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        食品中諾如病毒的檢測

        2017-08-17 21:22:29高光普
        食品安全導(dǎo)刊 2017年6期
        關(guān)鍵詞:劉磊致病菌無菌

        高光普

        國家對諾如病毒的檢測制定了詳細的標(biāo)準(zhǔn),名為GB 4789.42-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 諾如病毒檢驗》。GB 4789.42-2016標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中諾如病毒的實時熒光RT-PCR檢測方法。

        近年來,國內(nèi)外多個地區(qū)都爆發(fā)過諾如病毒感染事件。據(jù)統(tǒng)計,1998~2015年,美國諾如病毒爆發(fā)事件共計19000多起,受感染的人數(shù)高達37萬;我國自2017年春季以來也爆發(fā)了多起諾如病毒感染事件。那么諾如病毒到底是什么?針對食品中的諾如病毒,我國是否有與之相對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)?如何對諾如病毒進行檢驗檢測?帶著這些問題,本刊記者采訪了北京良潤生物科技有限公司(以下簡稱“良潤生物”)總經(jīng)理劉磊先生,請他就諾如病毒的相關(guān)問題進行了解答。

        記者:近年來,諾如病毒感染事件頻發(fā)對人民的生命財產(chǎn)安全造成了巨大損失,那么諾如病毒到底是什么?目前在全世界范圍內(nèi)的感染情況是怎樣的?

        劉磊:諾如病毒(Norovirus,NoV)又稱諾瓦克病毒,是一組形態(tài)類似、抗原略有不同的病毒顆粒??筛腥救撕蛣游锊⒁鸺毙阅c胃炎、冬季嘔吐性疾病、胃腸性流感等病癥,主要臨床表現(xiàn)為頭痛、發(fā)熱、惡心、腹痛腹瀉等,是非細菌性胃腸炎的主要病原體之一。諾如病毒是一種單鏈RNA病毒,主要分為6個基因型(GI-GVI),其中常見的世界性流行諾如病毒基因型主要分為GI和GII。

        由諾如病毒引起的感染性腹瀉在全世界范圍內(nèi)均有流行,全年均可引發(fā)感染,感染對象主要是抵抗力弱的成人和學(xué)齡兒童,且寒冷季節(jié)呈高發(fā)趨勢。在美國每年所有的非細菌性腹瀉暴發(fā)中,60%~90%由諾如病毒引起,荷蘭、英國、日本、澳大利亞等國家也都有類似情況發(fā)生。在中國5歲以下的腹瀉兒童中,諾如病毒檢出率為15%左右,通過血清抗體水平調(diào)查表明中國人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。

        記者:對于諾如病毒的檢測,我國是否有著相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)?

        劉磊:我國政府十分重視食品安全問題,對于諾如病毒的檢測也制定了非常詳細的標(biāo)準(zhǔn),名為GB 4789.42-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 諾如病毒檢驗》。GB 4789.42-2016標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中諾如病毒的實時熒光RT-PCR檢測方法,此標(biāo)準(zhǔn)適用于貝類、生食蔬菜、胡蘿卜、瓜、堅果等硬質(zhì)表面食品,草莓、西紅柿、葡萄等軟質(zhì)水果等食品中諾如病毒核酸的檢測。

        GB 4789.42-2016中對檢測諾如病毒所需要的材料有著詳細限定,分別包括實時熒光PCR儀、低溫冰箱、微量移液器、網(wǎng)狀過濾袋、無菌棉拭子、無菌剪刀、無菌鉗子、pH計或pH試紙、無菌刀片或等效均質(zhì)器、離心機。而關(guān)于試劑,GB 4789.42-2016中還注明,除有特殊說明外,所有實驗用試劑均為分析純,實驗用水均為無RNase超純水。

        對于檢測程序的要求,GB 4789.42-2016以圖表的形式清晰的展現(xiàn)了出來(見圖1)。

        GB 4789.42-2016中對軟質(zhì)水果或生食蔬菜、硬質(zhì)食品表面、貝類3種不同的的樣品分別制定了不同的操作步驟。

        記者:針對食品中諾如病毒的檢測,良潤生物有著怎樣的解決方案?

        劉磊:針對諾如病毒的檢測,良潤生物從RNA提取、過程控制到檢測及定量都有配套的產(chǎn)品,可以實現(xiàn)樣品中諾如病毒的快速檢測,并符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

        良潤生物的諾如病毒解決方案包括:病毒RNA提取試劑盒、MS2過程控制試劑盒(RT-PCR探針法)、諾如病毒核酸(GⅠ/GⅡ)檢測試劑盒(RT-PCR探針法)、諾如病毒標(biāo)準(zhǔn)系列(GI/GII)定量試劑盒等。

        記者:諾如病毒檢測的過程控制需要對照病毒,良潤生物推出的MS2過程控制試劑盒具有哪些優(yōu)勢呢?

        劉磊:諾如病毒檢測對過程控制所需對照病毒要求易于體外培養(yǎng),與諾如病毒具有相似的理化特性,并且與諾如病毒基因組組成不同,不會發(fā)生交叉反應(yīng),另外還要求是單股正鏈RNA病毒,而且在自然狀態(tài)下不會污染食品。目前常用的有門果病毒、MS2噬菌體。過程控制選用MS2噬菌體的優(yōu)勢:

        ① 國際通用—歐盟、美國等地區(qū)和國家;

        ② 結(jié)構(gòu)和病毒相似,性質(zhì)類似,更準(zhǔn)確的標(biāo)定;

        ③ 與其他病毒RNA無交叉;

        ④ 食品中不含有該噬菌體,無背景;

        ⑤ 可以實現(xiàn)細胞外擴增,實現(xiàn)精準(zhǔn)定量;

        ⑥ 可同時標(biāo)定回收率和擴增效率。

        良潤生物簡介

        北京良潤生物科技有限公司作為國家高新技術(shù)企業(yè),專注于食品中微生物、致病菌、病毒、細菌毒素等快速檢測的研究,相繼建立了即用培養(yǎng)技術(shù)平臺、免疫技術(shù)平臺、分子技術(shù)平臺及快速前處理技術(shù)平臺,產(chǎn)品涵蓋微生物測試片、致病菌膠體金快速檢測卡、致病菌快速增菌培養(yǎng)基、致病菌快速檢測組合、免疫磁珠快速測試盒、熒光定量PCR試劑盒等。在此基礎(chǔ)上,為用戶提供更合適的食品安全檢測解決方案。

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