王金全劉杰楊凡呂宗浩

（1中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，2生物飼料開發(fā)國家工程研究中心，3中國—?dú)W盟飼料霉菌毒素脫毒技術(shù)聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，北京100081）

飼料霉菌毒素脫霉劑產(chǎn)品有效性評價(jià)

王金全1,2,3劉杰1楊凡1呂宗浩1

（1中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，2生物飼料開發(fā)國家工程研究中心，3中國—?dú)W盟飼料霉菌毒素脫毒技術(shù)聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，北京100081）

分別介紹了飼料霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮以及嘔吐毒素三種霉菌毒素的吸附有效性評價(jià)方法。認(rèn)為評價(jià)霉菌毒素吸附劑產(chǎn)品有效性時(shí)，檢測方法應(yīng)因毒素而異，體內(nèi)、體外相結(jié)合。

霉菌毒素；吸附劑（脫霉劑）；有效性；評價(jià)

由于飼料中霉菌毒素污染情況復(fù)雜，不同的霉菌毒素其化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特性完全不一樣，造成霉菌毒素吸附劑對飼料中毒素的吸附能力差異很大。另外，在評價(jià)脫霉劑產(chǎn)品在動物體內(nèi)對毒素的吸附效果時(shí)，除了觀測生產(chǎn)、繁殖性能之外，生物標(biāo)記物（Biomarker）是主要的評價(jià)指標(biāo)。因此，在探討霉菌毒素吸附劑產(chǎn)品有效性評價(jià)方法的時(shí)候，應(yīng)該按照毒素不同而檢測方法不同的原則，采取體內(nèi)、體外相結(jié)合的方法，制定相對應(yīng)的評價(jià)體系。

表1 反應(yīng)體系設(shè)置

1 飼料霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1（AFB1）的吸附有效性評價(jià)方法

附率在90%以上，才是合格的AFB1脫霉劑產(chǎn)品。同時(shí)，對蒙脫石產(chǎn)品中蒙脫石含量（X-光衍射測定）、長石和蛋白石含量以及方解石含量進(jìn)行了規(guī)定，分別為大于70%、小于10%和小于4%，見表2。

1.1 對黃曲霉毒素吸附能力評價(jià)

吸附率%=1.0-[（吸附樣品峰面積-無毒素對照峰面積）/霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)液峰面積]×100%。

參考：如表1所述條件下，篩選吸附劑原料時(shí)，被檢測吸附劑對AFB1吸附率在pH 3.0條件下應(yīng)該達(dá)到95%以上，在pH 6.5條件下達(dá)到80%以上。

歐盟方法（供參考）：AFB1濃度4 000 ppb，脫霉劑用量0.02%，在pH 5.0緩沖溶液體系中，37℃搖床震蕩反應(yīng)1 h，高效液相色譜測定毒素峰面積，要求吸

1.2 動物試驗(yàn)驗(yàn)證方法

1.2.1 試驗(yàn)動物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

泌乳奶牛（或肉鴨），試驗(yàn)動物奶牛頭數(shù)不低于18頭，試驗(yàn)設(shè)立三個(gè)處理組，每處理6頭，吸附劑添加量0.2%，試驗(yàn)期3周，見表3。

1.2.2 檢測項(xiàng)目

牛奶指標(biāo)和牛奶中黃曲霉毒素M 1（AFM 1）含量；血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)；生物標(biāo)記物（Biomarker）牛奶中AFM1的含量。

表2 黃曲霉菌毒素吸附劑（水合硅鋁酸鹽類）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和衛(wèi)生指標(biāo)

1.2.3 結(jié)果要求

霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素的吸附有明顯效果，表現(xiàn)在顯著提高負(fù)對照組奶牛的生產(chǎn)性能（產(chǎn)奶量、乳品質(zhì)等）；顯著降低牛奶中的Biomarker AFM1的含量；顯著改善血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)水平，明顯改善或者消除試驗(yàn)動物因黃曲霉毒素引起的中毒癥狀等方面。

2 飼料霉菌毒素吸附劑對玉米赤霉烯酮吸附有效性評價(jià)方法

2.1 對玉米赤霉烯酮吸附能力評價(jià)

