秦峰，丁志祥，李小龍，孫毅，虞麗娟，季海剛，張琪

(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬常州市中醫(yī)醫(yī)院a.檢驗科,b.胸痛中心，江蘇常州 213003)

·臨床實驗研究·

IL-27在急性冠脈綜合征中的臨床應(yīng)用價值*

秦峰a，丁志祥a，李小龍b，孫毅b，虞麗娟a，季海剛b，張琪b

(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬常州市中醫(yī)醫(yī)院a.檢驗科,b.胸痛中心，江蘇常州 213003)

目的 探討IL-27在急性冠脈綜合征(ACS)中的臨床應(yīng)用價值。方法 入選208例ACS患者，其中ST段抬高的心肌梗死(STEMI)76例、非ST段抬高的心肌梗死(NSTEMI)58例和不穩(wěn)定心絞痛(UAP)74例；根據(jù)冠脈病變數(shù)分為單支、雙支和三支病變組；以同期62例胸痛綜合征(CPS)患者作為對照組。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組血漿IL-27的表達(dá)水平并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果 與對照組100.66(68.98,228.86)pg/mL比較，STEMI組、NSTEMI組、UAP組血漿IL-27表達(dá)水平[分別為308.64(245.17,359.26)、256.88(181.52,332.51)、218.12(165.33,312.46)pg/mL]均明顯升高(P均<0.01)；組間兩兩比較結(jié)果表明，STEMI組血漿IL-27濃度明顯高于NSTEMI組和UAP組(P均<0.05)；，在TnI陰性的ACS患者中，IL-27陽性率為54.24%(32/59)；IL-27在胸痛患者中預(yù)測ACS發(fā)生的敏感性和特異性分別為80.29%和58.06%。冠脈三支病變組IL-27表達(dá)水平明顯高于單支病變組(P<0.05)。結(jié)論 IL-27在ACS患者外周血中表達(dá)明顯升高，可能參與了ACS的發(fā)病機(jī)制。IL-27對TnI陰性的ACS患者以及ACS病情判斷具有一定臨床價值。

急性冠脈綜合征；IL-27；肌鈣蛋白I

急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)包括ST段抬高的心肌梗死(ST elevation acute myocardial infarction，STEMI)、非ST段抬高的心肌梗死(non-ST elevation acute myocardial infarction，NSTEMI)和不穩(wěn)定心絞痛(unstable angina pectoris，UAP)，發(fā)病急，病死率高。因此，ACS的早期診斷、危險分層對及時制定治療方案及患者的預(yù)后具有重要意義[1]。T細(xì)胞表達(dá)失衡及免疫炎癥反應(yīng)在ACS形成的過程中發(fā)揮重要作用。IL-27是一種新型IL-12家族細(xì)胞因子，不僅具有多向調(diào)控T細(xì)胞分化功能，同時還具有促炎和抗炎雙向調(diào)控機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)的功能[2]。本研究旨在通過檢測IL-27在ACS患者外周血中的表達(dá)水平，初步探討IL-27在ACS中的作用及臨床應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2014年11月至2016年5月我院胸痛中心收治住院的ACS患者208例作為ACS組，所有患者均有陣發(fā)性或持續(xù)性心前區(qū)疼痛，經(jīng)心電圖及心肌損傷標(biāo)志物檢查、冠狀動脈造影術(shù)(coronary angiography，CAG)確診為ACS。其中,STEMI患者76例，男54例，女22例，年齡(67±12)歲；NSTEMI患者58例，男39例，女19例，年齡(66±10)歲；UAP患者74例，男52例，女22例，年齡(67±10)歲。以上病例均符合2007年美國心臟病學(xué)會和美國心臟病協(xié)會制定的ACS診斷標(biāo)準(zhǔn)。CAG采用Judkins導(dǎo)管技術(shù)，按病變累及左前降支、左回旋支和右冠狀動脈的支數(shù)(左主干狹窄≥50%計為2支)，分為單支(82例)、雙支(56例)和三支(70例)病變組。同期在我院胸痛中心接受診治的胸痛綜合征(chest pain syndrome，CPS)患者62例作為對照組，男42例，女20例，年齡(68±13)歲，均有胸痛史，經(jīng)體檢、心電圖、心臟超聲、心肌損傷標(biāo)志物、CAG等檢查未發(fā)現(xiàn)異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：患嚴(yán)重的肝腎疾病，血液系統(tǒng)疾病，惡性腫瘤，自身免疫性疾病以及近期有手術(shù)、外傷和嚴(yán)重感染的患者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)，患者知情同意。

