劉雪松

摘 要：目的：討論應(yīng)用于藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究的生物藥物分析方法的質(zhì)量控制。方法：分析近年來國際學(xué)術(shù)會(huì)議資料，基于此基礎(chǔ)系統(tǒng)地介紹分析質(zhì)量研究方法的主要指標(biāo)：精密度、準(zhǔn)確度、檢測(cè)限、定量限、標(biāo)準(zhǔn)曲線、方法選擇性和穩(wěn)定性等。結(jié)果：生物藥物分析方法的質(zhì)量控制是藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究中必不可少的重要手段。結(jié)論：本文對(duì)生物藥物分析方法的質(zhì)量控制可供評(píng)價(jià)和控制分析方法參考用。

關(guān)鍵詞：生物藥物；分析方法

1 生物藥物的分析

生物藥物的分析在實(shí)際生產(chǎn)中是十分必要的，通過藥物分析手段來測(cè)定原料和制劑中藥物及有關(guān)雜質(zhì)的含量，控制藥物生產(chǎn)至臨床應(yīng)用前藥物的質(zhì)量，生物藥物分析是藥物體內(nèi)研究和臨床應(yīng)用期間測(cè)定生物材料中藥物的含量的主要依據(jù)。生物藥物分析的目的是保證用藥的安全有效，鑒于分析方法本身質(zhì)量的重要性，近年對(duì)藥物分析方法質(zhì)量控制的研究相當(dāng)普及。

1.1生物藥物分析的應(yīng)用范圍

生物藥物分析主要應(yīng)用于：？治療藥物監(jiān)測(cè)，血藥濃度測(cè)定數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確將直接影響藥物療效和毒副作用；？藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究已列入衛(wèi)生部《新藥審批辦法》中，規(guī)定中有關(guān)于申報(bào)內(nèi)容、數(shù)據(jù)的可靠性、獲得的參數(shù)等要求。如同藥物分析一樣，生物藥物分析方法的質(zhì)量控制也是必要的。

1.2生物藥物分析的研究進(jìn)展

國內(nèi)外研究者應(yīng)用于藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度的分析方法的質(zhì)量控制已經(jīng)很成熟。其中有文獻(xiàn)對(duì)生物藥物分析方法給予了“評(píng)價(jià)”[1]，還有一些研究從法定角度出發(fā)應(yīng)進(jìn)行“認(rèn)證”[2]。另外，國內(nèi)學(xué)者測(cè)定藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和生物利用度的新藥非常規(guī)檢驗(yàn)藥物，得到了普遍認(rèn)可[3]。近年見諸國內(nèi)雜志的生物藥物分析方法研究論文，雖然都進(jìn)行了一些方法學(xué)評(píng)價(jià)，但缺乏系統(tǒng)研究，明顯滯后于生物藥物分析目前已在新藥體內(nèi)研究中廣泛應(yīng)用的現(xiàn)況。

2須考核的方法和內(nèi)容

新藥申報(bào)資料應(yīng)用的分析方法，都應(yīng)當(dāng)考核[4]，包括：①儀器分析法；②生物學(xué)方法：免疫分析法和微生物測(cè)定法?？己藘?nèi)容應(yīng)包括：①書面詳細(xì)報(bào)告測(cè)定方法：包括樣品采集、處理和貯存，測(cè)定時(shí)樣品預(yù)處理方法、測(cè)定操作、儀器及其參數(shù)，數(shù)據(jù)處理與結(jié)果計(jì)算等；②提供方法建立時(shí)對(duì)方法質(zhì)量全面考核結(jié)果與數(shù)據(jù)；③提供方法應(yīng)用階段的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。

3考核的指標(biāo)

3.1精密度和準(zhǔn)確度

同藥物分析一樣，精密度和準(zhǔn)確度也是生物藥物分析方法考核的重要指標(biāo)，但考核的內(nèi)容和方法有其特殊性。分析方法建立時(shí)的考核[5]：①準(zhǔn)確度和精密度測(cè)定可同時(shí)進(jìn)行；②分析方法應(yīng)用中的考核，測(cè)定樣品時(shí)，加入質(zhì)控樣品作隨行分析，可照標(biāo)準(zhǔn)曲線各濃度配制法；③樣品測(cè)定次數(shù)與重復(fù)測(cè)定，一般只需作單樣分析，只有少數(shù)不穩(wěn)定樣品或免疫分析方法才作雙樣分析，并應(yīng)在方法考核中說明。

