王云雀，黃湘壹

（1.武漢理工大學(xué)校醫(yī)院，湖北 武漢 430070；2.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院，湖南 衡陽 421001）

HIF-1α和Rac1在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義

王云雀1，黃湘壹2

（1.武漢理工大學(xué)校醫(yī)院，湖北 武漢 430070；2.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院，湖南 衡陽 421001）

目的探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）和Ras相關(guān)的C3肉毒底物1（Racl）在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義。方法選取正常肝組織20例、肝硬化組織42例及肝細(xì)胞癌組織58例，應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法檢測組織中HIF-1α和Racl蛋白的表達(dá)，分析其表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。結(jié)果HIF-1α主要為胞核或胞漿著色，Rac1為胞漿著色。HIF-1α蛋白在正常肝組織中的陽性表達(dá)率為0.0%（0/20），肝硬化組織為45.2%（19/42），原發(fā)性肝癌組織為81.0%（47/58），其中高分化陽性表達(dá)率為53.3%，中分化為83.3%，低分化為100.0%。HIF-1α蛋白在原發(fā)性肝癌發(fā)生、發(fā)展中的表達(dá)依次升高（P＜0.05）。且原發(fā)性肝癌組織中HIF-1α蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。Rac1蛋白表達(dá)在正常肝組織中的陽性表達(dá)率為0.0%（0/20），癌旁肝硬化組織為40.5%（17/42），原發(fā)性肝癌組織為77.6%（45/58），其中高分化陽性表達(dá)率為60%，中分化為73%，低分化為94.7%。Rac1蛋白在肝癌發(fā)生、發(fā)展中的表達(dá)依次升高（P＜0.05）。肝癌組織Rac1蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。HIF-1α蛋白的陽性表達(dá)率與Rac1蛋白的陽性表達(dá)率呈正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論HIF-1α、Rac1與原發(fā)性肝癌癌變及進(jìn)展有關(guān)，聯(lián)合檢測兩者蛋白的表達(dá)有助于判斷肝癌的病變程度及預(yù)后。

原發(fā)性肝癌；缺氧誘導(dǎo)因子-1α；Ras相關(guān)的C3肉毒底物1；免疫組織化學(xué)法

近年來研究顯示，缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia inducible factor1，HIF1α）[1-4]、Ras相關(guān)的C3肉毒底物 1（ras-related C3 botulinum toxin substrate 1，Rac 1）[5-8]在許多腫瘤組織中異常表達(dá)。通過一系列信號傳導(dǎo)，HIF-1α、Rac1在腫瘤組織中發(fā)揮多種生物學(xué)作用，促進(jìn)新生血管的形成，參與腫瘤的發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移。HIF-1α、Racl與肝癌共同關(guān)系的研究尚未見報(bào)道，本研究利用免疫組織化學(xué)法檢測HIF-1α、Racl蛋白在肝癌中的表達(dá)，探討HIF-1α、Racl與肝癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性，為探討新的肝癌診斷和治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象

隨機(jī)選取2009年1月-2014年12月南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院病理科原發(fā)性肝癌組織石蠟包埋標(biāo)本58例（男性39例，女性19例）、癌旁肝硬化組織石蠟包埋標(biāo)本42例（男性31例，女性11例），癌旁非硬化組織石蠟包埋標(biāo)本20例（男性13例，女性7例）。其中，年齡27～71歲，平均49.2歲。58例肝癌患者術(shù)前未接受放、化療，未使用任何抗腫瘤藥物。組織學(xué)分級根據(jù)世界衛(wèi)生組織2003年腫瘤細(xì)胞分化程度分類標(biāo)準(zhǔn)：低分化癌19例，中分化癌24例，高分化癌15例。TNM分期根據(jù)國際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)2000年修訂的標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期22例，Ⅱ期24例，Ⅲ期8例，Ⅳ期4例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分類：無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移37例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例。上述蠟包埋標(biāo)本置于10%甲醛溶液固定，經(jīng)脫水、透明、浸蠟、包埋后4μm連續(xù)切片，進(jìn)行蘇木精-伊紅染色法（hematoxylineosin staining，HE）和免疫組織化學(xué)法染色。上述所有患者的診斷經(jīng)1或2位經(jīng)驗(yàn)豐富的高級職稱病理醫(yī)師證實(shí)。

