王立平 馬新福 張 鵬 殷 麟 趙 興

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤放療科，青海 西寧 810001)

放療對鼻咽癌患者血清血管內(nèi)皮生長因子及受體、血小板反應(yīng)蛋白-1表達(dá)的影響

王立平 馬新福1張 鵬2殷 麟 趙 興

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤放療科，青海 西寧 810001)

目的觀察放療對鼻咽癌患者血清血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、VEGF受體(VEGFR)-2和血小板反應(yīng)蛋白(TSP)-1表達(dá)的影響。方法46例鼻咽癌患者為觀察組，應(yīng)用放射治療，觀察治療前后血清VEGF、VEGFR-2和TSP-1的變化，20例體檢健康成人血清標(biāo)本為對照組。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測兩組血清VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)。結(jié)果觀察組治療前、后血清VEGF、VEGFR-2表達(dá)均明顯高于對照組，治療前、后血清中TSP-1表達(dá)均明顯低于對照組。觀察組治療前Ⅲ+Ⅳ期患者血清VEGF、VEGFR-2的表達(dá)明顯高于Ⅰ+Ⅱ期，治療后VEGF、VEGFR-2表達(dá)均下降，但是Ⅲ+Ⅳ期患者血清VEGF、VEGFR-2下降值明顯高于Ⅰ+Ⅱ期。觀察組治療前Ⅲ+Ⅳ期患者血清TSP-1表達(dá)明顯低于Ⅰ+Ⅱ期，治療后TSP-1表達(dá)均升高，但是Ⅲ+Ⅳ期患者血清TSP-1的升高值明顯高于Ⅰ+Ⅱ期。線性相關(guān)分析顯示觀察組治療前、后血清VEGF和VEGFR-2的表達(dá)呈正相關(guān)，VEGF和TSP-1的表達(dá)負(fù)相關(guān)性。結(jié)論放療對鼻咽癌患者血清VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)有一定影響，尤其是對Ⅲ+Ⅳ期患者。腫瘤發(fā)生和進(jìn)展過程中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)具有協(xié)同效應(yīng)。

鼻咽癌；放射治療；血管內(nèi)皮生長因子；血管內(nèi)皮生長因子受體2；血小板反應(yīng)蛋白-1

鼻咽癌是臨床常見的頭頸部惡性腫瘤之一，部分患者就診時(shí)已達(dá)到晚期，治療失敗的主要原因是局部區(qū)域復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移〔1〕，放射治療是其重要治療方法〔2〕。惡性腫瘤進(jìn)展中血管生成是重要的生物學(xué)因素〔3〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是重要的血管生成促進(jìn)因子，其在作用過程中通過VEGF受體(VEGFR)-2發(fā)揮重要的作用。血小板反應(yīng)蛋白(TSP)-1是TSPs家族A亞組中的成員，目前認(rèn)為是血管生成的抑制因子〔4〕，VEGF、VEGFR-2和TSP-1對腫瘤間質(zhì)的血管生成具有動(dòng)態(tài)平衡性的調(diào)節(jié)作用。本文觀察放療對鼻咽癌患者血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的影響，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2015年1～12月青海大學(xué)附屬醫(yī)院確診為鼻咽癌的患者46例為觀察組，均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn)，均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有風(fēng)濕免疫性疾病；②合并其他器官惡性腫瘤；③近3個(gè)月有嚴(yán)重感染。男26例，女20例，年齡52～86(平均59.5)歲。20例經(jīng)體檢證實(shí)為健康成人的血清標(biāo)本為對照組，男11例，女9例，年齡50～65(平均52.2)歲。兩組一般資料無明顯差異。

1.2治療措施 觀察組均行放療，放射總劑量70～78 Gy，治療時(shí)間6～8 w。

1.3觀察指標(biāo) 觀察組于治療前、治療6～8 w后抽取空腹靜脈血3 ml，對照組常規(guī)抽取空腹靜脈血3 ml，離心后分離血清，于-20℃冰箱中凍存，樣本均于1個(gè)月內(nèi)集中檢測。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)，按說明書進(jìn)行規(guī)范性操作，做好質(zhì)控工作。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)或方差分析、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1觀察組治療前、后與對照組血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1表達(dá)的比較 對照組，觀察組治療前后血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表1。

