安 娜，陳 曦，劉運雙，鐘 帆，吳 茜

(四川省綿陽市中心醫(yī)院檢驗科 621000)

兒童非典型呼吸道病原體感染與維生素D水平的相關(guān)研究

安 娜，陳 曦，劉運雙，鐘 帆，吳 茜△

(四川省綿陽市中心醫(yī)院檢驗科 621000)

目的 探討兒童非典型呼吸道病原體感染與維生素D(VitD)水平之間的關(guān)系。方法 應(yīng)用呼吸道十一聯(lián)檢測試劑盒(間接免疫熒光法)對414例兒童呼吸道感染患者的血清樣本進行11項非典型呼吸道病原體的IgM抗體檢測，包括呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(Adv)、流感病毒A型(FluA)、流感病毒B型(FluB)、副流感病毒(PFlu)、肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)、柯薩奇病毒B型(CoxB)、柯薩奇病毒A型(CoxA)和嗜肺軍團菌(LP)等；同時應(yīng)用電化學發(fā)光法檢測血清樣本的VitD水平。結(jié)果 414份標本中共有214份檢出病原體IgM(51.69%)，檢出率居前3位的依次為FluB、FluA及MP，陽性檢出率分別為32.13%、23.19%、13.77%。在IgM抗體陽性病例中，17.63%的患兒發(fā)生單一感染，34.06%的患兒為混合感染。IgM抗體陽性組的VitD水平(中位數(shù)23.60 ng/mL，3.37～71.50 ng/mL)與陰性組(中位數(shù)23.95 ng/mL，3.00～81.70 ng/mL)之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。VitD偏低組與VitD正常組之間總感染陽性率、單一感染陽性率和混合感染陽性率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，VitD偏低組與VitD正常組之間FluB、FluA及MP IgM抗體陽性率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。非典型呼吸道病原體與VitD之間無相關(guān)性(r=0.005，P=0.912)。結(jié)論 非典型呼吸道病原體感染可能與VitD水平降低無關(guān)。

兒童；呼吸道病原體；感染；維生素D

急性呼吸道感染是兒童的常見病、多發(fā)病，據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)資料，每年約有400萬5歲以下兒童死于急性呼吸道感染。其中非細菌性病原體引起的兒童呼吸道的感染占80%以上[1]。維生素D(Vitamin D,VitD)是一種脂溶性維生素，主要的生理功能是維持血液中鈣和磷的正常濃度，研究發(fā)現(xiàn)，細胞內(nèi)感染的細菌會干擾VitD對免疫系統(tǒng)的調(diào)控，導(dǎo)致持續(xù)性感染和慢性炎癥，與多種感染性疾病相關(guān)，本研究對0～14歲人群進行了非典型呼吸道病原體感染情況和VitD水平的檢測，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年1～12月本院就診兒童共414例，其中男254例，女 160例，年齡為0～14歲，排除正在使用VitD制劑治療者。

1.2 試劑和儀器 血清非典型呼吸道病原體IgM的試劑由歐蒙公司提供；VitD的試劑由羅氏公司提供。羅氏公司E601全自動電化學發(fā)光免疫分析儀，Olympus BX51顯微鏡。

1.3 方法

1.3.1 非典型呼吸道病原體IgM抗體測定 采用間接免疫熒光法檢測，嚴格按說明書進行操作。11項呼吸道病原體為呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(Adv)、流感病毒A型(FluA)、流感病毒B型(FluB)、副流感病毒(PFlu)、肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)、柯薩奇病毒B型(CoxB)、柯薩奇病毒A型(CoxA)和嗜肺軍團菌(LP)等。

1.3.2 VitD測定 采用電化學發(fā)光法測定血清VitD水平，并按照要求進行定標和質(zhì)控。VitD水平30～149 ng/mL定義為VitD正常組，<30 ng/mL定義為VitD偏低組。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學分析。血清VitD水平呈偏態(tài)分布，用中位數(shù)和范圍表示，組間比較采用非參數(shù)Mann-WhitneyU檢驗；計數(shù)資料用百分數(shù)(%)表示，采用χ2檢驗，采用非參進行Spearman相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

