日齡的增加豬只自身抵抗力的增強(qiáng)或者前期產(chǎn)房感染后產(chǎn)生的免疫抗體足以抑制球蟲在體內(nèi)大量繁殖，呈現(xiàn)陰性感染排毒狀態(tài)，在自繁自養(yǎng)豬場中隱性帶蟲豬是造成持續(xù)感染的重要原因。

3.2 臨床診斷

豬等孢球蟲病臨床主要表現(xiàn)為腹瀉，糞便呈黃色到灰色，開始松軟或呈糊狀，嚴(yán)重時(shí)呈液狀。其最好的診斷方法是對有臨床癥狀的個(gè)體糞便進(jìn)行病原學(xué)檢查，包括直接涂片法和漂浮法，直接涂片法適用于感染強(qiáng)度大的情況，對感染強(qiáng)度低的糞便敏感性低，漂浮法常用飽和食鹽水或飽和蔗糖溶液漂浮液，此外還有熒光顯微鏡檢測法及PCR診斷方法等。蟲卵計(jì)數(shù)常用麥克馬斯特氏法，該法常用來了解畜禽寄生蟲的感染強(qiáng)度及判斷驅(qū)蟲效果。

3.3 預(yù)防治療

對豬球蟲病的防治，現(xiàn)主要采用藥物治療，尚無疫苗可以使用。常用抗球蟲藥物有癸氧喹酯、氨丙啉、甲基三嗪酮、磺胺嘧啶和百球清等?？刂曝i球蟲病的關(guān)鍵在產(chǎn)房，每次母豬分娩前都要對妊娠母豬體表清潔消毒，對產(chǎn)房進(jìn)行熏蒸消毒，感染情況嚴(yán)重的場可以考慮火焰消毒，含甲酚的消毒劑對卵囊壁有破壞作用，最好消毒后能保證產(chǎn)房干燥3～5 d。豬場的鼠類、蒼蠅等起到機(jī)械傳播的作用，要加強(qiáng)滅鼠滅蠅工作，禁止不同欄舍飼養(yǎng)員串舍。對哺乳仔豬治療，磺胺嘧啶類藥物口服治療效果顯著，但容易產(chǎn)生耐藥性，過多用藥也會(huì)對仔豬腎臟產(chǎn)生影響，甲基三嗪酮治療效果也較為顯著。保持畜舍清潔是預(yù)防疾病最好的辦法，采用全進(jìn)全出方式，將產(chǎn)房徹底消毒，一般消毒藥不能殺死蟲卵，用甲醛、戊二醛、環(huán)氧乙烷等熏蒸消毒，或采用火焰法消毒。母豬分娩前1～2周要做好驅(qū)蟲工作，不僅可以防治球蟲，對防治體表寄生蟲的感染也有一定作用。

[1] Biesterh H E,Murray C.Studies in infectious enteritis of swine.VIII.Isosporu suis N.Sp.in swine[J] .J Am Vet Med Assoc,1934,85:207-219.

[2] 李國清.獸醫(yī)寄生蟲學(xué)[M] .北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2006：163.

[3] 黃儀娟.廣東豬等孢球蟲感染情況調(diào)查及其部分生物學(xué)特性研究[D] .廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

[4] Wen-Jie Zhang,Lin-Hai Xu,Ying-Ying Liu,et al.Prevalence of coccidian infection in suckling piglets in China[J] .Veterinary Parasitology Volume,2012,190(1-2):51-55.

[5] Lindsay D S,Blagburn B L,Boosinger T R.Experimental Eimeria debliecki infections in nursing and weaned pigs[J] .Vet Parasitol,1987,25(1):39-45.

[6] Stuart B P,Lindsay D S,Ernst J V.Isospora suis enteritis in piglets[J] .Vet Pathol,1980,17(1):84-93.

（編輯：柳青）

S858.285.9

A

1002-1957(2017)05-0100-02

2017-07-28

郭建超（1986-），男，山東青島人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事畜牧獸醫(yī)工作.E-mail：717183019@qq.com

樊福好，男，研究員，博士，主要從事畜牧獸醫(yī)工作.

E-mail：fanfuhao@139.com