孫 俊，解 明，王道明

（遼寧省經(jīng)濟(jì)林研究所，遼寧大連 116031）

榛果苞干腐病菌殺菌劑敏感性測定

孫 俊，解 明，王道明

（遼寧省經(jīng)濟(jì)林研究所，遼寧大連 116031）

榛果苞干腐病主要危害榛子果苞，是近年來發(fā)生較重的新病害，為了篩選出合理藥劑對病害進(jìn)行綜合防治，采用生長速率法對榛果苞干腐病致病菌Trichothecium roseum進(jìn)行常用殺菌劑的敏感性測定。試驗(yàn)結(jié)果表明：榛果苞干腐病菌對不同供試殺菌劑的敏感性存在一定差異，其中對40%多菌靈SC、40%苯醚甲環(huán)唑SC和45%咪鮮胺EA的敏感性最高，EC50值分別為0.533 3、1.284 3和1.544 8μg·mL-1；對75%百菌清WP、46%多抗錳鋅WP和70%甲基硫菌靈WP的敏感性次之。

榛果苞干腐病菌；殺菌劑；敏感性

Abstract：By mycelium growth rate methods,the sensitivity of Trichothecium roseum to six kinds of fungicides was tested.The results showed that there were differences in sensitivities of T.roseum to six kinds of fungicides,i.e.T.roseum were more sensitive to 40%Carbendazim SC,40%Difenoconazole SC and 45%Prochloraz EA with EC50values of 0.533 3,1.284 3 and 1.544 8 μg·mL-1respectively,and less sensitive to 75%Chlorothalonil WP,46%Carbendazim mancozeb WP and70%Thiophanate-methyl WP.

KeyWords：Trichothecium roseum;fungicides;sensitivity

榛Corylus heterophylla為榛科榛屬木本植物，又名平榛、榛子、棰子等。榛子為堅(jiān)果，紅棕色或金黃褐色，并著彩色條紋[1]，廣泛分布于東北、華北及陜西、甘肅等地，有“堅(jiān)果之王”的美稱，堅(jiān)果營養(yǎng)豐富，用途廣泛，經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，是加工各種巧克力、糖果、冰淇淋、榛子粉和榛子乳等高級營養(yǎng)品的重要原料[2]，榛子包含著抗癌化學(xué)成分紫杉酚，它是紅豆杉醇中的活躍成分，可以治療卵巢癌和乳腺癌以及其它一些癌癥，可延長病人的生命期。中醫(yī)認(rèn)為，榛子有補(bǔ)脾胃、益氣力、明目健行的功效，并對消渴、盜汗、夜尿多等肺腎不足之癥頗有益處。榛子還具有降低膽固醇的作用，避免了肉類中飽和脂肪酸對身體的危害，能夠有效地預(yù)防心腦血管疾病的發(fā)生；其還具有消炎、抗氧化養(yǎng)顏?zhàn)o(hù)膚、延年益壽等功效[3]。

榛果苞干腐病病原為聚端孢霉Trichothecium roseum[4]，真菌性病害。病菌寄生性不強(qiáng)，成熟期果實(shí)或有微傷口的果實(shí)發(fā)病重[3]。榛果苞干腐病主要危害榛子果苞，在果苞邊緣產(chǎn)生較大的褐腐壞死斑，且病斑逐漸擴(kuò)大連成片，嚴(yán)重時(shí)整個(gè)果苞干枯壞死，果殼變黑，嚴(yán)重影響產(chǎn)量。濕度大時(shí)，病部可產(chǎn)生粉紅色霉層[5]。

本研究采用菌絲生長速率法測定了榛果苞干腐病對不同殺菌劑的敏感性，以期篩選出合理藥劑，為病害的綜合防治提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

從遼寧省撫順章黨基地采集獲得榛果苞病害標(biāo)樣，經(jīng)常規(guī)組織分離后，對病原菌進(jìn)行單孢分離，獲得其單孢菌株，并按柯赫氏法則回接榛樹果苞，證明獲得菌株為榛果苞干腐病病原菌[6]。榛果苞干腐病菌菌株，由遼寧省經(jīng)濟(jì)林研究所分離并保存。