1.2 免疫組織化學(xué)法

采用免疫組織化學(xué)Envision二步法試劑盒（丹麥DAKO公司）檢測，操作步驟如下：60℃烘烤切片2 h，石蠟切片、脫蠟、水化，90℃微波抗原熱修復(fù)2 min，依次滴加30 ml/L雙氧水H2O2室溫下滅活內(nèi)源性過氧化物酶10 min；STAT3、p-STAT3鼠抗人一抗（分別1∶100，1∶150稀釋）（美國Santa Cruz公司），4℃保存16 h；聚合物增強(qiáng)劑（Envision自帶）室溫孵育20 min；酶標(biāo)抗鼠/兔聚合物（Envision自帶）室溫孵育25 min；DAB（江蘇蘇州碧云天有限公司）顯色。陰性對照組中以PBS（江蘇蘇州碧云天有限公司）代替一抗。

1.3 結(jié)果判定

HIF-1α和Rac1的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：HIF-1α的陽性表達(dá)為細(xì)胞核或胞漿被染成淺黃色、棕黃色或黃褐色顆粒。Racl蛋白陽性表達(dá)主要位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，呈淺黃色或深黃色。

按染色強(qiáng)度計(jì)分：無染色為0分，輕度染色為1分，中度染色為2分，強(qiáng)染色為3分；按陽性染色細(xì)胞百分率計(jì)分：陽性細(xì)胞數(shù)≤10%為0分，陽性細(xì)胞數(shù)11%～25%為1分，陽性細(xì)胞數(shù)26%～50%為2分，陽性細(xì)胞數(shù)＞50%為3分。然后將2類計(jì)分結(jié)果的乘積分為以下等級：0分為（-），1～2分為（+），3～4分為（++），5～6分為（+++）。設(shè)定（+）～（+++）為陽性表達(dá)，（-）為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，兩兩比較，校正檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.0125，相關(guān)分析計(jì)算Spearman等級相關(guān)系數(shù)，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HIF-1α、Racl在癌旁非硬化肝組織和原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)

免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示，HIF-1α的陽性表達(dá)為細(xì)胞核或胞漿被染成淺黃色、棕黃色或黃褐色顆粒。癌旁非硬化、癌旁肝硬化及原發(fā)性肝癌3組組織中HIF-1α表達(dá)比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=41.945，P=0.000）（見表1）。癌旁非硬化、癌旁肝硬化及原發(fā)性肝癌組織中HIF-1α的陽性表達(dá)率分別為0.0%、45.2%和81.0%，原發(fā)性肝癌組織中HIF-1α高于癌旁肝硬化和癌旁非硬化肝組織（χ2=36.325和13.910，均P=0.000），癌旁肝硬化組織中HIF-1α表達(dá)高于癌旁非硬化肝組織（χ2=10.038，P=0.002）。

Racl蛋白陽性染色主要定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，呈淺黃色或棕黃色。癌旁非硬化、癌旁肝硬化及原發(fā)性肝癌3組組織中Racl表達(dá)比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=35.167，P=0.000）（見表1）。癌旁非硬化、癌旁肝硬化及原發(fā)性肝癌組織中 Racl的陽性表達(dá)率分別為 0.0%、40.5%和77.6%，原發(fā)性肝癌組織中Racl高于癌旁肝硬化和癌旁非硬化肝組織（χ2=14.293和32.386，均P= 0.000），癌旁肝硬化組織中Racl表達(dá)高于癌旁非硬化肝組織（χ2=8.276，P=0.004）。

表1 3組H I F-1α、R ac1陽性率的比較

2.2 HIF-1α、Racl與原發(fā)性肝癌的組織學(xué)分級、分期及淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系

根據(jù)臨床分期對患者進(jìn)行分組，Ⅲ、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期原發(fā)性肝癌中，HIF-1α的陽性表達(dá)率分別為91.7%（11/12）和78.3%（36/46），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.749，P=0.291）；Ⅲ、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期原發(fā)性肝癌中，Rac1的陽性表達(dá)率分別為91.7%（11/12）和73.9%（34/46），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.725，P=0.189）。見表2。

根據(jù)組織學(xué)分化程度對患者進(jìn)行分組，低、中、高分化組HIF-1α的陽性表達(dá)率分別為100.0%（19/19）、83.3%（20/24）和53.3%（8/15），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.019，P=0.002）。低、中、高分化組Rac1的陽性表達(dá)率分別為94.7%（18/19）、75.0%（18/24）和53.3%（8/15），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.299，P=0.016）。見表2。

