陳鵬典 黎杰運 陳德寧 寧艷 劉芳 邱婷婷 尹紹鍇 林婉珊

加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈對少弱精子癥大鼠內(nèi)分泌的影響

陳鵬典 黎杰運 陳德寧 寧艷 劉芳 邱婷婷 尹紹鍇 林婉珊

目的 探討加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈對少弱精子癥模型大鼠內(nèi)分泌的影響。方法 80只健康SD雄性大鼠, 隨機分為G1、G2、G3、G4組, G1組為正常對照組, G2組為少弱精子癥模型組, G3組為加味聚精食療方治療組, G4組為加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈組, 每組20只。采用免疫放射法檢測各組外周血睪酮(T)、促卵泡生成素(FSH)和促黃體生成素(LH)水平, 并測量各組睪丸的體積及其重量。結果 G2、G3、G4組的睪丸體積均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；G2、G3組的睪丸重量、T、FSH、LH水平均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；G3、G4組的睪丸體積、重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G2組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；G4組的睪丸體積和重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G3組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。結論 加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈具有協(xié)同效應, 可通過干預少弱精子癥大鼠外周血T、FSH和LH水平, 復蘇生殖功能, 提高其生育能力, 效果優(yōu)于單純加味聚精食療方。

加味聚精食療方；督脈；電針；少弱精子癥；內(nèi)分泌

不育癥是男科臨床的常見病, 也是當今全球生殖醫(yī)學領域研究的熱題難題。少弱精子癥是導致男性不育的重要原因之一, 而各種病因引起少弱精子癥的機制尚未完全闡明。前期研究［1,2］表明, 加味聚精食療方可有效改善少弱精子癥大鼠曲細精管組織結構的受損狀態(tài), 提高其附睪中的精子密度、a級精子和精子總活率(a+b+c級), 而其機制可能與上調大鼠睪丸間質細胞表皮生長因子(EGF)及其受體(EGFR)的表達水平有關［3］。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認為, 督脈為“陽脈之?！? 主陽主氣, 可能通過溫煦作用來調節(jié)精子成熟和促進其生精功能。本研究通過加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈對模型大鼠進行干預, 旨在觀察其外周血性激素水平的改變, 為未來針藥結合治療少弱精子癥提供前沿的思路和研究基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 本研究動物為健康S D雄性大鼠, 共80只,來源于廣東省醫(yī)學實驗動物中心, 體重約200 g。將80只大鼠隨機分為G 1、G 2、G 3、G 4組, G 1組為正常對照組, G 2組為少弱精子癥模型組, G 3組為加味聚精食療方治療組, G 4組為加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈組, 每組20只。

1.2 實驗用藥及試劑 雷公藤多苷片(遠大醫(yī)藥黃石飛云制藥有限公司, 生產(chǎn)批號20150617, 國藥準字Z 42021212)；T、F S H和L H放射免疫分析藥盒(天津九鼎醫(yī)學生物工程有限公司)；加味聚精食療方［深圳市中醫(yī)院制劑室制備, 20ml/(k g·d)連續(xù)灌胃26 d］。

1.3 動物模型制備 除了G 1組外, 其他組均采用雷公藤多苷片加雙蒸水配成5mg/m l的懸混液, 以懸混液20mg/k g連續(xù)給予灌胃26 d造成少弱精子癥模型。G 3組給予加味聚精食療方6.3g/kg連續(xù)灌胃治療26 d, 1次/d。G 4組給予加味聚精食療方6.3 g/kg連續(xù)灌胃聯(lián)合電針治療26 d, 1次/d。穴位選用督脈經(jīng)穴命門、腰陽關和十七椎。采用電針儀疏密波刺激(疏波30Hz, 密波100Hz), 強度6～15 V, 以身體相應部位出現(xiàn)輕微顫動為準, 持續(xù)20min。

1.4 取材 受試大鼠在干預治療26 d后稱重, 股主動脈抽血, 4℃冰箱暫時保存。以5%水合氯醛腹腔注射(3ml/kg)麻醉, 剖開腹腔, 在無菌條件下快速取出大鼠雙側睪丸稱重,放入盛有2ml蒸餾水的10ml量杯中, 其杯水增加容積即為睪丸體積。

1.5 檢測 采用免疫放射法檢測各組外周血T、FSH和L H水平, 并測量各組睪丸的體積及其重量。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差()表示, 采用單因素方差分析比較。對資料方差齊性進行Levene檢驗, 按α=0.10水準, 若方差齊, 則應用least significant difference t檢驗(LSD-t檢驗)；若方差不齊, 則應用Cochran & Cox近似t檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

G2、G3、G4組的睪丸體積均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；G2、G3組的睪丸重量、T、FSH、LH水平均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)； G3、G4組的睪丸體積和重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G2組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；G4組的睪丸體積和重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G3組, 差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。見表1。

表1 四組大鼠睪丸體積、重量以及外周血T、F S H、L H水平比較()