表1 不同VitD水平感染情況比較

表2 FluB、FluA及MP的IgM抗體檢測結(jié)果

2 結(jié) 果

2.1 非典型呼吸道病原體IgM抗體感染情況 非典型呼吸道病原體IgM抗體陽性214例，陰性200例，陽性率51.69%。檢出率居前3位的依次為FluB、FluA及MP，陽性檢出率分別為32.13%、23.19%、13.77%。在IgM陽性病例中，17.63%的患兒發(fā)生單一感染，34.06%的患兒發(fā)生2種及以上病原體混合感染，主要以FluB和FluA合并感染為主。

2.2 非典型呼吸道病原體IgM抗體陽性組與陰性組VitD水平比較 非典型呼吸道病原體IgM抗體陽性組的VitD水平(中位數(shù)23.60 ng/mL，3.37～71.50 ng/mL)低于陰性組(中位數(shù)23.95 ng/mL，3.00～81.70 ng/mL)，差異無統(tǒng)計學意義(U=-0.110,P=0.912)。IgM抗體陽性組中，單一感染的VitD水平(中位數(shù)23.80 ng/mL，4.00～71.50 ng/mL)與混合感染的VitD水平(中位數(shù)23.50 ng/mL，3.37～69.90 ng/mL)差異無統(tǒng)計學意義(U=-0.149,P=0.882)。

2.3 不同VitD水平的非典型呼吸道病原體IgM抗體檢測比較 VitD偏低組與VitD正常組之間總感染陽性率、單一感染陽性率和混合感染陽性率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，VitD偏低組與VitD正常組之間FluB、FluA及MP IgM抗體陽性率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1、2。

2.4 非典型呼吸道病原體與VitD的相關(guān)性分析 采用非參進行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示非典型呼吸道病原體與VitD無相關(guān)性(r=0.005，P=0.912)。

3 討 論

呼吸道疾病非常普遍，大多數(shù)人幾乎每年都會感染一次。呼吸道感染發(fā)生機制多與細菌病毒感染有關(guān)，病情具有潛伏期短、起病急的特點，而且一種病原體往往可引起多種呼吸道疾病，一種呼吸道感染性疾病亦可由多種病原體引起，并常?；旌细腥綶2]。近年來，隨著抗生素的廣泛使用，由常見細菌病毒引起的呼吸道感染疾病有所降低，而呼吸道非典型病原體感染日趨嚴重，危害患者的身體健康[3]。本研究采用間接免疫熒光法，能簡捷快速、靈敏特異的檢測11種呼吸道病原體，適合臨床篩查。

本研究非典型呼吸道病原體IgM抗體陽性214例，陽性率51.69%，高于廖兵等[4]報道的重慶北部地區(qū)38.42%的陽性率，但低于吳澤剛等[5]報道的武漢患兒60.24%的陽性率，兒童呼吸道病原體檢出率各地區(qū)表現(xiàn)的差異，可能與所處地區(qū)采用的檢測方法和病原體種類不同有關(guān)。本研究中檢出率居前3位的依次為FluB、FluA及MP，陽性檢出率分別為32.13%、23.19%、13.77%，符合兒童呼吸道感染的病原學特征[6-7]，但病原體檢出率的順序在各地均不一致，如在重慶北部地區(qū)的主要病原體為MP和FluB。在本研究的IgM陽性病例中，17.63%的患兒發(fā)生單一感染，34.06%的患兒發(fā)生混合感染，主要以FluB和FluA合并感染為主。而國外研究顯示，呼吸道常見病原體間協(xié)同感染率一般為0.60%～27.00%[8]，本研究中的合并感染率較高，應(yīng)采取科學、合理的治療措施及早治療。

人體VitD的來源主要有兩條途徑：(1)充分的陽光照射讓皮膚中的7脫氫膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)楣腔技磧?nèi)源性VitD；(2)從食物及藥物中獲得的VitD即外源性VitD。除此之外人體VitD水平還與下列因素相關(guān)：戶外活動、其他病原體感染和其他因素。本研究結(jié)果顯示，非典型呼吸道病原體IgM抗體陽性組VitD水平與陰性組差異無統(tǒng)計學意義，單一感染與混合感染VitD水平之間的差異無統(tǒng)計學意義。提示非典型呼吸道病原體感染可能不會影響VitD水平。

