□馬艷麗 丁云峰王金穎
(1.長春大學(xué) 吉林 長春 130000;2.吉林省三岔子林業(yè)局 吉林 白山 130022)
雪鐵芋原球莖誘導(dǎo)研究
□馬艷麗1丁云峰1王金穎2
(1.長春大學(xué) 吉林 長春 130000;2.吉林省三岔子林業(yè)局 吉林 白山 130022)
以雪鐵芋葉片和復(fù)葉軸為外植體,研究了6-BA和NAA對愈傷組織、不定芽、不定根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明:6-BA有明顯促進(jìn)不定芽發(fā)生的作用,最佳濃度為3~6mg/L。NAA能促進(jìn)愈傷組織和不定根的發(fā)生,但明顯抑制了不定芽的形成。葉片比復(fù)葉軸更易誘導(dǎo)形成愈傷組織和不定芽、不定根。
雪鐵芋;雪鐵芋;組織培養(yǎng);誘導(dǎo)
雪鐵芋(Zamiolulcas zamiif olia),天南星科美鐵芋屬多年生常綠草本植物,因其小葉呈偶數(shù)羽狀排列在復(fù)葉軸,且葉質(zhì)厚實(shí),葉色光亮,宛若一掛串連起來的錢幣,故又稱金錢樹。雪鐵芋沒有常規(guī)植物的莖,只有膨大的地下塊莖,大型羽狀復(fù)葉著生在塊莖上。雪鐵芋因其較高的觀賞價(jià)值和寓意富貴吉祥而成為南北方頗受歡迎的室內(nèi)觀賞植物。因其繁殖困難,種苗供不應(yīng)求,近年市場價(jià)格始終居高不下[1]。
理論上雪鐵芋可采用分生、扦插、組織培養(yǎng)等方法進(jìn)行繁殖。雪鐵芋分生繁殖是對其根部新萌生的塊莖進(jìn)行分栽,經(jīng)試驗(yàn)觀測,一株4年生以上雪鐵芋1年僅能分生2~3個(gè)子塊莖。雪鐵芋扦插繁殖主要是采用小葉片和復(fù)葉軸做插穗,生產(chǎn)成本低,所以是目前生產(chǎn)上擴(kuò)繁的主要手段。因?yàn)檠╄F芋復(fù)葉軸扦插時(shí)容易腐爛,并且復(fù)葉軸材料較少,所以生產(chǎn)中多以葉片扦插為主[2]。
本課題組進(jìn)行葉插繁殖試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),葉插繁殖法只能做到一葉一苗,且葉插不定芽的發(fā)生至少需半年左右。分生繁殖和葉插較低的繁殖系數(shù)和較長的繁殖時(shí)間已無法滿足生產(chǎn)上對雪鐵芋優(yōu)良種苗的大量需求。因此,我們嘗試用組織培養(yǎng)方法對雪鐵芋實(shí)行快繁。
雪鐵芋于2012年1月10日在長春市十里堡花卉基地采購,1月12日選取健壯羽狀復(fù)葉的小葉片和復(fù)葉軸作外植體,酒精消毒10s,升汞消毒10min后,接種于添加不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基中,4月15日觀測,結(jié)果見表1和表2。
表1 不用植物生長調(diào)節(jié)劑對復(fù)葉軸誘導(dǎo)的影響
1.2.1 植物生長調(diào)節(jié)劑對葉片愈傷組織、不定芽誘導(dǎo)的影響。設(shè)計(jì)不同濃度的6-芐基腺嘌呤(6-BA)與α-萘乙酸(NAA)組合,共12個(gè)處理,每個(gè)處理均添加MS+蔗糖30g/L+瓊脂6.5g/L,每處理接種葉片20瓶,每瓶接種1塊1cm2的葉片。觀測愈傷組織、不定芽、不定根發(fā)生情況。