表1 四組大鼠睪丸體積、重量以及外周血T、F S H、L H水平比較()

注：與G 1組比較,aP＜0.01；與G 2組比較,bP＜0.01；與G 3組比較,cP＜0.01

組別 只數(shù)睪丸體積(m l)睪丸重量(g)T(n m o l/L)F S H(U/L)L H(U/L) G 1組203.66±0.213.61±0.2125.23±2.745.59±0.515.50±0.57 G 2組202.10±0.17a2.13±0.23a11.21±0.54a2.52±0.44a2.52±0.31aG 3組20 2.74±0.13ab3.07±0.18ab20.75±1.34ab4.42±0.48ab4.56±0.53abG 4組20 3.36±0.18abc3.48±0.11bc24.70±2.62bc5.64±0.45bc5.70±0.37bc

3 討論

目前, 發(fā)達國家約有5%～8%的夫婦受到不育癥的影響,發(fā)展中國家一些地區(qū)不育癥的患病率高達30%［4］。少弱精子癥是導致男性不育的重要原因之一, 而各種病因引起少弱精子癥的機制尚未完全闡明。近年來研究顯示, 男性精液質量隨不同年代急劇下降, 不但給患者造成極大的心理壓力和創(chuàng)傷, 甚至會影響到婚姻、家庭和社會等方面［5］。

加味聚精食療方的組成部分主要包括魚鰾、龜板膠、枸杞、人參和瘦豬肉, 選藥精煉, 組方嚴謹, 脾腎同治, 藥食結合, 口感頗佳［6-9］。督脈起于胞中, 下出會陰, 為生命之所系, 一身元氣之所在［10］。臨床上, 督脈經(jīng)穴如命門、腰陽關、十七椎等治療不育癥也多用醫(yī)家涉臘。從西醫(yī)生理學和解剖學角度上看, 以上三穴都位于腰骶部, 骶叢神經(jīng)分布較為豐富, 深部是脊髓中樞。針刺以上穴位可能通過刺激脊神經(jīng)中樞而作用于丘腦下部-垂體-睪丸軸, 促進其對性腺激素的產(chǎn)生和調節(jié), 從而通過干預性激素的釋放而改善精子質量。

綜上所述, 加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈具有協(xié)同效應,可通過干預少弱精子癥大鼠外周血T、FSH和LH水平, 復蘇生殖功能, 提高其生育能力, 且效果優(yōu)于單純加味聚精食療方。

［1］ 陳慰填, 陳德寧, 覃湛, 等.加味聚精食療湯對少精弱精癥大鼠曲細精管結構改善的實驗研究.遼寧中醫(yī)藥大學學報, 2009(9):178-180.

［2］ 陳慰填, 陳德寧, 覃湛, 等.加味聚精食療湯對少精、弱精癥大鼠附睪中精子質量影響的實驗研究.新中醫(yī), 2009(4):96-98.

［3］ 陳德寧, 洪志明, 周文彬, 等.加味聚精食療方對少、弱精子癥大鼠EGF、EGFR睪丸內(nèi)表達的影響.世界中西醫(yī)結合雜志, 2011, 6(11):940-943.

［4］ Kleiman SE, Almog R, Yogev L, et al.Screening for partial AZFa microdeletions in the Y chromosome of infertile men: is it of clinical relevance? Journal of Urology, 2012, 98(1):43-47.

［5］ Abolfotouh MA, Alabdrabalnabi AA, Albacker RB, et al.Knowledge, attitude, and practices of infertility among Saudi couples.International Journal of General Medicine, 2013, 6(default):563-573.

［6］ 陳德寧, 覃湛, 馬慶輝, 等.加味聚精食療方對少精子癥患者精子質量的影響.南京中醫(yī)藥大學學報, 2007, 23(3):184-185.

［7］ 洪志明.加味聚精食療方治療脾腎兩虛型少精子癥的臨床及實驗研究.廣州中醫(yī)藥大學, 2010.

［8］ 任曉艷, 洪志明, 洪金標, 等.加味聚精食療方配合護理干預對少弱精子癥病人的影響.護理研究, 2013, 27(17):1732-1733.

［9］ 洪志明, 陳德寧, 王全, 等.加味聚精食療方對DS動物模型精子質量及睪丸組織中CR16表達的影響.中華中醫(yī)藥學刊, 2015(11):2690-2693.

［10］ 陳鵬典, 楊卓欣, 黎杰運, 等.任督脈與孕育的相關性探析.中國民族民間醫(yī)藥, 2016, 25(13):49-50.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.16.115

2017-06-05］

深圳市科技計劃基礎研究項目(項目編號：JCYJ20150402090413003)

518028 深圳市婦幼保健院(陳鵬典 寧艷 劉芳邱婷婷)；北京大學深圳醫(yī)院(黎杰運)；廣州中醫(yī)藥大學附屬深圳市中醫(yī)院(陳德寧 尹紹鍇 林婉珊)

黎杰運