任俊

[摘要] 目的 對(duì)微柱凝膠技術(shù)用于新生兒溶血病（HDN）檢測(cè)中的價(jià)值進(jìn)行探討分析。方法 選取本中心2013年1月～2017年1月期間收集的80份HDN患兒血液標(biāo)本，以此作為本次研究的觀察對(duì)象，使用傳統(tǒng)試管法和微柱凝膠技術(shù)分別進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)、抗體游離試驗(yàn)及直接抗人球蛋白試驗(yàn)，對(duì)所取得了檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果 通過對(duì)80份HDN患兒血液標(biāo)本的檢測(cè)，采用試管法進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)檢測(cè)出67份（83.75%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行抗體游離試驗(yàn)檢測(cè)出62份（77.50%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出54份（67.50%）呈陽(yáng)性，而采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)檢測(cè)出76份（95.00%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行抗體游離試驗(yàn)檢測(cè)出72份（90.00%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出70份（87.50%）呈陽(yáng)性，試管法和微柱凝膠技術(shù)在三種試驗(yàn)中的檢測(cè)陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 臨床針對(duì)新生兒溶血病可采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，其具有較高的敏感性，結(jié)果穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)單，能為臨床治療提供有利依據(jù)，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，值得推廣使用。

[關(guān)鍵詞]新生兒溶血??；微柱凝膠技術(shù)；檢測(cè)價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R722.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2017）14-49-03

Value analysis of microcolumn gel technique in detection of hemolytic disease of the newborn

REN Jun

Machine Generated Branch， Guangzhou Blood Center， Guangzhou 510095， China

[Abstract] Objective To explore the value of microcolumn gel technique for hemolytic disease of the newborn （HDN）. Methods 80 HDN children with blood samples from January 2013 to January 2017 in our center were collected as the research object of the observation. The traditional tube method and microcolumn gel technique were used to perform antibody elution test， free antibody test and direct antiglobulin test respectively. The test results were compared. Results Among the HDN of 80 children with blood samples for antibody detection， elution test detected 67 samples by test tube method （83.75%）. Positive antibody free test showed 62 （77.50%） were positive. For direct antiglobulin test， 54 samples （67.50%） were positive， while using microcolumn gel technique for antibody elution test，76 samples （95%） were positive. For antibody free test detected 72 copies （90%） positive. Direct antiglobulin test detected 70 samples （87.50%） were positive in the test tube method and microcolumn gel technique in three test in the detection positive rate difference （P<0.05）. Conclusion The clinical for hemolytic disease of the newborn can be used Micro column gel technology for detection. It has high sensitivity， stable results， and simple operation. It can provide a favorable basis for clinical treatment. It has high clinical value. It is worthy of popularization and application

[Key words] Hemolytic disease of the newborn； Microcolumn gel technique； Detection value

新生兒溶血病是指由于母嬰血型不合，母親體內(nèi)產(chǎn)生與胎兒血型抗原不配的血型抗體，這種抗體通過胎盤進(jìn)入到胎兒體內(nèi)引起同族免疫性溶血，母嬰Rh血型系統(tǒng)和ABO血型系統(tǒng)的血型不合是導(dǎo)致新生兒溶血病的主要原因[1-2]。其臨床常表現(xiàn)為黃疸、貧血及核黃疸等，嚴(yán)重影響到患兒的生活質(zhì)量及生長(zhǎng)發(fā)育，甚至危及患兒生命安全，因此臨床及早診斷治療十分關(guān)鍵[3]。臨床對(duì)HDN的診斷主要是通過血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，而傳統(tǒng)的檢測(cè)方法主要是采用試管法，但其檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、步驟繁雜等缺點(diǎn)會(huì)對(duì)患兒病情檢測(cè)造成不利影響[4]。微柱凝膠技術(shù)是近年來開展的新型檢測(cè)技術(shù)，諸多研究證實(shí)其比傳統(tǒng)試管法更具優(yōu)勢(shì)，在新生兒溶血病檢測(cè)中逐漸應(yīng)用廣泛[5]。本研究亦對(duì)微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病中的檢測(cè)價(jià)值進(jìn)行探討分析，現(xiàn)將具體情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用隨機(jī)抽選法從本中心2013年1月～2017年1月期間收集的80份HDN患兒血液標(biāo)本，以此作為本次研究的觀察對(duì)象，使用傳統(tǒng)試管法和微柱凝膠技術(shù)分別進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)、抗體游離試驗(yàn)及直接抗人球蛋白試驗(yàn)。其中80份血液標(biāo)本分別來自80例患兒，其中包括男43例，女37例；年齡0.5～7d，平均（3.8±1.2）d；病程8～76h，平均（42±14）h；患兒血型A型和B型均為40例，母親均為O型血，Rh均為陽(yáng)性?；純褐饕憩F(xiàn)為黃疸、貧血等癥狀。所有患兒均符合HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為HDN患兒。

1.2 檢測(cè)方法

使用儀器為FYQ免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清學(xué)多用離心機(jī)（長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司）、日本久保離心機(jī)及恒溫水浴箱。在鑒定新生兒及其母親ABO和Rh血型后，分別采用試管法和微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)、抗體游離試驗(yàn)及直接抗人球蛋白試驗(yàn)三種試驗(yàn)。

