夏 志，張 宇，李黔柱，羅樹常，王 群，陳義明

(1.貴州工程應(yīng)用技術(shù)學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院，貴州 畢節(jié) 551700；2.貴州省化學(xué)化工實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，貴州 畢節(jié) 551700)

畢節(jié)圓珠半夏中阿魏酸含量測(cè)定

夏 志1,2，張 宇1,2，李黔柱1,2，羅樹常1,2，王 群1，陳義明1

(1.貴州工程應(yīng)用技術(shù)學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院，貴州畢節(jié)551700；2.貴州省化學(xué)化工實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，貴州畢節(jié)551700)

采用高效液相色譜法對(duì)半夏中有效成分阿魏酸進(jìn)行分析檢測(cè)，以乙腈-甲醇(95:5)為流動(dòng)相，流速為1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為320 nm，柱溫為40℃。結(jié)果表明，阿魏酸在0～42 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R2= 0.9995，平均回收率為87.69%(n=6)，RSD為3.47%。本方法靈敏，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，適用于半夏中阿魏酸含量的檢測(cè)。樣品測(cè)量結(jié)果顯示，赫章半夏中阿魏酸的含量為0.2448 μg/mL。

圓珠半夏；阿魏酸；HPLC；畢節(jié)

半夏作為貴州地道中藥材，在主要出口國(guó)日本享有“免檢”待遇。其有效成分阿魏酸具有抗血小板聚集、降血脂、抗血栓、治療冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、鎮(zhèn)痛、緩解血管痙攣等作用[1]，是生產(chǎn)用于治療心腦血管疾病等癥藥品的基本原料。在阿魏、川芎、半夏等中藥材中含量較高，對(duì)其含量的確定利于半夏的綜合利用。為此，選用HPLC法對(duì)半夏中有效成分阿魏酸進(jìn)行分析檢測(cè)[2-4]，以期為半夏中阿魏酸含量的測(cè)定提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥材

赫章縣舍虎村半夏采收后去皮，曬干后粉碎，過3號(hào)篩，置于玻璃干燥器中備用。

1.1.2 試劑及儀器

阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品(色譜純，購自阿拉丁)， 甲醇、乙腈分別為色譜純， 水為二次蒸餾水。Agilent 1200 型高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司)，DAD 檢測(cè)器， 安捷倫液相色譜系統(tǒng)化學(xué)工作站， 微孔濾膜Ф = 0.45 μm， AG135 型電子天平， BX5200BQC超聲波清洗儀，移液管等玻璃儀器。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

準(zhǔn)確稱取半夏研磨樣品2.0000 g，量取30 mL甲醇，置于具塞錐形瓶中，稱量，在超聲波清洗儀中超聲提取30 min，置冷。再次稱量，用甲醇補(bǔ)償其損失的質(zhì)量，搖勻，取上清液，過0.45 μm微孔濾膜待用。

1.2.2 檢測(cè)條件

色譜柱(SB-C18柱，4.6×250mm，2.5 μm)，流動(dòng)相(乙腈:甲醇=95:5)，流速(1 mL/min)，檢測(cè)波長(zhǎng)(320nm)，柱溫(40℃)，進(jìn)樣量(10 μL)，檢測(cè)波長(zhǎng)為320 nm。

1.2.3 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

準(zhǔn)確稱取阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品0.0042 g，置于100 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度線，搖勻，得到濃度為42 μg/mL的儲(chǔ)備液。分別移取標(biāo)準(zhǔn)溶液2.50 ，5.00 ，10.00 ，15.00 ，20.00 ，25.00 mL于25 mL棕色容量瓶中，用甲醇(色譜純)稀釋至刻度線，搖勻，即得濃度為4.2 ，8.4 ，16.8 ，25.2，33.6 ，42 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。

1.2.4 方法學(xué)考察

移取同一對(duì)照品溶液10 μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定阿魏酸的峰面積，考察其精密度。同一樣品稱取6份，每份約2 .0000g，按供試品溶液的制備及色譜條件測(cè)定阿魏酸的含量，考察其準(zhǔn)確度。

2 結(jié)果與分析

2.1 工作曲線繪制

在1.2.2色譜條件下進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的峰面積。分別以峰面積積分為縱坐標(biāo)，溶液濃度為橫坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1所示。由圖1可知，線性回歸方程y = 147.55x - 1.7124，R2= 0.9995，說明在1.2.1色譜條件，濃度為0～42 μg/mL下，線性關(guān)系良好，可用于阿魏酸含量的測(cè)定。

圖1 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

2.2 精密度及重現(xiàn)性試驗(yàn)

準(zhǔn)確移取同一對(duì)照品溶液10 μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定結(jié)果如表1所示，測(cè)得阿魏酸峰面積RSD = 5.36%(n=6)，表明儀器精密度良好。

表1 同一對(duì)照品測(cè)定精密度峰面積圖

同一樣品稱取6份，每份約2 g，按1.2.1制備溶液，在1.2.2色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)其阿魏酸含量，測(cè)得平均含量為24.97%，RSD為3.79%(n=6)，結(jié)果如表4所示，表明本方法重現(xiàn)性良好。