1.2 儀器與試劑 人IL-27 ELISA試劑盒(美國Biolegend公司)；Glu、TC、TG、HDL-C、LDL-C試劑(寧波美康公司)。 680型酶聯(lián)儀(美國Bio-Rad公司)；i2000全自動化學(xué)發(fā)光分析儀及配套TnI試劑(美國雅培公司)； 7600全自動生化儀(日本日立公司)。

1.3 標(biāo)本采集 在患者行CAG或入院檢查時，用真空干燥管采集肘靜脈血4 mL，EDTA-K2抗凝管采集肘靜脈血2 mL，3 000 r/min離心5 min,分離血清樣本立即檢測TnI；另收集血漿樣本置-80 ℃凍存，用于檢測IL-27。

1.4 檢測方法 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，按照人IL-27 ELISA試劑盒試劑盒說明書操作檢測各組血漿IL-27的表達(dá)水平。采用化學(xué)發(fā)光法，按照i2000全自動化學(xué)發(fā)光分析儀及配套TnI試劑說明書操作檢測肌鈣蛋白Ⅰ(TnⅠ)。按照7600全自動生化儀及配套Glu、TC、TG、HDL-C、LDL-C試劑說明書操作進(jìn)行各指標(biāo)檢測。

2 結(jié)果

2.1 各組研究對象臨床病理參數(shù)的比較 結(jié)果表明，各組患者各臨床病理參數(shù)間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。見表1。

表1 各組臨床病理參數(shù)的比較

2.2 各組患者外周血IL-27表達(dá)水平的比較 STEMI組、NSTEMI組、UAP組和CPS組外周血IL-27表達(dá)水平分別為308.64(245.17,359.26)pg/mL、256.88(181.52,332.51)pg/mL、218.12(165.33,312.46)pg/mL和100.66(68.98,228.86)pg/mL，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=55.70，P<0.01)。數(shù)據(jù)經(jīng)秩轉(zhuǎn)換后再經(jīng)LSD-t檢驗兩兩比較發(fā)現(xiàn)，NSTEMI組IL-27表達(dá)水平雖高于UAP組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，其余各組IL-27表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。此外，在59例TnI陰性的ACS患者中，IL-27陽性32例，陽性率為54.24%。

2.3 IL-27在胸痛患者中預(yù)測ACS發(fā)生的ROC曲線分析 IL-27在胸痛患者中預(yù)測ACS發(fā)生的曲線下面積(AUCROC)為0.716(95%CI：0.653～0.778)，當(dāng)cut-off值為224.25 pg/mL時，IL-27在胸痛患者中預(yù)測ACS發(fā)生的敏感性和特異性分別為80.29%和58.06%。

2.4 ACS患者不同冠脈病變組IL-27表達(dá)水平的比較 單支病變組、雙支病變組和三支病變組血漿IL-27的表達(dá)水平分別為239.83(180.11,317.38)pg/mL、258.99(187.34,334.59)pg/mL和297.21(213.02,364.46)pg/mL，3組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=7.089，P<0.05)。組間兩兩比較發(fā)現(xiàn)，三支病變組IL-27水平明顯高于單支病變組(t=2.49，P<0.05)，但與雙支病變組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.24，P>0.05)；雙支病變組IL-27水平雖高于單支病變組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.05，P>0.05)。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，各組ACS患者血漿IL-27表達(dá)水平均明顯高于對照組，與國內(nèi)外研究報道[3-4]的結(jié)果較為一致，提示IL-27可能參與了ACS的發(fā)病機(jī)制。Al Shahi等[5]研究發(fā)現(xiàn)，ACS患者外周血單個核細(xì)胞IL-27 mRNA表達(dá)水平明顯高于病情處于穩(wěn)定期的冠心病患者，推測IL-27可能在冠心病穩(wěn)定期進(jìn)展為ACS的過程中發(fā)揮一定作用。脂質(zhì)浸潤、血管內(nèi)皮功能失調(diào)、免疫炎癥反應(yīng)在動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)斑塊發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。IL-27介導(dǎo)的促炎反應(yīng)可引起血管內(nèi)皮功能失調(diào)，同時IL-27可上調(diào)氧化型低密度脂蛋白所誘導(dǎo)的DC細(xì)胞的免疫成熟，促進(jìn)TH1型免疫反應(yīng)并釋放炎癥細(xì)胞因子，發(fā)揮促AS作用[6]。然而，另有研究表明，IL-27不僅可通過免疫調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的免疫功能緩解AS[7]，還可通過其受體信號通路抑制TH17細(xì)胞及IL-17的表達(dá)以緩解AS[8]。然而，IL-27在AS的發(fā)生、發(fā)展中究竟如何發(fā)揮作用，還有待進(jìn)一步研究。