VitD的活性形式是1,25-二羥維生素D3[1,25(OH)2D3或骨化三醇]，由兩個連續(xù)的羥基反應(yīng)形成，第一個反應(yīng)發(fā)生在肝中，形成25-羥基維生素D[25(OH)D]，它代表著體內(nèi)VitD的水平狀態(tài)，第二反應(yīng)經(jīng)過腎臟和靶器官酶的作用形成骨化三醇[9]。目前有部分研究認為VitD水平與急性上呼吸道感染存在負相關(guān)關(guān)系[10-11]，通過結(jié)合VitD受體(Vitamin D receptor，VDR)，骨化三醇誘導(dǎo)人單核細胞、中性粒細胞和上皮細胞產(chǎn)生抗菌肽，它能抑制感染的細菌、病毒和真菌；除了其在先天免疫的作用，骨化三醇還能抑制促炎性細胞因子，以及上調(diào)抗炎細胞因子如IL-10[9]。但本研究中，VitD偏低組與VitD正常組之間非典型呼吸道病原體總感染、單一感染及混合感染IgM抗體的陽性率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，F(xiàn)luB、FluA及MP的IgM抗體陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。提示VitD減低可能不會導(dǎo)致非典型呼吸道病原體易感。另有一些研究結(jié)果亦不支持VitD的抗感染作用，他們發(fā)現(xiàn)補充VitD后，呼吸道感染和肺炎的發(fā)病率并沒有顯著變化[12-13]。VitD在成年人慢性肺疾病的功效還不太清楚。懷孕期間VitD干預(yù)并未減少后代中呼吸道感染或哮喘的風險[9]。VitD雖然已被證明能增加抗菌肽的表達，然而這些抗菌肽在體外或體內(nèi)對流感的作用效果并沒有得到檢驗[14]。另一方面，循環(huán)25(OH)D水平可能不能夠準確反映VitD的狀況，在一些自身免疫性疾病或慢性炎癥綜合征中1,25(OH)2D3可能升高，而25(OH)D卻降低。本研究采用非參進行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示非典型呼吸道病原體與VitD無相關(guān)性，這與Khakshour等[15]的研究結(jié)果一致。非典型呼吸道病原體與VitD之間相關(guān)性研究結(jié)果的差異可能受到樣本大小和地域的限制，需要做更大樣本量的研究。

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Correlation between atypical respiratory pathogens infection and vitamin D level in children

AnNa,ChenXi,LiuYunshuang,ZhongFan,WuQian△

(DepartmentofClinicalLaboratory,MianyangMunicipalCentralHospital,Mianyang,Sichuan621000,China)

Objective To investigate the correlation between atypical respiratory pathogens infection and serum vitamin D(VitD) level in children.Methods Serum IgM antibody levels of 11 atypical respiratory pathogens were detected in 414 serum samples of child respiratory infection by using the respiratory tract 11-items detection reagent kits (indirect immunofluorescence assay),including respiratory syncytial virus(RSV),adenovirus(ADV),influenza A virus(FluA),influenza B virus(FluB),parainfluenzavirus(PFlu),Mycoplasma pneumonia(MP),Chlalmydia pneumoniae(CP),Coxsackie virus type B(CoxB),Coxsackie virus type A(CoxA) and legionella pneumophilia(LP).At the same time the electrochemiluminescence assay was used to measure serum VitD level.Results Among 414 samples,pathogen IgM was detected out in 214 samples (51.69%),the top three places of detection rates were FluB,FluA and Mp,their positive rates were 32.13%,23.19% and 13.77% respectively;in cases of positive IgM antibody,17.63% of children developed single infection,34.06% of children developed 2 kinds of pathogen or more mixed infection;there was no statistical difference in the VitD levels between the IgM antibody positive group (median 23.60 ng/mL,3.37-71.50 ng/mL) and the IgM antibody negtive group(median 23.95 ng/mL,3.00-81.70 ng/mL).The IgM antibody positive rate,single infection positive rate and mixed infection positive rate had no statistical difference between the VitD reduce group and the VitD normal group(P>0.05).The positive rate of FluB,FluA and MP IgM antibody had no statistical difference between the VitD reduce group and the VitD normal group(P>0.05).Atypical respiratory pathogens had no correlation with VitD(r=0.005，P=0.912).Conclusion Atypical respiratory pathogens infection may had no correlation with the VitD level reduce.

children;respiratory pathogens;infections;vitamin D

安娜(1988-)，檢驗師，碩士，主要從事生物化學與分子生物學研究?！?/p>

,E-mail:381249310@qq.com。

??·臨床研究

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.20.017

R562.1

A

1671-8348(2017)20-2788-03

2017-01-14

2017-03-18)