培養(yǎng)菌落初為白色，后漸變?yōu)榉奂t色。病菌分生孢子梗直立，不分枝，無色，頂端有時(shí)膨大，具0～2個(gè)隔膜。分生孢子頂端簇生，單獨(dú)形成，孢基具一扁乳頭狀突起[4]。分生孢子倒洋梨形，雙細(xì)胞，隔膜處略縊縮，初期無色，后期淺粉紅色，形成向基序列的孢子鏈，大小為9.8～19.3 μm×5.6～8.3 μm（圖1）。

圖1 榛果苞干腐病菌端聚孢霉培養(yǎng)性狀及顯微圖片

1.2 供試藥劑

46%多抗錳鋅WP（青島海利爾藥業(yè)集團(tuán)生產(chǎn)），75%百菌清WP(福建泰禾集團(tuán))，70%甲基硫菌靈WP（江蘇龍燈化學(xué)有限公司），40%苯醚甲環(huán)唑SC（陜西韋爾奇作物保護(hù)有限公司），40%多菌靈SC（江蘇龍燈化學(xué)有限公司），45%咪鮮胺EA(江蘇農(nóng)墾農(nóng)藥有限公司)[7-8]。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 含藥培養(yǎng)基的配制及敏感性測定

榛果苞干腐病病菌的敏感性測定：利用菌落生長直徑法，將上述6種不同藥劑的母液與PDA培養(yǎng)基混勻，分別配制成濃度梯度為50、20、10、2、0.4、0.08、0.016、0.0032 μg·mL-1的含藥PDA平板，用蒸餾水代替藥液作為對照組。將試管保存的菌種轉(zhuǎn)到PDA平板活化10 d，用打孔器在菌落邊緣打取直徑為5 mm的菌餅，接于含藥平板中央，以不含藥培養(yǎng)基平板作對照，3次重復(fù)，25℃恒溫箱中培養(yǎng)，12～14 d后用十字交叉法測量各處理的菌落直徑，按公式計(jì)算出藥劑對菌絲生長的抑制率。

1.3.2 EC50值的概念及計(jì)算

采用菌絲生長速率法監(jiān)測敏感性，敏感性越高，抑制病菌所需藥劑濃度越小，兩者之間存在一定的對應(yīng)關(guān)系。EC50值是指藥劑對菌體的抑制率達(dá)到一半時(shí)所對應(yīng)的藥劑濃度。EC50值越小，說明達(dá)到相同生物效應(yīng)所需藥劑劑量越低，藥劑對目標(biāo)生物的活性就越高。

計(jì)算方法：將供試藥劑濃度和相對防效的平均值轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的對數(shù)幾率值，建立劑量反應(yīng)曲線，計(jì)算出毒力回歸方程Y=bX+a(X為藥劑濃度對數(shù)；Y為生長抑制率對應(yīng)的幾率值)，Y=5時(shí)X的反對數(shù)值即為有效抑制中濃度EC50[4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對榛果苞干腐病菌的EC50值比較

各供試藥劑毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)R和EC50值結(jié)果見表1。

表1 6種殺菌劑對榛果苞干腐病菌的敏感性

從表1可以看出：供試藥劑按照EC50值基本上可以歸為2類：40%多菌靈SC、40%苯醚甲環(huán)唑SC和45%咪鮮胺EA，EC50值分別是0.533 3 μg·mL-1、1.284 3 μg·mL-1和1.544 8 μg·mL-1，是供試藥劑中EC50值非常小的，說明這3種藥劑抑菌效果好；75%百菌清WP、46%多抗錳鋅WP和70%甲基硫菌靈WP，EC50值介于4.116 1～4.989 1 μg·mL-1，是供試藥劑中EC50值較小的，說明這3種藥劑抑菌效果較好。

