張緒美　徐政秀　張燕

【摘要】目的 探討IgG、Integrinβ6（整合素β6）、P16在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及其與患者預(yù)后的關(guān)系。方法 采用免疫組化SP二步法檢測IgG、Integrinβ6、P16在55例膠質(zhì)瘤和20例正常腦組織中的表達，原位雜交檢測IgG mRNA在膠質(zhì)瘤組織中的表達。結(jié)果 IgG、Integrinβ6、P16的表達陽性率在正常腦組織與膠質(zhì)瘤組均有顯著性差異（P均<0.05），膠質(zhì)瘤中IgG 與Integrinβ6的表達呈正相關(guān)（P<0.05），IgG與P16表達呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論 膠質(zhì)瘤中P16低表達，IgG、Integrinβ6高表達可能在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。

【關(guān)鍵詞】膠質(zhì)瘤；IgG；Integrinβ6；P16；免疫組化；原位雜交

【中圖分類號】R739.41 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.02..02

【Abstract】Objective To investigate the expression of IgG、Integrinβ6 and P16 in human glioma.Methods The expression of IgG、Integrinβ6 and P16 in tissue samples from 55 cases with glioma and 20 cases with normal brain tissue was detected by “SP two steps” of immunohistochemistry.Results Integrinβ6 and P16 between glioma tissue and normal brain tissue（P<0.05）.There was a positive correlation between IgG and Integrinβ6 expression （P<0.05），and negative correlation between IgG and P16 expression （P<0.05）.Conclusion Low expression of P16，over Expression of IgG and Integrinβ6 in glioma might correlate to carcinogenesis.

【Key words】gliomas；IgG；Integrinβ6；P16；immunohistochemistry；FISH

腦膠質(zhì)瘤起源于腦部神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，是最常見的顱內(nèi)腫瘤，約占所有顱內(nèi)腫瘤的45%左右，至今仍是全身腫瘤中預(yù)后最差的腫瘤之一。隨著研究的深入，免疫分子在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用成為研究的熱點。本研究應(yīng)用原位雜交、免疫組化方法檢測正常腦組織、不同級別的人腦膠質(zhì)瘤中IgG蛋白的表達水平，并探討其與膠質(zhì)瘤發(fā)展的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2012年1月～2014年12月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實的膠質(zhì)瘤標(biāo)本55例。男性30例，女性25例，年齡11～74歲。按2007年WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分類標(biāo)準(zhǔn)進行分級，并將Ⅰ～Ⅱ級歸為低級別組，Ⅲ～Ⅳ級為高級別組，低級別組25例，高級別組30例。另取20例正常腦組織（腦外傷內(nèi)減壓獲得）作為對照。

1.2 檢測方法

免疫組化SP二步法檢測IgG、Integrinβ6、P16蛋白表達，石蠟標(biāo)本5μm切片，常規(guī)脫蠟入水，熱抗原修復(fù)，SP法免疫組化染色，Integrinβ6、P16兩種抗體DAB鏡下控制顯色，IgG抗體AEC鏡下控制顯色。PBS 液代替一抗作陰性對照。

1.3 結(jié)果判定

顯微鏡下隨機觀察10個高倍視野，每個視野計數(shù)100個細(xì)胞。IgG以腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)紅色顆粒為陽性。Integrinβ6陽性染色為棕黃色顆粒， 分布于膠質(zhì)瘤細(xì)胞膜和細(xì)胞漿。P16陽性表達位于細(xì)胞核，胞質(zhì)部位出現(xiàn)著色視為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用x2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義