2.2觀察組不同臨床分期患者治療前、后血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1變化的比較 觀察組治療前Ⅲ+Ⅳ期血清中VEGF、VEGFR-2的表達(dá)明顯高于Ⅰ+Ⅱ期；治療后VEGF、VEGFR-2的表達(dá)均下降，但是Ⅲ+Ⅳ期下降值明顯高于Ⅰ+Ⅱ期組(P<0.05)。觀察組治療前Ⅲ+Ⅳ期血清中TSP-1的表達(dá)明顯低于Ⅰ+Ⅱ期，治療后TSP-1的表達(dá)均升高，但是Ⅲ+Ⅳ期升高值明顯高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05)。見表2。

表1 觀察組治療前、后與對照組血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1表達(dá)的比較

表2 觀察組不同臨床分期患者治療前、后血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1變化的比較

與治療前比較:1)P<0.05

2.3觀察組治療前、后血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的相關(guān)性 治療前血清中VEGF和VEGFR-2(r=0.47，P=0.045 7)的表達(dá)呈正相關(guān)，VEGF和TSP-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.51，P=0.038 4)；治療后血清中VEGF和VEGFR-2(r=0.53，P=0.014 5)的表達(dá)呈正相關(guān)，VEGF和TSP-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.49，P=0.047 0)。

3 討 論

鼻咽癌是發(fā)生于鼻咽部黏膜的癌，在光鏡和超微結(jié)構(gòu)中被證實(shí)具有鱗狀上皮分化，包括鱗狀細(xì)胞癌、非角化癌(分化型或未分化型)和基底細(xì)胞樣鱗狀細(xì)胞癌。如果放射治療靶區(qū)范圍大，要注意保護(hù)正常器官〔5，6〕。腫瘤進(jìn)展時(shí)血清中相關(guān)指標(biāo)出現(xiàn)明顯變化〔7〕。VEGF和TSP-1在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)與正常組織的表達(dá)常有明顯差別，其分泌時(shí)可以引起血清中的表達(dá)異?！?，9〕。TSP-1是一種血管生成的抑制因子，對調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、黏附有一定影響〔10〕，研究認(rèn)為TSP-1分泌減少時(shí)可以引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的活化，同時(shí)使血管內(nèi)皮細(xì)胞具有管腔形成能力〔11〕。VEGF高表達(dá)時(shí)可以引起內(nèi)皮細(xì)胞增殖，同時(shí)使出芽狀的血管和散在的單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞具有分化成為血管的能力〔12，13〕，并具有血管的功能。在作用過程中VEGF通過VEGFR-2發(fā)揮作用，二者的協(xié)同作用可以促進(jìn)間質(zhì)血管新生。血清中VEGF和TSP-1的表達(dá)在一定程度上可以作為腫瘤治療的監(jiān)測指標(biāo)。吳巨海等〔14〕對鼻咽癌患者應(yīng)用放療，結(jié)果顯示放療對血清中VEGF的表達(dá)有下調(diào)作用，同時(shí)認(rèn)為血清中VEGF表達(dá)升高時(shí)可能提示腫瘤復(fù)發(fā)。本研究結(jié)果提示VEGF和VEGFR-2二者在腫瘤的表達(dá)與正常機(jī)體血清中的表達(dá)存在異常，這與組織學(xué)VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)具有一致性〔15，16〕，也提示檢測血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)可以在一定程度上反映腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平，血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的檢測標(biāo)本獲取比組織學(xué)容易，創(chuàng)傷小，監(jiān)測容易，臨床應(yīng)用方便。本文提示放療對于血清中VEGF和TSP-1的影響明顯，尤其是對于臨床分期高的鼻咽癌患者血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的改善作用更明顯，高分期的腫瘤VEGF、VEGFR-2表達(dá)高，TSP-1的表達(dá)更低，其對血管的生成的促進(jìn)作用強(qiáng)，而放療可以在一定程度上使血管生成受到抑制，也使治療效果與VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表達(dá)聯(lián)系在一起，提示VEGF和TSP-1在腫瘤形成、進(jìn)展及治療過程中二者均存在協(xié)同負(fù)向作用。TSP-1和VEGF在腫瘤的中表達(dá)是互為拮抗的，TSP-1的表達(dá)下調(diào)或丟失、VEGF的表達(dá)升高使腫瘤細(xì)胞易于侵襲周圍組織和鄰近臟器，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和血管生成。

1Lee N，Xia P，Quivey JM，etal.Intensity-modulated radiotherapy in the treatment of nasopharyngeal carcinoma：an update of the UCSF experience.〔J〕.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2002；53(1)：12-22.

