王素茹+葛會林+韓丙軍+趙方方

摘要：采用高效液相色譜方法，分析吡唑醚菌酯和戊唑醇在香蕉及土壤中的殘留。香蕉與土壤樣品用乙腈提取，用CNW/NH2固相萃取柱對香蕉及土壤中吡唑醚菌酯和戊唑醇進行凈化，正己烷/丙酮作固相萃取淋洗液，并優(yōu)化凈化方法及其色譜條件，采用高效液相色譜儀——紫外檢測器進行測定。結(jié)果表明：吡唑醚菌酯和戊唑醇的檢出限分別為0.01mg/kg、0.025mg/kg。當(dāng)添加水平為0.01～0.2mg/kg時，吡唑醚菌酯在香蕉全焦、焦肉及土壤中的平均回收率為90%～102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.9%～6.9%。當(dāng)添加水平為0.025～0.5mg/kg時，戊唑醇在香蕉全焦、焦肉及土壤中的平均回收率為82%～102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%～6.6%。

關(guān)鍵詞：吡唑醚菌酯；戊唑醇；高效液相色譜；香蕉；土壤

基金項目：農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥殘留試驗項目（2015F086）

中圖分類號： TQ450.2 文獻標(biāo)識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.18.022

香蕉含纖維、鉀、維生素B6和抗氧化物等營養(yǎng)價值。香蕉的葉斑病、黑星病對香蕉產(chǎn)量有重大影響。吡唑醚菌酯和戊唑醇復(fù)配農(nóng)藥對此類病害有較好的防治效果。目前，檢測吡唑醚菌酯和戊唑醇的方法有氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜法和液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜法。關(guān)于在液相色譜上同時檢測2種農(nóng)藥在香蕉和土壤中殘留量的報告尚少。本文對香蕉及土壤中吡唑醚菌酯和戊唑醇測定方法進行了研究，以期為我國香蕉等農(nóng)產(chǎn)品中吡唑醚菌酯和戊唑醇殘留量檢測提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 藥劑及試劑

吡唑醚菌酯（純度99.0%）和戊唑醇（純度98.5%）購自Dr.Ehrenstorfer GmbH；乙腈（色譜純）。

1.2 主要儀器設(shè)備

Waters高效液相色譜儀（2489紫外檢測器）及SunfireTM C18（4.6mm×150mm，5um）。

1.3 分析方法

1.3.1 樣品提取及凈化 提?。悍Q樣20g，加40.0mL乙腈，香蕉勻漿2min后過濾到裝有7g NaCl的具塞量筒中；土壤振蕩30min，加7g NaCl。振蕩2min，靜置20min，取上清液20.0mL至圓底燒瓶中，蒸干，加入5.0mL正己烷溶解混勻，待凈化。

凈化 ：用5.0mL正己烷活化CNW/

NH2固相萃取柱后，倒入待凈化溶液，棄去，用5.0mL正己烷淋洗NH2小柱，重復(fù)二次，淋洗液棄去。再用5.0ml正己烷—丙酮（體積比8∶2）洗脫，重復(fù)二次，收集洗脫液。蒸干，用5.0mL甲醇定容后，待測。

1.3.2 儀器檢測條件 紫外檢測波長分別是220nm、278nm；流動相A為色譜純乙腈，流動相B為優(yōu)級純純水；柱溫：35℃；進樣體積：10樣體；A：B為60：40；流速1.0mL/ min，保持15min。在此條件下，吡唑醚菌酯和戊唑醇的保留時間分別約為5.2min、9.3min。

2 結(jié)果與討論

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別準(zhǔn)確稱取吡唑醚菌酯和戊唑醇標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇稀釋，吡唑醚菌酯配制成0.01ug/ml、0.025ug/ml、0.05ug/ml、0.1ug/ml、0.5ug/ml的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，戊唑醇配制成0.02ug/ml、0.05ug/ml、0.1ug/ml、0.5、1ug/ml的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按文中1.3.2中條件進行測定，以進樣濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。吡唑醚菌酯和戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖分別見圖1、圖2。

吡唑醚菌酯和戊唑醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程分別為y=38756x+121.26（R2=0.9999）和y=25193x+460.85（R2=0.9964），表明0.01～0.5ug/mL和0.02～1ug/mL進樣濃度與相應(yīng)峰面積之間的線性關(guān)系良好。

2.2 準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度

取制備好的空白對照樣品，加入一定量的吡唑醚菌酯和戊唑醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，按文中1.3.1中方法進行提取，按1.3.2中條件測定回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。吡唑醚菌酯在香蕉與土壤中的添加水平為0.01～0.2mg/kg；戊唑醇在香蕉與土壤中的添加水平為0.025～0.5mg/kg。每個濃度重復(fù)5次。吡唑醚菌酯和戊唑醇在香蕉全焦、香蕉焦肉及土壤上的添加回收圖，見圖3～圖6。

