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        紅原牦牛乳制品中苯甲酸溯源分析

        2017-08-24 12:55:07章唯李江
        食品界 2017年7期
        關(guān)鍵詞:出峰苯甲酸乙酸

        章唯++李江

        當(dāng)前,牦牛乳的加工環(huán)境,由于經(jīng)濟(jì)落后的原因,主要是以自給自足的方式進(jìn)行生產(chǎn)一直處于初級(jí)階段。手工采集、清洗的不達(dá)標(biāo)、較差的衛(wèi)生環(huán)境、質(zhì)量的不穩(wěn)定、加上工業(yè)化程度的不足,使牦牛乳一直沒有登上乳制品的主流銷售渠道。牦牛作為高原地區(qū)的特殊群種,其特殊的經(jīng)濟(jì)效益是值得我們研究的。

        紅原牦牛乳業(yè)有限公司是專注于牦牛奶粉的一家企業(yè),但是由于其苯甲酸的含量過高,一直被受限于局部地區(qū)的銷售。本次研究的主要目的是為了追溯其苯甲酸的來源,建立了乳產(chǎn)品中苯甲酸超標(biāo)控制方案,使其產(chǎn)生更加廣闊的經(jīng)濟(jì)效益。

        高效液相色譜法檢測(cè)苯甲酸馬尿酸

        試劑與儀器。(1)主要儀器與試劑

        高效液相色譜儀(AgiLent-1220);色譜柱(迪馬公司C18柱,250×2.6mm);超聲波清洗器(Multiwave PRO公司);甲醇(色譜純,F(xiàn)isher Chemicl公司); 0.4%乙酸(抽濾);乙酸鋅(183 g/L);亞鐵氰化鉀(92 g/L);苯甲酸、馬尿酸混合標(biāo)準(zhǔn)液(0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、50μg/ml,上海源葉生物科技有限公司)(2)樣品紅原牦牛乳奶粉;紅原牦牛發(fā)酵乳;紅原源頭奶(經(jīng)過8小時(shí)運(yùn)輸24小時(shí)4℃冰箱儲(chǔ)存)。

        樣品均由紅原牦牛乳業(yè)有限責(zé)任公司提供。

        實(shí)驗(yàn)方法。

        (1)HPLC參考條件

        色譜柱:C18柱,250×2.6mm,粒徑5μm

        流動(dòng)性:甲醇+0.4%乙酸溶液(抽濾)=50+50

        流速:1mL/min

        柱溫:35℃

        檢測(cè)波長(zhǎng):235nm

        進(jìn)樣量:20μL

        進(jìn)樣時(shí)間:15min

        (2)苯甲酸馬尿酸標(biāo)準(zhǔn)曲線建立

        出峰時(shí)間:馬尿酸于7.9分鐘出峰,苯甲酸于10.7分鐘出峰。兩者出峰時(shí)間不同,馬尿酸、苯甲酸得到了很好的分離。

        建立線性方程:

        馬尿酸:Y= 68.17743X - 20.70608,R2= 0.99961

        苯甲酸:Y= 108.65547X - 4.57035,R2= 0.99920

        (3)樣品預(yù)處理

        準(zhǔn)確稱量約2g試樣于50mL離心管中,加入超純水25mL并混勻,于50℃水浴超聲20min。冷卻后,加入亞鐵氰化鉀溶液4mL與乙酸鋅溶液4mL,震蕩混勻,于5000r/min離心機(jī),離心20min。將離心后樣品中的水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,用超純水定容至刻度。經(jīng)過0.45μm的濾膜,樣品瓶分裝后,用高效液相色譜測(cè)定。

        數(shù)據(jù)與分析。

        對(duì)進(jìn)行預(yù)處理的樣品用HPLC進(jìn)行,再根據(jù)GB5009.28-2016中的公式,可以得試樣中苯甲酸、馬尿酸的含量。通過測(cè)量可以得出紅原牦牛乳中馬尿酸含量為17.627mg/kg,苯甲酸的含量為17.139mg/kg;發(fā)酵乳中馬尿酸的含量為0mg/kg,苯甲酸的含量為29.656mg/kg;奶粉中馬尿酸的含量為85.259mg/kg,苯甲酸的含量為118.986mg/kg。

        由此可以發(fā)現(xiàn),本來存在于牛乳中的馬尿酸,到了發(fā)酵乳中就消失了。而發(fā)酵乳中的苯甲酸含量也上升了。根據(jù)此趨勢(shì),實(shí)驗(yàn)可得馬尿酸的確轉(zhuǎn)化為了苯甲酸。而乳粉,也因?yàn)榧庸すに囍械睦鋬鰸饪s,苯甲酸產(chǎn)生了富集而有著較高的含量。因此控制原料乳中的苯甲酸便可以控制紅原乳制品中苯甲酸的含量。

        回收率實(shí)驗(yàn)。取牛奶樣品,做空白對(duì)照組。樣品按預(yù)處理后,分別取苯甲酸馬尿酸5μg/ml,10μg/ml2個(gè)水平2個(gè)平行做回收率實(shí)驗(yàn),并用高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定。

        本文采用苯甲酸、馬尿酸的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加標(biāo)5μg/ml,10μg/ml回收率分別為:94.64%,89.57%,82.55%,94.89%。馬尿酸、苯甲酸平均回收率為88.60%和92.23%,大于80%,可得該方法有著較高的可行度。

        結(jié)果與分析

        紅原牦牛乳目前存在問題。

        (1)采集環(huán)境:牦牛乳目前的都是采用傳統(tǒng)的牧民手工采集然后奶站收購(gòu)的方式,既沒有機(jī)械的工業(yè)化,也沒有奶牛的乳頭藥浴技術(shù)。不規(guī)范的采集方式與惡劣的采集環(huán)境,對(duì)牦牛乳中微生物的數(shù)目有著較大影響。而微生物的數(shù)目也直接影響了馬尿酸的轉(zhuǎn)化。

        (2)溫度:高原的晝夜有著較大的溫差,中午的高溫會(huì)導(dǎo)致微生物的迭代生長(zhǎng)。

        (3)儲(chǔ)存環(huán)境:牧民將采集了的牦牛乳,并不會(huì)直接送向移動(dòng)收奶站,待儲(chǔ)存一定時(shí)間后才會(huì)進(jìn)行回收。期間的不規(guī)范儲(chǔ)存也會(huì)導(dǎo)致微生物的生長(zhǎng)。

        紅原牦牛乳中苯甲酸的控制措施??刂票郊姿岬暮?,我對(duì)此提出了2點(diǎn)控制措施:一方面是采集的規(guī)范化:環(huán)境衛(wèi)生的控制、規(guī)范的擠奶操作、牦牛乳原料乳儲(chǔ)存與運(yùn)輸?shù)馁|(zhì)量控制等方法都對(duì)控制牦牛原料乳中的質(zhì)量都有著明顯的效果。優(yōu)良的環(huán)境可以減少微生物的菌落總數(shù),對(duì)苯甲酸的含量進(jìn)行了一定程度上的控制。一方面是保存的質(zhì)量提高:牧民可以利用高溫殺菌;加入41. 47mmol/L 濃度二氧化碳的碳酸水;低溫的保存環(huán)境;添加30~50IU/ mL的Nisin等方法,提高牦牛乳在牧民中的保存質(zhì)量,之后再將牛乳運(yùn)輸至移動(dòng)奶站進(jìn)行系統(tǒng)的工業(yè)加工,得到較高質(zhì)量的牦牛乳。

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