王 林 趙 臣 曾燕霞 陳志龍 鄭 琛

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州730070)

不同精粗比飼糧中添加甘露寡糖對(duì)綿羊瘤胃養(yǎng)分降解率的影響

王 林 趙 臣 曾燕霞 陳志龍 鄭 琛*

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州730070)

綿羊；精粗比；甘露寡糖；尼龍袋法；瘤胃降解率

甘露寡糖(mannan oligosaccharides,MOS)是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究較多的新型飼料添加劑，是由2～10個(gè)葡萄糖、甘露糖或半乳糖分子通過(guò)β-1,4-D-甘露吡喃糖苷鍵或是由α-1,2、α-1,3或α-1,6糖苷鍵連接而成，為直鏈或支鏈低度聚合糖，主要通過(guò)富含MOS的酵母細(xì)胞壁發(fā)酵獲得。MOS不但能促進(jìn)有益菌增殖，還能吸附病原菌，改善腸道微生態(tài)，增強(qiáng)動(dòng)物非特異性免疫，提高動(dòng)物抵抗力[1-4]。此外，MOS還是一種腸道調(diào)節(jié)劑，相比抗生素而言，具有無(wú)污染、無(wú)殘留及無(wú)副作用等優(yōu)點(diǎn)。至今，國(guó)內(nèi)外對(duì)MOS在單胃動(dòng)物養(yǎng)殖中的應(yīng)用已有較多的研究，但在反芻動(dòng)物養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究較少。

飼糧精粗比對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)環(huán)境及消化代謝有重要的影響，精粗比過(guò)低或過(guò)高都會(huì)對(duì)其健康狀況和生產(chǎn)性能造成不利影響。添加適宜的粗飼料，不但可以增加動(dòng)物的飽腹感、節(jié)省飼料成本，還可以促進(jìn)動(dòng)物胃腸道的蠕動(dòng)、提高消化率，同時(shí)對(duì)優(yōu)化反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)環(huán)境也具有潛在益處[5-6]。飼喂適宜精粗比飼糧對(duì)提高養(yǎng)分利用率和生產(chǎn)性能有重要意義。因此，本試驗(yàn)采用尼龍袋法測(cè)定添加不同水平MOS的不同精粗比飼糧在綿羊瘤胃內(nèi)干物質(zhì)(dry matter,DM)、有機(jī)物(organic matter,OM)和粗蛋白質(zhì)(crude protein,CP)的降解率，并對(duì)其交互作用進(jìn)行探討，為MOS在反芻動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用及其與飼糧精粗比的交互作用研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用4×6雙因子析因試驗(yàn)設(shè)計(jì)，共設(shè)2

個(gè)因子，分別為飼糧精粗比(A)和MOS添加水平(B)，飼糧精粗比設(shè)4個(gè)水平，分別為20∶80(A1)、30∶70(A2)、40∶60(A3)和50∶50(A4)，MOS添加水平設(shè)6個(gè)水平，分別為0(B1)、0.4%(B2)、0.8%(B3)、1.2%(B4)、1.6%(B5)和2.0%(B6)，共形成24個(gè)處理。具體試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案Table 1 The experimental design scheme

1.2 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)選用玉米、大豆粕、棉籽粕、苜蓿干草和燕麥草等MOS含量較低的飼料原料，配制MOS含量較低的4種不同精粗比的試驗(yàn)飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在不同精粗比飼糧中添加不同水平的MOS。

表2 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) %

預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kilogram of diets：S 200 mg，F(xiàn)e 25 mg，Zn 40 mg，Cu 8 mg，I 0.3 mg，Mn 40 mg，Se 0.2 mg，Co 0.1 mg，VA 940 IU，VE 20 IU。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

1.4 尼龍袋試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品3.0 g，裝入袋面積為18 cm×15 cm、孔徑為40 μm的尼龍袋內(nèi)，扎緊袋口，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。每只羊瘤胃中放入12個(gè)尼龍袋，重復(fù)2次，拴系于瘺管口固定，于晨飼前將夾好的尼龍袋送入供試綿羊瘤胃腹囊中。分別在放入后3、6、9、12、24和48 h時(shí)取出尼龍袋，用37 ℃蒸餾水沖洗，控制水流速與水溫以及沖洗時(shí)間，沖洗時(shí)間大約為5 min。沖洗后，將尼龍袋及樣品放入65～70 ℃恒溫箱內(nèi)干燥至恒重，然后根據(jù)張麗英等[7]的方法測(cè)定飼糧和殘?jiān)蠨M、OM和CP的含量，并計(jì)算其降解率。