3.2檢測(cè)限和定量限

近年有藥物分析文獻(xiàn)詳細(xì)介紹檢測(cè)限和定量限的定義和測(cè)定方法，生物藥物分析也使用LOD和LOQ表示方法的靈敏度，但因生物樣品量少，不能以增加取樣量方式提高靈敏度，因此更強(qiáng)調(diào)LOQ，它反映了標(biāo)準(zhǔn)曲線低濃度端的可靠性，測(cè)定時(shí)記錄各濃度每次測(cè)定得到的藥物信號(hào)強(qiáng)度S與噪音強(qiáng)度N。

3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線

所有生物藥物分析方法都必須作標(biāo)準(zhǔn)曲線。濃度與響應(yīng)值的函數(shù)關(guān)系可作成坐標(biāo)圖或用回歸方程表示?？己藰?biāo)準(zhǔn)曲線可以使用以下方法：①每次測(cè)定樣品應(yīng)同時(shí)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，作法與考核時(shí)應(yīng)完全一致；②標(biāo)準(zhǔn)濃度點(diǎn)5-8個(gè)，每個(gè)濃度測(cè)定1次或2次；③濃度上限為樣品最高濃度的120%，下限為最低濃度的80%；④線性度r=0.9900，截距與最高濃度響應(yīng)值之比應(yīng)略高。

3.4選擇性

選擇性又稱專屬性，目前很多文獻(xiàn)均列為考核指標(biāo)，但考核的內(nèi)容和方法尚未統(tǒng)一，下面為目前公認(rèn)的應(yīng)考核內(nèi)容：生物基質(zhì)的影響：可取3個(gè)以上不同個(gè)體的空白樣品，考察正常生理情況下樣品中生物基質(zhì)的影響。藥物代謝物和配伍用藥物的影響：應(yīng)針對(duì)可能存在的藥物代謝物和合并用藥，可將代謝物標(biāo)準(zhǔn)品和藥物標(biāo)準(zhǔn)品加入空白樣品以及加入供分析樣品后再測(cè)定，觀察是否有干擾。

3.5穩(wěn)定性與萃取回收率

考核藥物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的穩(wěn)定性，即在貯存條件下可穩(wěn)定的時(shí)間。包括：①在室溫中的穩(wěn)定性；②冷凍條件下的穩(wěn)定性；③此外還應(yīng)考察加入穩(wěn)定劑，考察樣品提取物的穩(wěn)定性。萃取回收率指預(yù)處理能夠?qū)⑸飿悠穬?nèi)含藥物多少比例分離出來供分析，它與分析方法的LOQ密切相關(guān)，可指導(dǎo)樣品預(yù)處理。

3.6免疫分析、藥物代謝分析與立體異構(gòu)分析

免疫分析應(yīng)著重考察結(jié)構(gòu)相近化合物的交叉免疫干擾，并盡可能用色譜法核對(duì)結(jié)果。藥物代謝物的分析應(yīng)根據(jù)文獻(xiàn)要求，對(duì)于測(cè)定代謝物或同時(shí)測(cè)定藥物和代謝物的分析方法，應(yīng)按照前述相同要求考核。藥物立體異構(gòu)體的分析，由于具立體異構(gòu)的藥物，其左、右旋體在體內(nèi)的處置和生理活性都可能存在差異，分析生物樣品中不同的藥物立體異構(gòu)體。

4 討論

目前國內(nèi)、外生物藥物分析方法取得了很大的進(jìn)展，本文目的在于討論應(yīng)用于藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究的生物藥物分析方法的質(zhì)量控制。采用分析近年來國際學(xué)術(shù)會(huì)議資料，基于此基礎(chǔ)系統(tǒng)地介紹分析質(zhì)量研究方法的主要指標(biāo)：精密度、準(zhǔn)確度、檢測(cè)限、定量限、標(biāo)準(zhǔn)曲線、方法選擇性和穩(wěn)定性等方法，結(jié)果表明生物藥物分析方法的質(zhì)量控制是藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究中必不可少的重要手段。希望本文可以為質(zhì)量控制和分析方法提供參考。

參考文獻(xiàn)：

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