表2 同一半夏樣品重復(fù)性實(shí)驗(yàn)峰面積

2.3 回收率試驗(yàn)

準(zhǔn)確移取已知含量(24.97%)的同批半夏2.0000 g，共12份，分別置于具塞錐形瓶中，將其中6份按1.2.5的方法處理樣品。將另6份準(zhǔn)確量取30 mL甲醇，分別準(zhǔn)確移取阿魏酸對(duì)照品10.00 mL，使用超聲波清洗器超聲提取30 min，置冷，再次稱量，用甲醇(色譜純)補(bǔ)償其損失的質(zhì)量，搖勻，過0.45 μm微孔濾膜。移取各樣品溶液10 μL，測(cè)定阿魏酸峰面積，如表3所示(阿魏酸標(biāo)樣、半夏空白、半夏樣品加標(biāo)后色譜圖如圖2、3、4所示)。測(cè)得平均回收率為87.69%，RSD=3.47%。

表3 阿魏酸加標(biāo)回收率試驗(yàn)

圖2 阿魏酸標(biāo)樣色譜圖

Fig.2 Chromatograms of ferulic acid Standard sample

圖3 半夏空白樣品色譜圖

圖4 半夏空白樣品加標(biāo)色譜圖

2.4 樣品測(cè)定

準(zhǔn)確稱取2.0000 g半夏樣品3批，按1.2.1的方法處理樣品。準(zhǔn)確移取5.00 mL該溶液于25.00 mL棕色容量瓶中，用甲醇(色譜純)定容，測(cè)量其峰面積。由表4可知，赫章半夏中阿魏酸的平均含量為0.2448 μg/mL。

表4 半夏樣品中阿魏酸含量測(cè)定

3 結(jié)論

在乙腈-甲醇(95:5)為流動(dòng)相，流速為1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為320 nm，柱溫為40℃的條件下，采用HPLC測(cè)定其半夏中阿魏酸的含量。結(jié)果表明，阿魏酸在0～42 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R2= 0.9995，平均回收率為87.69%，RSD(n = 6)為3.47%。說明本方法靈敏，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于半夏中阿魏酸含量的檢測(cè)。測(cè)得其阿魏酸的含量為0.2448 μg/mL。

[1] 黃 瑾, 胡晉紅, 朱全剛. 阿魏酸及其衍生物的藥理作用[J].中藥材, 2001, 24(7): 522-526.

[2] 夏 志,張 宇,黃榮茂, 等. 畢節(jié)特產(chǎn)珍稀藥材圓珠半夏的 HPLC 指紋圖譜分析[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué), 2015, 43(4): 39-41.

[3] 許風(fēng)清, 吳皓, 周倩, 等. 半夏藥材中總有機(jī)酸的定量方法和含量測(cè)定研究[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2005, 21(1): 34-35.

[4] 張科衛(wèi),吳 皓,沈繡紅.半夏中總游離有機(jī)酸的作用研究[J]. 南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2001, 17(3): 159-161.

(本文文獻(xiàn)格式：夏志，張宇，李黔柱，等.畢節(jié)圓珠半夏中阿魏酸含量測(cè)定[J].山東化工，2017，46(16)：80-81，84.)

The Determination of Ferulic Acid in the Beads Pinellia Ternate of Bijie City

Xia Zhi1,2*, Zhang Yu1,2,Li Qianzhu1,2,Luo Shuchang1,2,Wang Qun1,Chen Yiming1

(1. School of Chemical Engineering, Guizhou University of Engineering Science, Bijie 551700,China;2.The Experiment Education Model Center of the Chemistry and Chemical Engineering of Guizhou Provience,Bijie 551700, China)

Determination of ferulic acid in Pinellia ternata by high performance liquid chromatography, and the mobile phase consisted of acetonitrile - methanol (95: 5) as the mobile phase at a flow rate of 1 mL/min. The detection wavelength was 320 nm and the column temperature was 40 ℃. The results showed that ferulic acid had a good linearity from 0 μg/mL to 42 μg/mL with R2=0.9995. The average recovery was 87.69% (n = 6) and the RSD was 3.47%. The method is sensitive, accurate and reproducible, and is suitable for the detection of ferulic acid in Pinellia ternata. The results of the sample showed that the content of ferulic acid in the Pinellia ternata was 0.2448 μg/g.

beads Pinellia ternata; Ferulic acid; HPLC; Bijie

S567.23+9 ； O657.7+2

：A

：1008-021X(2017)16-0080-02

2017-07-16

貴州省應(yīng)用化學(xué)特色重點(diǎn)學(xué)科；貴州省化學(xué)工程與技術(shù)重點(diǎn)支持學(xué)科(黔學(xué)位合字ZDXK[2015]32號(hào))；貴州省教育廳項(xiàng)目(KY[2015]450)；貴州省科技廳聯(lián)合基金項(xiàng)目(LH[2015]7587, LH[2016]7058)；畢節(jié)市科技局項(xiàng)目(畢科合[2016]21號(hào))。

夏志(1985—)，貴州工程應(yīng)用技術(shù)學(xué)院實(shí)驗(yàn)師，主要從事基礎(chǔ)化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)、分析化學(xué)及相關(guān)工作。