1.5 飼糧瘤胃流通速率及DM、OM和CP有效降解率的測(cè)定

采用鉻標(biāo)記的方法[8]進(jìn)行飼料瘤胃流通速率的測(cè)定。根據(jù)各采樣的時(shí)間點(diǎn)和糞便中氧化鉻的濃度，利用軟件CurveExpert 1.3進(jìn)行最小二乘法曲線擬合，測(cè)定飼料瘤胃流通速率，計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。DM、OM和CP有效降解率計(jì)算采用?rskov等[9]提出的模型，并用SAS 9.3軟件進(jìn)行最小二乘法數(shù)據(jù)曲線擬合，得出a、b、c值。

Pt=a+b(1-e-ct)。

式中：Pt為待測(cè)養(yǎng)分在t時(shí)刻的降解率；a為快速降解部分；b為慢速降解部分；a+b為可降解部分；c為b的降解速率；t為飼料在瘤胃內(nèi)停留時(shí)間。

待測(cè)養(yǎng)分的瘤胃有效降解率與飼糧瘤胃流通速率有關(guān)，其有效降解率為：

P=a+(b×c)/(c+K)。

式中：P為待測(cè)養(yǎng)分的瘤胃有效降解率；a為快速降解部分；b為慢速降解部分；c為b的降解速率；K為飼糧瘤胃流通速率。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 16.0軟件包進(jìn)行雙因素方差分析，差異顯著時(shí)，采用Tukey法進(jìn)行多重比較，分別以P<0.05和P<0.01作為差異顯著性和極顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)P≤0.20為有顯著變化趨勢(shì)。由于飼糧精粗比和MOS添加水平的交互作用(A×B)對(duì)各指標(biāo)均沒(méi)有產(chǎn)生顯著影響，因此僅列出主效應(yīng)數(shù)據(jù)。

表3 不同精粗比飼糧的K值Table 3 K values of diets with different concentrate to roughage ratios

2 結(jié)果與分析

2.1 不同精粗比飼糧中添加MOS對(duì)綿羊瘤胃養(yǎng)分降解率的影響

從表4、表5和表6可以看出，飼糧精粗比對(duì)各時(shí)間點(diǎn)綿羊瘤胃DM、OM和CP的降解率均產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05)，其變化規(guī)律均為隨飼糧精料比例的升高而升高，以A4組各時(shí)間點(diǎn)DM、OM和CP的降解率均最高，且顯著高于A1和A2組(P<0.05)。B因子僅對(duì)各時(shí)間點(diǎn)綿羊瘤胃CP的降解率產(chǎn)生顯著影響(P<0.05)，其呈現(xiàn)出隨MOS添加水平的增加先升高后降低的趨勢(shì)，B5組各時(shí)間點(diǎn)CP的降解率均最高，且顯著高于B1組(P<0.05)。

2.2 不同精粗比飼糧中添加MOS對(duì)綿羊瘤胃養(yǎng)分降解參數(shù)及有效降解率的影響

從表7、表8和表9可以看出，飼糧精粗比對(duì)綿羊瘤胃DM和OM的a、b、a+b和有效降解率及CP的a、b、c和有效降解率均產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05)，其變化規(guī)律均為隨飼糧精料比例的升高而升高，以A4組DM、OM和CP有效降解率最高，顯著高于A1、A2和A3組(P<0.05)。MOS添加水平僅對(duì)綿羊瘤胃CP的a+b產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05)，其變化規(guī)律為隨MOS添加水平的增加先升高后降低，以B5組CP的a+b最高，顯著高于B1、B2和B3組(P<0.05)。

表4 不同時(shí)間點(diǎn)瘤胃DM降解率Table 4 Rumen DM degradation rate at different time points %

A表示飼糧精粗比，B表示MOS添加水平。同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

A represented dietary concentrate to roughage ratio， and B represented MOS supplemental level. In the same column, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

表5 不同時(shí)間點(diǎn)瘤胃OM降解率Table 5 Rumen OM degradation rate at different time points %

表6 不同時(shí)間點(diǎn)瘤胃CP降解率Table 6 Rumen CP degradation rate at different time points %

表7 瘤胃DM降解參數(shù)及有效降解率Table 7 Rumen degradation parameters and effective degradation rate of DM at different time points %

a為快速降解部分；b為慢速降解部分；a+b為可降解部分；c為b的降解速率；P為有效降解率。下表同。

a was immediately degraded fraction, b was slowly degraded fraction, a+b was degradable fraction, c was the rate degradation of b, and P was effective degradation rate. The same as below.