2.2 榛果苞干腐病菌對不同殺菌劑的敏感性比較

在榛果苞干腐病對藥劑的敏感性測定中，通過菌絲生長速率法測得了榛果苞干腐病對6種殺菌劑的敏感性，結(jié)果表明：6種殺菌劑的EC50范圍為0.533 3～4.989 1 μg·mL-1，榛果苞干腐病對多菌靈最敏感，其EC50值為0.533 3 μg·mL-1；對甲基硫菌靈最不敏感，其EC50值為 4.989 1μg·mL-1，從總體上看6組處理的EC50范圍較低，對病原抑制顯著，明顯低于實(shí)際推薦使用劑量，都可用于實(shí)際生產(chǎn)。

2.3 榛果苞干腐病對多菌靈的敏感性

由試驗(yàn)所得結(jié)果來看，榛果苞干腐病對多菌靈的敏感性最高，EC50的平均值為0.533 3 μg·mL-1。其中，當(dāng)多菌靈濃度為10μg·mL-1時(shí)，菌落直徑為5 mm；當(dāng)多菌靈濃度為0.003 2 μg·mL-1，菌落直徑約為75.16 mm（圖1）。

圖3 榛果苞干腐病菌聚端孢霉對多菌靈敏感性測定

3 結(jié)論與討論

6種殺菌劑的EC50范圍為0.533 3～4.989 1μg·mL-1，榛果苞干腐病菌對多菌靈最敏感，其EC50值為0.533 3 μg·mL-1，防效最好；對甲基硫菌靈最不敏感，其EC50值為4.989 1 μg·mL-1，從總體上看6組處理的EC50范圍較低，對病原抑制顯著，明顯低于實(shí)際推薦使用劑量，都可用于實(shí)際生產(chǎn)。

本研究采用菌絲生長速率法測定了遼寧省榛果苞干腐病菌對不同殺菌劑的敏感性。由于榛果苞干腐病為中國新紀(jì)錄病害，其病害研究較少，對其生物學(xué)等特性不明確，在試驗(yàn)操作過程中，無法準(zhǔn)確掌握其生長速率以及推薦使用藥劑。同時(shí)該試驗(yàn)反映了少數(shù)殺菌劑對榛果苞干腐病菌的作用效果，在試驗(yàn)中還有很多不完善之處，還有待進(jìn)一步的改進(jìn)。室內(nèi)的藥劑敏感性測定結(jié)果為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上防治該病提供了理論依據(jù)，但僅僅說明該殺菌劑在離體條件下對致病菌的抑制活性，田間的防治效果受到的影響因素很多，有待于試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。

［1］李雪嵐.談榛子的開發(fā)與利用[J].林業(yè)勘查設(shè)計(jì)，2011(4):114-115.

［2］孫俊.榛子營養(yǎng)價(jià)值及遼寧地區(qū)榛子病害研究進(jìn)展[J].遼寧林業(yè)科技，2014(5):51-53.

［3］陳佳.補(bǔ)氣明目食榛子[J].國土綠化，2004(1):39.

［4］魏景超.真菌鑒定手冊[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1979.

［5］孫俊.遼寧省榛新病害—果苞干腐病病原鑒定初報(bào)[J].中國果樹，2013(6):62-62.

［6］方中達(dá).植病研究方法[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1996.

［7］王勇，王萬立，劉春艷，等.保護(hù)地番茄紅粉病的發(fā)生與防治[J].中國蔬菜，2007(12):57.

［8］李利平，張建英，杜自海.黃瓜紅粉病的發(fā)生為害及防治方法[J].植保技術(shù)與推廣，2003，23(11):21.

(責(zé)任編輯：苑輝)

Sensitivity test of Trichothecium roseum to six kinds of fungicides

SUN Jun,XIE Ming,WANG Daoming
（LiaoningInstituteofEconomicForestry,Dalian116031,China）

S763.1

A

1001-1714（2017）05-0004-04

2017-02-05

國家林業(yè)局948項(xiàng)目（2012-4-56）。

孫?。?983-），女，高級工程師，主要從事經(jīng)濟(jì)林樹種的病害研究工作。E-mail:sunjun3200@163.com。