表2 不同病理特征的H IF-1α、Rac1蛋白表達(dá)陽性率比較

根據(jù)淋巴結(jié)狀態(tài)對患者進(jìn)行分組，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組HIF-1α的陽性表達(dá)率分別為70.3%（26/37）和100.0%（21/21），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.704，P=0.006），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組HIF-1α陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組原發(fā)性肝癌中，Rac1的陽性表達(dá)率分別為67.6%（25/37）和95.2%（20/21），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.898，P=0.015），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組Rac1陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。見表2。

2.3 在癌旁肝硬化組織和原發(fā)性肝癌組織中HIF-1α與R ac1表達(dá)的相關(guān)性

42例癌旁肝硬化組織組織中，Racl和HIF-1α蛋白共同表達(dá)陽性14例，共同表達(dá)陰性20例，采用Spearman等級相關(guān)性分析，Racl與HIF-1α蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.314，P=0.012）。見表3。

表3 癌旁肝硬化組織中HIF-1α與Rac1蛋白表達(dá)的關(guān)系 例

58例原發(fā)性肝癌組織中，Racl和HIF-1α蛋白共同表達(dá)陽性40例，共同表達(dá)陰性6例，采用Spearman等級相關(guān)性分析，Racl與HIF-1α蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.486，P=0.008）。見表4。

表4 原發(fā)性肝癌組織中H I F-1α與R ac1蛋白表達(dá)的關(guān)系例

3 討論

肝癌是嚴(yán)重威脅我國人民群眾健康的主要疾病之一。近年來，肝癌的發(fā)病率有明顯上升趨勢，且發(fā)病呈年輕化趨勢。從正常肝組織到肝硬化直至原發(fā)性肝癌的演變與高危型HBV感染有關(guān)，但是一過性、單純的HBV感染不足以引起細(xì)胞發(fā)生癌變，而且從病毒感染發(fā)展到肝癌要經(jīng)歷相當(dāng)長的一段時(shí)間。由此可以推測肝癌的發(fā)生、發(fā)展是多個(gè)因素、多個(gè)環(huán)節(jié)共同作用的結(jié)果。近年來，一些研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α、Rac1蛋白與肝癌關(guān)系密切。

HIF-1α盡管在正常氧濃度下也表達(dá)，但是很快可被泛素蛋白酶體系統(tǒng)所降解；而在缺氧狀態(tài)時(shí)是血管生成的核心調(diào)控因子，其降解過程被阻斷，導(dǎo)致HIF-1α在核內(nèi)蓄積，與β蛋白亞基結(jié)合，形成有活性的HIF-1啟動(dòng)多種下游基因[3]，至今已明確的靶基因有100余種，主要分為以下幾類：①參與腫瘤細(xì)胞的增殖和凋亡的基因；②編碼與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的基因，如MMP；③參與血管發(fā)育、重塑與張力調(diào)節(jié)的基因等，如ⅠNOS、VEGF、EGF和uPA；④調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成的基因，如EPO；⑤參與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)代謝及膠原合成的基因[9-11]；⑥其他類基因：如腸三葉因子（腸黏膜屏障的保護(hù)因子）。由此可見，在上述諸多方面HIF-1α靶基因的編碼產(chǎn)物發(fā)揮相當(dāng)重要的作用。

腫瘤生長到特定時(shí)期，氧的供給不能滿足腫瘤生長的需要，或因間質(zhì)壓力上升至腫瘤不成熟血管塌陷時(shí)，局部微環(huán)境處于缺氧狀態(tài)，這是實(shí)體性腫瘤物理微環(huán)境的基本特征之一，可刺激宿主細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞合成分泌促血管生成因子，促進(jìn)局部新生血管形成。缺氧條件下HIF-1α啟動(dòng)多種下游基因，如胰島素樣生長因子21、胰島素樣生長因子22、血管內(nèi)皮生長因子等[3，12-13]，從而維持腫瘤細(xì)胞的能量供應(yīng)，使細(xì)胞適應(yīng)缺氧狀態(tài)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長和分裂，而且可通過減少有氧代謝中反應(yīng)性氧類對細(xì)胞DNA復(fù)制的破壞，促進(jìn)腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移。