反應(yīng)體系設(shè)置參考黃曲霉毒素吸附劑。作為參考，篩選原料時(shí)，被檢測吸附劑對玉米赤霉烯酮吸附率應(yīng)達(dá)到60%以上。玉米赤霉烯酮吸附劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和衛(wèi)生指標(biāo)參考黃曲霉毒素吸附劑產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 動物試驗(yàn)方法

2.2.1 試驗(yàn)動物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)：

體重30 kg以上后備母豬或經(jīng)產(chǎn)母豬，體重和胎次接近的后備母豬不低于18頭，隨機(jī)分三個(gè)處理組，每處理6頭，試驗(yàn)期3周，見表4。

2.2.2 檢測項(xiàng)目

觀察生長性能、繁殖器官病變，檢測尿液Biomarker（玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、肌酐等）指標(biāo)（采用LC-MS/HPLC/ELISA試劑盒檢測）。

2.2.3 結(jié)果要求

玉米赤霉烯酮脫霉劑產(chǎn)品對玉米赤霉烯酮的吸附有明顯效果，表現(xiàn)在能夠消除試驗(yàn)動物因玉米赤霉烯酮引起的繁殖器官中毒癥狀，顯著降低血液中玉米赤霉烯酮和尿液中玉米赤霉烯酮當(dāng)量/肌酐的比值等。

3 飼料霉菌毒素吸附劑對嘔吐毒素吸附有效性評價(jià)方法

3.1 對嘔吐毒素吸附能力評價(jià)

反應(yīng)體系設(shè)置參考黃曲霉毒素吸附劑。作為參考，篩選原料時(shí)，被檢測吸附劑對嘔吐毒素吸附率應(yīng)該達(dá)到60%以上。嘔吐毒素吸附劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和衛(wèi)生指標(biāo)參考黃曲霉毒素吸附劑。

表3 脫霉劑吸附AFB1試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧組成

表4 脫霉劑吸附玉米赤霉烯酮試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧組成

表5 脫霉劑吸附嘔吐毒素試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧組成

3.2 嘔吐毒素吸附劑產(chǎn)品有效性動物試驗(yàn)驗(yàn)證方法

3.2.1 試驗(yàn)動物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

體重30 kg以上生長豬，體重和胎次接近的生長豬頭數(shù)不低于24頭，分三個(gè)處理組，每處理8頭，試驗(yàn)期4周，見表5。

3.2.2 檢測指標(biāo)

生長性能、血液指標(biāo)、免疫指標(biāo)、生物標(biāo)記物（DON、DOM-1）等，生物標(biāo)記物要綜合考慮血液、尿液和排泄糞便中的參數(shù)進(jìn)行評定。

3.2.3 結(jié)果要求

嘔吐毒素脫霉劑產(chǎn)品對嘔吐毒素的吸附有效表現(xiàn)在對試驗(yàn)動物生長性能有明顯改善，能夠消除試驗(yàn)動物因嘔吐毒素引起的中毒癥狀，顯著降低血液中生物標(biāo)記物DON的含量。

4 飼料霉菌毒素吸附劑對營養(yǎng)物質(zhì)的吸附及對其他霉菌毒素吸附有效性評價(jià)方法

霉菌毒素吸附劑吸附霉菌毒素的同時(shí)，對飼料和飼料原料中營養(yǎng)物質(zhì)也會有一定的吸附，降低了飼料和飼料原料的營養(yǎng)水平，降低使用價(jià)值。因此，在霉菌毒素吸附劑評價(jià)體系中，加入霉菌毒素吸附劑對營養(yǎng)物質(zhì)的吸附影響非常必要。同樣可以考慮模擬動物胃腸道環(huán)境條件開展體外吸附營養(yǎng)水平評定。

目前研究比較多的是霉菌毒素吸附劑產(chǎn)品對以上三種霉菌毒素的吸附，對于其他霉菌毒素的吸附效果了解的還比較少。但是隨著研究進(jìn)程的逐步深入，會涉及到更多的霉菌毒素吸附劑產(chǎn)品評價(jià)。建立和完善有效統(tǒng)一的霉菌毒素吸附劑評價(jià)體系，意義重大，任重而道遠(yuǎn)。

S816

A

1673-4645(2017)06-0048-03

2017-06-23

農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管專項(xiàng)，國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃政府間科技合作專項(xiàng)

王金全（1973-），男，博士，副研究員，主要從事動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究，E-mail：wang jinquan@caas.cn