2 結(jié) 果

2.1 IgG、Integrinβ6、P16 在膠質(zhì)瘤中的表達

IgG在膠質(zhì)瘤組織中表達陽性率為74.5%（41/55），在正常腦組織中表達率0%（0/20），差異有顯著性（P<0.05）；IgG在低級別膠質(zhì)瘤中的表達率為48%（12/25）， 在高級別膠質(zhì)瘤中表達率為96.7（29/30）（P<0.05）。Integrinβ6 在正常腦組織中無表達，在膠質(zhì)瘤中表達陽性率為76.4%（42/55），差異有顯著性（P<0.05）；Integrinβ6 在低級別膠質(zhì)瘤中的表達率為64.0%（16/25），在高級別膠質(zhì)瘤中的表達率為86.7%（26/30）（P>0.05）。膠質(zhì)瘤組織中P16 陽性率為36.4%（20/55），在正常腦組織中表達率為95%（19/20）（P<0.05）；P16在低級別膠質(zhì)瘤中的表達率為56%（14/25），在高級別膠質(zhì)瘤中的表達率為20%（6/30）（P<0.05）。

2.2 膠質(zhì)瘤中IgG 表達與Integrinβ6、P16表達的相關(guān)性（見表1）

膠質(zhì)瘤中IgG與P16表達呈負(fù)相關(guān)（P<0.05﹚，與Integrinβ6表達呈正相關(guān)（P<0.05﹚。

3 討 論

膠質(zhì)瘤系浸潤性生長物，手術(shù)難以切除或根本不能手術(shù)，膠質(zhì)瘤的浸潤和復(fù)發(fā)是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。近年來，隨著研究的深入，免疫靶向治療成為膠質(zhì)瘤臨床研究的重點，對腫瘤免疫分子的研究也是腫瘤研究的熱點。

免疫球蛋白是一種在機體內(nèi)含量很高且具有重要功能的蛋白。根據(jù)重鏈的不同，免疫球蛋白可分為IgM、IgG、IgA、IgD和IgE五類[1]。IgG通過Fc段和Fc受體結(jié)合，介導(dǎo)多種免疫反應(yīng)，如噬菌作用、細(xì)胞內(nèi)吞作用、抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用、炎性介質(zhì)的釋放以及對B細(xì)胞活化和抗體產(chǎn)生的調(diào)控作用[2]。經(jīng)典的免疫學(xué)理論認(rèn)為，免疫球蛋白是B淋巴細(xì)胞的特征性產(chǎn)物，其它的體細(xì)胞不會表達免疫球蛋白。

IgG主要表達于惡性腫瘤細(xì)胞，在正常上皮及良性腫瘤中則處于低表達或無表達的狀態(tài)。IgG在上皮性腫瘤細(xì)胞的功能，文獻報道[3]，IgG類似生長因子，具有促進腫瘤細(xì)胞增殖、抑制凋亡的作用。

對膠質(zhì)瘤中IgG表達與Integrinβ6、P16表達的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，膠質(zhì)瘤中IgG與Integrinβ6高表達，二者表達呈正相關(guān)，P16低表達，與IgG表達呈負(fù)相關(guān)，提示三者相互作用，可能在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。

綜上所述，IgG在膠質(zhì)瘤腫瘤細(xì)胞中的異位表達具有重要的功能和病理學(xué)意義，IgG和腦膠質(zhì)瘤的惡性轉(zhuǎn)化具有相關(guān)性。對這一現(xiàn)象的深入研究，將可能揭示免疫球蛋白新的生理和病理功能，對腫瘤的診斷、預(yù)后判斷以及靶向治療提供新的思路。

參考文獻

[1] Amzel，L.M.& Poljak，R.J.Three-dimensional structure of immunoglobulins.Annu Rev Biochem，1979， 48， 961-97.

[2] 薛雨健，張 杰，汪明玉，等.IgG在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及其與OPN、MMP-2、MMP-9、P16的關(guān)系.解剖科學(xué)進展，2013， Nov，19（6）：513～515，519.

[3] 張朝陽，徐克森，楊廣運，等.反義整合素β6基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞作用的研究.中華醫(yī)學(xué)雜志.2007，October，87（37）：2645-2647.

本文編輯：李 豆endprint