大量免疫組織化學(xué)法證明，HIF-1α在人類多種腫瘤中表達(dá)增加，HIF-1α通過調(diào)節(jié)不同靶基因的轉(zhuǎn)錄活性及其自身的表達(dá)，參與腫瘤的增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程，其過度表達(dá)與惡性腫瘤的不良預(yù)后有關(guān)[14]。張?jiān)伱返萚15]對36例肺癌組織和12例癌旁組織采用RT-PCR、凝膠電泳半定量方法檢測HIF-1α的表達(dá)，結(jié)果顯示，HIF-1 mRNA在癌癥組織中的表達(dá)高于癌旁組織，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組。SHI等[16]研究發(fā)現(xiàn)，HIF1通過促進(jìn)QSOX1的表達(dá)有助于胰腺癌細(xì)胞的入侵。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果也顯示，HIF-1α蛋白在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)高于癌旁肝硬化組織組織和癌旁非硬化組織，且原發(fā)性肝癌組織HIF-1α表達(dá)與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)。HIF-1α蛋白在癌旁非硬化組織、癌旁肝硬化組織及原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)率分別為0.0%（0/20），145.2%（17/42）和81.0%（47/58），其中肝癌Ⅲ、Ⅳ期陽性表達(dá)率高于Ⅰ、Ⅱ期（91.7%vs 78.3%），隨著分化程度的降低陽性率升高（53.3%、83.3%和100%）。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者陽性率高于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，說明HIF-1α蛋白高表達(dá)的肝癌具有更強(qiáng)的侵襲能力，提示HIF-1α其過度表達(dá)可能與肝癌不良預(yù)后有關(guān)，對其表達(dá)程度的檢測具有重要的生物學(xué)和臨床價(jià)值。

Rac-1基因位于人染色體7p22，Rac1基因啟動(dòng)子富含GC堿基，具有管家基因的特征，其編碼產(chǎn)物是小G蛋白Rho家族重要成員，有（Rac1、Rac2、Rac3）3個(gè)亞型。Rac1蛋白可廣泛表達(dá)于機(jī)體各組織中，通過結(jié)合或水解GTP核苷酸，在GDP結(jié)合形式（失活狀態(tài)）與GTP結(jié)合形式（激活狀態(tài)）間相互轉(zhuǎn)換[17]。腫瘤組織中，活性形式的Rac1蛋白參與通過調(diào)節(jié)細(xì)胞絲狀偽足的生成和膜皺縮[17-19]，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，影響腫瘤的生長。此外，Rac-1還通過增加細(xì)胞內(nèi)超氧化物陰離子，可抑制腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡[6]，對腫瘤的發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移發(fā)揮重要作用。

目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)表明，Rac1與人類惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，在多種惡性腫瘤中呈過表達(dá)。彭慧娟等[20]通過比較卵巢正常組織與卵巢良性漿液性囊腺瘤組織、卵巢漿液性腺癌組織中的Rac1蛋白的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)Rac1可能影響細(xì)胞的增殖和細(xì)胞遷移能力從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的惡性生物行為，導(dǎo)致卵巢漿液性腺癌組織中Rac1蛋白表達(dá)水平高于卵巢良性漿液性囊腺瘤組織和卵巢正常組織；孫旭日等[21]應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測Rac1、VEGF在43例肝細(xì)胞癌組織、43例癌旁肝組織及21例正常肝組織的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Rac1蛋白在肝細(xì)胞癌組織表達(dá)高于癌旁肝組織，可能是通過上調(diào)VEGF的表達(dá)促進(jìn)腫瘤血管生成，參與肝細(xì)胞癌的侵襲、轉(zhuǎn)移機(jī)制。田銳等[22]分別采用EDU和CCK-8方法檢測Rac1對胰腺癌細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Rac1可以促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的增殖。越來越多的報(bào)道證實(shí)，Rac1在腫瘤及其增殖、轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，在原發(fā)性肝癌組織中Rac1的表達(dá)高于癌旁非硬化組織，且與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)。癌旁硬化組織Rac1表達(dá)高于癌旁非硬化組織。Rac1蛋白在癌旁非硬化組織、癌旁硬化組織及原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)率分別為0.0%（0/20），40.5%（17/42）和77.6%（45/58），其中肝癌Ⅲ、Ⅳ期陽性表達(dá)率高于Ⅰ、Ⅱ期（91.7%vs 73.9%），隨著分化程度的降低陽性率升高（60.0%、75.0%和94.7%）伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者陽性率為95.2%，高于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（67.6%）。