本研究通過ROC曲線分析結(jié)果顯示，IL-27在胸痛患者中預(yù)測ACS發(fā)生的AUCROC為0.716(95%CI：0.653～0.778)，提示IL-27作為一種促炎因子在鑒別診斷ACS中具有一定臨床價值。臨床上有很多心電圖ST段未改變的ACS患者中肌鈣蛋白處于參考范圍內(nèi)，這對ACS的早期診斷及危險分層提出了極大挑戰(zhàn)。本研究中59例TnI陰性的ACS患者中發(fā)現(xiàn)IL-27陽性32例，陽性率為54.24%，可見IL-27對TnI陰性ACS的早期預(yù)測具有一定意義。

本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著冠脈病變支數(shù)的增加，IL-27表達(dá)水平也不斷升高，且三支病變組明顯高于單支病變組，說明IL-27與冠脈病變累及范圍密切相關(guān)。Jin等[6]研究發(fā)現(xiàn)， IL-27表達(dá)水平與冠脈狹窄程度Gensini積分呈高度正相關(guān)。在冠脈狹窄不穩(wěn)定粥樣斑塊處單核巨噬細(xì)胞聚集活化產(chǎn)生IL-27，同時IL-27又可通過促進(jìn)TH1型細(xì)胞分化，抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，釋放大量炎癥細(xì)胞因子，加劇機(jī)體炎癥反應(yīng)，促進(jìn)心血管事件的發(fā)生。另外，還有研究發(fā)現(xiàn)IL-27與冠心病患者左心室射血分?jǐn)?shù)呈正相關(guān)[9]，但本研究并未對該指標(biāo)進(jìn)行檢測。

綜上所述，IL-27在ACS患者外周血中表達(dá)明顯升高，可能參與了ACS的發(fā)病機(jī)制。IL-27對TnI陰性的ACS患者以及ACS病情判斷具有一定臨床價值。本研究的不足之處在于未能夠?qū)膊〉倪M(jìn)展進(jìn)行動態(tài)觀察，且并未在不同的時間節(jié)點進(jìn)行分析，此外，尚缺少健康人對照的樣本收集，有待在今后的研究中繼續(xù)深入探討。

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(本文編輯：許曉蒙)

Clinical application of interleukin-27 in the patients with acute coronary syndrome

QINFenga,DINGZhi-xianga,LIXiao-longb,SUNYib,YULi-juana,JIHai-gangb,ZHANGQib

(a.DepartmentofClinicalLaboratory,b.ChestPainCenter,ChangzhouHospitalofTraditionalChineseMedicineAffiliatedtoNanjingUniversityofChineseMedicine,Changzhou213003,Jiangsu,China)

Objective To investigate the application value of interleukin-27 (IL-27) in the patients with acute coronary syndrome (ACS). Methods A total of 208 ACS patients were enrolled in the study, including 76 acute myocardial infarction (AMI) patients with ST elevation (STEMI), 58 AMI patients with non-ST elevation (NSTEMI) and 74 unstable angina pectoris (UAP) patients. These patients were divided into single-vessel lesions, double-vessel lesions and three-vessel lesions groups, and 62 patients with chest pain syndrome (CPS) were selected as a control group. The plasma IL-27 levels of all patients were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and analyzed. Results The levels of plasma IL-27 (median[P25,P75]) in STEMI (308.64[245.17, 359.26] pg/mL), NSTEMI (256.88[181.52, 332.51] pg/mL) and UAP (218.12[165.33, 312.46] pg/mL) patients were significantly higher than that in CPS patients (100.66[68.98, 228.86] pg/mL,P<0.01). The levels of plasma IL-27 in STEMI patients were significantly higher than that in NSTEMI and UAP patients (P<0.05). The positive rate of IL-27 in ACS patients with negative TnI was 54.24% (32/59). The sensitivity and specificity of IL-27 in predicting ACS from chest pain patients were 80.29% and 58.06%, respectively. The levels of plasma IL-27 in the patients with three-vessel lesions were significantly higher than that with single-vessel lesions (P<0.05). Conclusion Plasma IL-27 levels in ACS patients increase obviously, which may be involved in the pathogenesis of ACS. IL-27 may be helpful for the diagnosis of ACS patients with negative TnI and the prediction of ACS state.

acute coronary syndrome; interleukin-27; troponin I

10.13602/j.cnki.jcls.2017.08.13

南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬常州市中醫(yī)醫(yī)院青年基金項目(201401)。

秦峰，1982年生，男，主管技師，大學(xué)本科，主要從事臨床檢驗相關(guān)研究。

丁志祥，副主任技師，碩士，E-mail：dzx0922@126.com。

R541.7

A

2017-04-07)