試管法：將患兒的血液樣本的血清和紅細(xì)胞進(jìn)行離心分離，采用0.9%氯化鈉溶液將紅細(xì)胞進(jìn)行3次清洗并配成5%濃度的懸液。取2滴廣譜抗人球蛋白試劑加1滴懸液進(jìn)行離心處理，對(duì)直接抗人球蛋白試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行觀察。取3支試管標(biāo)記A、B、O血型，在每支試管中放入2滴放散液和患兒的血清，并對(duì)應(yīng)血型放入1滴相應(yīng)的紅細(xì)胞，在37℃的溫度中孵育1h后采用0.9%氯化鈉溶液將紅細(xì)胞進(jìn)行3次清洗，然后放入2滴抗人球蛋白試劑進(jìn)行離心處理，對(duì)抗體放散試驗(yàn)、抗體游離試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行觀察。

微柱凝膠技術(shù)：采用0.8%氯化鈉溶液將紅細(xì)胞進(jìn)行3次清洗，取50μL加入凝膠卡中并進(jìn)行離心處理，對(duì)直接抗人球蛋白試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行觀察。取放散液和患兒血清50μL分別加入凝膠卡中，并按照標(biāo)記血型對(duì)應(yīng)加入紅細(xì)胞懸液，在37℃的溫度中孵育15min后離心處理10min，對(duì)抗體放散試驗(yàn)、抗體游離試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行觀察。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以（）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

通過對(duì)80份HDN患兒血液標(biāo)本的檢測(cè)，采用試管法進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)檢測(cè)出67份（83.75%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行抗體游離試驗(yàn)檢測(cè)出62份（77.50%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出54份（67.50%）呈陽(yáng)性，而采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)檢測(cè)出76份（95.00%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行抗體游離試驗(yàn)檢測(cè)出72份（90.00%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出70份（87.50%）呈陽(yáng)性，試管法和微柱凝膠技術(shù)在三種試驗(yàn)中的檢測(cè)陽(yáng)性率差異明顯（P<0.05）。

詳見表1。

3 討論

HDN是指由于母嬰血型不合，母親體內(nèi)產(chǎn)生與胎兒血型抗原不配的血型抗體，這種抗體通過胎盤進(jìn)入到胎兒體內(nèi)引起同族免疫性溶血，母嬰Rh血型系統(tǒng)和ABO血型系統(tǒng)的血型不合是導(dǎo)致新生兒溶血病的主要原因，而在這兩種血型系統(tǒng)中以ABO血型系統(tǒng)的血型不合引起HDN最為常見[6-7]。

臨床對(duì)HDN的診斷主要是通過血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，傳統(tǒng)檢測(cè)HDN的方法主要是采用試管法進(jìn)行檢測(cè)，但由于試管法操作步驟繁多，耗時(shí)較長(zhǎng)，重復(fù)性較差且靈敏度低，使其不利于對(duì)結(jié)果的判斷，容易出現(xiàn)漏檢情況，導(dǎo)致試管法在臨床應(yīng)用性不高[8-10]。

近年來隨著微柱凝膠技術(shù)的開展，引起了臨床學(xué)者們的重視，在經(jīng)過諸多研究之后其檢測(cè)效果受到廣泛認(rèn)同，并逐漸在臨床開始推廣[11-12]。相關(guān)研究顯示，微柱凝膠技術(shù)在HDN的檢測(cè)中具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好的特點(diǎn)，其檢測(cè)穩(wěn)定，能夠準(zhǔn)確的對(duì)結(jié)果進(jìn)行判斷，對(duì)患兒血液中免疫性IgG抗體和效價(jià)能夠更準(zhǔn)確的檢測(cè)[13-15]。

本研究通過對(duì)本中心2013年1月～2017年1月期間收集的80份HDN患兒血液標(biāo)本進(jìn)行研討，使用傳統(tǒng)試管法和微柱凝膠技術(shù)分別進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)、抗體游離試驗(yàn)及直接抗人球蛋白試驗(yàn)，結(jié)果顯示，對(duì)80例HDN患兒血液樣本的檢測(cè)后，采用試管法進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)檢測(cè)出67份（83.75%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行抗體游離試驗(yàn)檢測(cè)出62份（77.50%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出54份（67.50%）呈陽(yáng)性，而采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行抗體放散試驗(yàn)檢測(cè)出76份（95.00%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行抗體游離試驗(yàn)檢測(cè)出72份（90.00%）呈陽(yáng)性，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出70份（87.50%）呈陽(yáng)性，試管法和微柱凝膠技術(shù)在三種試驗(yàn)中的檢測(cè)陽(yáng)性率差異明顯。

可看出微柱凝膠技術(shù)的三種試驗(yàn)檢測(cè)出陽(yáng)性率顯著高于試管法，充分證明了其臨床檢測(cè)效果。結(jié)果還顯示，抗體放散試驗(yàn)是敏感度最高的試驗(yàn)，可用于HDN檢測(cè)中的確診。而直接抗人球蛋白試驗(yàn)靈敏度最低，可能是由于新生兒ABO抗原的發(fā)育還不完全，抗原位點(diǎn)少，不能與抗人球蛋白產(chǎn)生明顯凝集反應(yīng)，有足夠IgG抗體分子的紅細(xì)胞又大部分被溶解。

綜上所述，臨床在新生兒溶血病的檢測(cè)中可采用微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，其敏感度高，操作簡(jiǎn)單方便，能有效為溶血病患兒的治療提供準(zhǔn)確、有利的依據(jù)，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，值得推廣使用。

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（收稿日期：2017-04-14）