在某些惡性腫瘤中存在HIF-1α和Rac1蛋白共同表達(dá)的情況。畢國斌等[23]應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測63例人胃癌組織和40例癌旁組織標(biāo)本中HIF-1α和Rac-1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)胃癌組織中HIF-1α和Rac-1的表達(dá)增加，與胃癌的侵襲性生物學(xué)行為密切相關(guān)，且表達(dá)呈正相關(guān)。DU等[24]研究發(fā)現(xiàn)，Rac1在人類乳腺癌中能激活促進(jìn)HIF-1α的表達(dá)。本研究分析顯示，HIF-1α與Rac1的表達(dá)在肝癌前病變及肝癌中呈正相關(guān)，提示HIF-1α與Rac1可能關(guān)系密切。

綜上所述，HIF-1α和Rac1在肝癌前病變及原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)水平均增高，浸潤深度越深，分化程度越低，表達(dá)水平越高。且在原發(fā)性肝癌組織中兩者的表達(dá)呈正相關(guān)，提示在肝癌的病理演變過程中，HIF-1α與Rac1相互間可能存在協(xié)同調(diào)控作用，促進(jìn)肝癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。分析兩者協(xié)同作用的機(jī)制可能為腫瘤組織中Racl通過激活p38 MAPK活化HIF-1α末端活性區(qū)，提高HIF-1α的轉(zhuǎn)錄活性[25]，且通過抑制VHL蛋白水平，Rac1可在低氧狀態(tài)下增加HIF-1α的穩(wěn)定性[26]。

總之，HIF-1α和Rac1的聯(lián)合檢測有助于評價(jià)原發(fā)性肝癌的生物學(xué)行為和預(yù)后，為早期診斷和治療提供理論依據(jù)。

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（童穎丹 編輯）

Expressions of HIF-1α and Rac1 and their significance in hepatocellular carcinoma

Yun-que Wang1,Xiang-yi Huang2
(1.School Infirmary,Wuhan University of Technology,Wuhan,Hubei 430070,China;2.The Second Affiliated Hospital,University of South China,Hengyang,Hunan 421001,China)

ObjectiveTo explore the expressions of hypoxia inducible factor 1 (HIF-1α)and Rac1 proteins and their clinical significance in hepatocellular carcinoma.MethodsImmunohistochemistry streptavidinperoxidase (SP)method was used to detect the expressions of HIF-1αand Rac1 proteins in 58 cases of hepatocellular carcinoma,42 cases of hepatocirrhosis and 20 cases of normal liver tissues.The findings were analyzed on basis offollow-up information.MethodsThe cellularstaining pattern forHIF-1α was predominantly in the nuclei or cytoplasm,while Rac1 was positively expressed in the cytoplasm.The positive rates of HIF-1α in the normal liver tissues,the hepatocirrhosis tissue and the hepatocellular carcinoma were 0.0%(0/20),45.2%(19/42)and 81.0%(47/58)respectively,and there were significant differences among the threegroups(P＜0.05)．The expression of HIF-1α protein in the hepatocellular carcinoma was closely correlated with the histologicalgrade,TNMgrade and lymphatic metastasis(P＜0.05).The positive rates of Rac1 in the normal liver tissues,the hepatocirrhosis tissue and the hepatocellular carcinoma were 0.0%(0/20), 40.5%(17/42)and 77.6%(45/58)respectively,and there were significant differences among thegroups(P＜0.05). The expression of Rac1 protein in the hepatocellular carcinoma was closely correlated with the histologicalgrade,TNMgrade and lymphatic metastasis (P＜0.05).Spearman rank correlation analysis revealed a positivecorrelation between HIF-1α and Rac1 expressions in the hepatocellular carcinoma(P＜0.05).ConclusionsThe expressions of HIF-1α and Rac1 are related to the canceration and progress of hepatocellular carcinoma,their united application can be used to determine the degree and prognosis of hepatocellular carcinoma.

hepatocellular carcinoma;hypoxia inducible factor-1α;Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1;immunohistochemistry

R735.7

A

2016-04-26

黃湘壹，E-mail：417354749@qq.com；Tel：13786494910

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.20.016

1005-8982（2017）20-0076-06