2Xia P，F(xiàn)u KK，Wong GW，etal.Comparison of treatment plans involving intensity-modulated radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2000；48(2)：329-37.

3劉 巖，盛玉文，張華鋒，等.VEGF、TSP-1在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義〔J〕.江蘇醫(yī)藥，2010；36(12)：1382-4.

4陶紅光，于東風(fēng)，李紅春.TSP-1和VEGF在胃癌微血管生成中的調(diào)控作用及其臨床意義〔J〕.中華解剖與臨床雜志，2010；15(4)：246-9.

5Kam MK，Chau RM，Suen J，etal.Intensity-modulated radiotherapy in nasopharyngeal carcinoma：dosimetric advantage over conventional plans and feasibility of dose escalation〔J〕.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2003；56(1)：145-57.

6Yi JL，Gao L，Huang XD，etal.Nasopharyngeal carcinoma treated by radical radiotherapy alone：ten-year experience of a single institution〔J〕.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2006；65(1)：161-8.

7Kim TJ，Lee YS，Kang JH，etal.Prognostic significance of expression of VEGF and Cox-2 in nasopharyngeal carcinoma and its association with expression of C-erbB2 and EGFR〔J〕.J Surg Oncol，2011；103(1)：46-52.

8丁旭青，韓玉培.食管鱗癌p53、TSP-1、VEGF表達(dá)與腫瘤血管生成〔J〕.中國腫瘤外科雜志，2009；11(4)：209-11.

9Karavasilis V，Malamou-Mitsi V，Briasoulis E，etal.Angiogenesis in cancer of unknown primary：clinicopathological study of CD34，VEGF and TSP-1〔J〕.BMC Cancer，2005；5(1)：1-7.

10胡秀峰，周 芳.血清TSP-1、VEGF對評價(jià)食管癌患者化療療效的意義〔J〕.實(shí)用癌癥雜志，2007；22(1)：37-40.

11Wakiyama T，Shinohara T，Shirakusa T，etal.The localization of thrombospondin-1 (TSP-1)，cysteine-serine-valine-threonine-cysteine-glycine (CSVTCG) TSP receptor，and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in colorectal cancer〔J〕.Histol Histopathol，2001；16(2)：345-51.

12Perroud HA，Alasino CM，Rico MJ，etal.Abstract 4665：VEGF/SVEGFR-2 and VEGF/TSP-1 ratios as probable predictors of response to metronomic chemotherapy with cyclophosphamide and celecoxib in advanced breast cancer patients〔J〕.Cancer Res，2013；73(8)：4665-5.

13Wiesner T，Bugl S，Mayer F，etal.Differential changes in platelet VEGF，Tsp，CXCL12，and CXCL4 in patients with metastatic cancer〔J〕.Clin Experim Metast，2010；27(3)：141-9.

14吳巨海，張衛(wèi)民，劉?？?鼻咽癌放療前后血清VEGF和bFGF的變化〔J〕.中國熱帶醫(yī)學(xué)，2009；9(5)：841-2.

15Segawa Y，Oda Y，Yamamoto H，etal.Close correlation between CXCR4 and VEGF expression and their prognostic implications in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Oncol Rep，2009；21(5)：1197-202.

16李軼楠，李東寧.ID-1，VEGF及Tsp-1在皮膚鱗狀細(xì)胞癌和基底細(xì)胞癌組織中的表達(dá)〔J〕.中國皮膚性病學(xué)雜志，2013；22(8)：767-71.

〔2016-12-25修回〕

(編輯 苑云杰)

趙 興(1965-)，男，主任醫(yī)師，主要從事腫瘤放射治療研究。

王立平(1973-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤放射治療研究。

R736

A

1005-9202(2017)17-4297-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.061

1 胃腸外科 2 介入科