吡唑醚菌酯和戊唑醇在香蕉和土壤上的添加回收色譜圖，見圖1～圖6。添加回收率試驗結(jié)果（見表1）表明：當(dāng)吡唑醚菌酯的添加水平在空白香蕉、焦肉、土壤樣品中為0.01～0.2mg/kg時，其平均回收率為90%～102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.9%～6.9%；當(dāng)戊唑醇的添加水平在空白香蕉、焦肉、土壤樣品中為0.025～0.5mg/kg時，其平均回收率為82%～102%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%～6.6%，符合農(nóng)藥殘留分析方法的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)要求。通過添加回收試驗，確定吡唑醚菌酯和戊唑醇在香蕉和土壤樣品中方法的檢出限分別為0.01mg/kg、0.025mg/kg；各樣品中2種化合物的最小檢出量分別為0.1ng、0.2ng。所建立方法具有較好的精密度和靈敏度。

2.3 淋洗液

吡唑醚菌酯和戊唑醇在香蕉焦肉中分別加標(biāo)0.2mg/kg、0.5mg/kg及空白樣品的凈化色譜圖，如圖7所示。由圖7可知，本研究選用CNW/NH2凈化時，上樣后，先用10mL正己烷淋洗去雜質(zhì)，后分別用正己烷—丙酮（體積比6∶4）和正己烷—丙酮（體積比8∶2）進行洗脫樣品。通過實驗比較發(fā)現(xiàn)，2種洗脫液均可與雜質(zhì)較好分離；但是選用洗脫液正己烷—丙酮（體積比6∶4）較洗脫液正己烷—丙酮（體積比8∶2）洗脫后的目標(biāo)物的響應(yīng)值（峰面積）明顯降低，洗脫液正己烷-丙酮（體積比6∶4）正己烷—丙酮洗脫后吡唑醚菌酯和戊唑醇的回收率分別為35%、31%；而洗脫液正己烷—丙酮（體積比8∶2）洗脫凈化后，吡唑醚菌酯和戊唑醇的回收率均能達到90%以上，因此選用正己烷——丙酮（體積比8：2）作為洗脫液。endprint

2.4 色譜柱

經(jīng)過選擇2種不同的色譜柱進樣時比較發(fā)現(xiàn)，當(dāng)色譜柱為XTERR MS C18（4.6mm×250mm，5um）時，吡唑醚菌酯和戊唑醇的保留時間分別約為6.9min、12.1min；當(dāng)色譜柱為SunfireTM C18（4.6mm×150mm，5um）均能達到的添加回收時，吡唑醚菌酯和戊唑醇的保留時間分別約為5.2min、9.3min。在同一液相色譜儀上，流動相組成、梯度洗脫方法相同，采用不同的色譜柱，可以導(dǎo)致組分的保留時間差異較大。為了節(jié)省進樣時間，提高樣品分析的效率，本方法確定采用SunfireTM C18（4.6mm×150mm，5um）色譜柱進行吡唑醚菌酯和戊唑醇的殘留分析。

3 結(jié)論

本研究采用Waters高效液相色譜儀（2489紫外檢測器），經(jīng)過大量的試驗數(shù)據(jù)驗證與查看相關(guān)文獻，對本研究進行優(yōu)化對比，建立了一套較為簡便的同時檢測香蕉和土壤中的吡唑醚菌酯和戊唑醇殘留的方法。選用CNW/NH2凈化，凈化雜質(zhì)少、響應(yīng)高，凈化時通過比較發(fā)現(xiàn)，洗脫液選用正己烷—丙酮（8+2）回收率比正己烷—丙酮（6+4）回收率效果更好，因此確定選用正己烷—丙酮（8+2）為凈化洗脫液；為提高樣品分析的速率，通過選擇兩條長度分別是250mm和150mm的色譜柱進行進樣比較，試驗證明選擇SunfireTM C18（4.6mm×150mm，5um）進樣吡唑醚菌酯和戊唑醇的保留時間較選擇色譜柱為XTERR MS C18（4.6mm×250mm，5um）進樣吡唑醚菌酯和戊唑醇的保留時間短，因此，選擇SunfireTM C18（4.6mm×150mm，5um）色譜柱進樣是一種簡便、快捷的同時檢測香蕉中吡唑醚菌酯和戊唑醇殘留分析儀器的方法；采用外標(biāo)法，通過UPLC定性定量檢測的靈敏度、精密度和回收率等均符合農(nóng)藥殘留分析的要求。同時也為其他作物中吡唑醚菌酯和戊唑醇殘留分析方法提供了依據(jù)。

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作者簡介：王素茹，本科學(xué)歷，助理工程師，研究方向：農(nóng)藥殘留分析。endprint