1.2.2 植物生長調(diào)節(jié)劑對復(fù)葉柄愈傷組織、不定芽誘導(dǎo)的影響。設(shè)計(jì)不同濃度的6-BA、NAA與、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)組合,共10個(gè)處理,見表2。每個(gè)處理均添加MS+蔗糖30g/L+瓊脂6.5g/L,每處理接種復(fù)葉軸20瓶,每瓶接種1段約0.5~1cm長的復(fù)葉軸。觀測愈傷組織、不定芽、不定根發(fā)生情況。
每個(gè)濃度的6-BA都有愈傷組織發(fā)生,但數(shù)量很少。不同濃度的6-BA都能誘導(dǎo)出不定芽。隨著6-BA濃度增加,單個(gè)外植體誘導(dǎo)出的不定芽數(shù)量增多,但每個(gè)不定芽的體量變小。6BA濃度為3或4mg/L時(shí),不定芽的數(shù)量和單體體量最好。并且該試管苗由于沒有塊莖,移栽后1年內(nèi)地上部分植株生長沒有變化,在地下根部會逐漸形成塊莖,只有當(dāng)新形成的塊莖生長1年以上,直徑達(dá)1cm以上時(shí),才會有新的復(fù)葉自塊莖萌發(fā)。
培養(yǎng)基里添加NAA后明顯促進(jìn)了愈傷組織的發(fā)生,且隨著NAA濃度增加,愈傷組織分裂旺盛。但添加NAA后明顯抑制了不定芽的形成,在2012年4月15日觀測時(shí),添加濃度1mg/L以上濃度的培養(yǎng)基中,接種材料均沒有不定芽發(fā)生,只有濃度為6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L的處理中葉片既有不定芽又有不定根生成。
經(jīng)試驗(yàn)觀測,雪鐵芋復(fù)葉軸相對于葉片愈傷發(fā)生慢、數(shù)量少,且不易形成不定芽,在觀測的十個(gè)處理中,只有濃度為6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L的處理中有不定芽發(fā)生。
由表1可知,當(dāng)培養(yǎng)基中分別添加1mg/L或2mg/L的6-BA時(shí),隨著NAA濃度的增加,愈傷組織生長旺盛;但6-BA濃度增加至6mg/L以上時(shí),即便增加NAA濃度,愈傷組織形成也受到抑制,直至無愈傷組織形成。6-BA濃度增加后,也明顯抑制了不定根的生成,只有在6BA1mg/L+NAA2mg/L和6BA2mg/L+NAA0.2mg/L的處理中,有不定根發(fā)生。
本課題組利用雪鐵芋葉片和復(fù)葉軸進(jìn)行組織培養(yǎng),均培養(yǎng)出了組培苗。用葉片作外植體時(shí),易形成不定芽、不定根,不易形成塊莖。獲得的組培苗需移栽1年后,才會在新形成的塊莖上有新的復(fù)葉自塊莖萌發(fā)。誘導(dǎo)不定芽發(fā)生的最佳6-BA濃度是3~6mg/L,誘導(dǎo)不定根發(fā)生的最佳NAA濃度是2mg/L。用復(fù)葉軸作外植體時(shí),愈傷組織發(fā)生緩慢,較難形成不定芽,但易在試管內(nèi)形成塊莖。
[1]楊其保.雪鐵芋種植技術(shù)[J].廣西熱帶農(nóng)業(yè),2003,3:38.
[2]王建宇,孫兆軍.北方雪鐵芋繁育技術(shù)研究[J].北方園藝,2007(4):127~128.
1004-7026(2017)14-0046-02
S682.3
A
10.16675/j.cnki.cn14-1065/f.2017.14.029
吉林省科技廳自然基金項(xiàng)目(項(xiàng)目編號20140101018JC);吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(項(xiàng)目編號:吉教科合字[2014]第283號)。
馬艷麗,女,1971年4月生,長春大學(xué)園林學(xué)院副教授,東北師范大學(xué)博士研究生。