表8 瘤胃OM降解參數(shù)及有效降解率Table 8 Rumen degradation parameters and effective degradation rate of OM at different time points %

續(xù)表8項(xiàng)目Itemabca+bPB220.2543.880.07864.1248.78B320.4944.430.08364.9250.83B420.7144.510.07865.2250.25B521.5244.170.08065.6951.66B619.2144.870.08364.0849.85SEM0.531.310.0001.721.57P值P-valueA<0.0010.0070.235<0.001<0.001B0.6711.0000.9200.9980.996A×B0.7030.4980.5530.4260.127

表9 瘤胃CP降解參數(shù)及有效降解率Table 9 Rumen degradation parameters and effective degradation rate of CP at different time points %

3 討 論

瘤胃養(yǎng)分降解率反映了飼料原料被消化利用的難易程度，是飼料營(yíng)養(yǎng)成分被機(jī)體利用程度的重要標(biāo)志，也是飼用價(jià)值高低的體現(xiàn)。較高的有效降解率標(biāo)志著飼料可以更好地被微生物和機(jī)體組織所利用，而飼糧精粗比就是決定瘤胃養(yǎng)分降解率的重要因素之一[10]。

王吉峰等[11]以4頭安裝永久瘤胃瘺管的泌乳奶牛為研究對(duì)象，采用尼龍袋法測(cè)定不同精粗比飼糧的瘤胃養(yǎng)分降解率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨精料比例的升高，DM和OM在瘤胃中的降解率顯著升高。Getachew等[12]曾對(duì)苜蓿干草、青貯玉米和青貯麥秸體外培養(yǎng)72 h后測(cè)定其DM降解率，發(fā)現(xiàn)苜蓿干草的DM降解率高于青貯玉米和青貯麥秸。Castrillo等[13]的研究表明，升高的精料比例和飼糧中添補(bǔ)大麥，綿羊瘤胃DM和OM的降解率升高。趙天章[14]研究了幾種奶牛常用粗飼料DM、CP及纖維物質(zhì)的動(dòng)態(tài)降解規(guī)律和有效降解率，結(jié)果顯示，瘤胃內(nèi)苜蓿草與苜蓿草塊的DM、CP、NDF和ADF的降解率均高于其他粗飼料。本試驗(yàn)結(jié)果與上述這些結(jié)論一致。本試驗(yàn)研究證實(shí)，各時(shí)間點(diǎn)綿羊瘤胃DM、OM和CP的降解率隨飼糧精料比例的升高而升高，精粗比為50∶50時(shí)有效降解率最高。飼糧中精料比例升高時(shí)，供給瘤胃微生物的可發(fā)酵養(yǎng)分增加，促進(jìn)了瘤胃微生物的生長(zhǎng)和增殖，進(jìn)而導(dǎo)致飼糧中各種養(yǎng)分的降解率升高。在營(yíng)養(yǎng)水平相近時(shí)，改變精粗比必然導(dǎo)致飼糧組成的變化，可以影響瘤胃微生物的數(shù)量，進(jìn)而影響飼糧中各養(yǎng)分的降解率[15-17]。此外，飼料中中性洗滌纖維(NDF)的含量與體外消化率呈負(fù)相關(guān)[12]。薄玉琨等[18]在尼龍袋試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，同白酒糟相比，醋糟的DM消化率較低，這與醋糟中相對(duì)較高的NDF含量有關(guān)。劉海霞等[19]以裝有永久瘤胃瘺管的健康雜交綿羊(東北細(xì)毛羊×小尾寒羊)為試驗(yàn)動(dòng)物，采用尼龍袋法測(cè)定綿羊常用粗飼料瘤胃DM和CP的降解率，發(fā)現(xiàn)飼料中粗纖維(CF)含量相對(duì)高時(shí)可能導(dǎo)致瘤胃中CP降解率下降。國(guó)外也有研究發(fā)現(xiàn)，粗飼料的蛋白質(zhì)中有相當(dāng)一部分與木質(zhì)素緊密結(jié)合，造成蛋白質(zhì)在瘤胃中不易被降解[20]。

本研究還發(fā)現(xiàn)，飼糧精粗比對(duì)綿羊瘤胃DM和OM的a、b、a+b及有效降解率產(chǎn)生了顯著影響，對(duì)CP的a、b、c及有效降解率產(chǎn)生了顯著影響，其變化規(guī)律均為隨精料比例的升高而升高，以A4組最高。薄玉琨等[18]的尼龍袋試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，白酒糟的a比醋糟高，可能是由于白酒糟中含有較多的易于降解的CP引起的。有研究表明，a與CP含量呈正相關(guān)，b主要與NDF含量和消化性呈正相關(guān)，且粗飼料的蛋白質(zhì)中有相當(dāng)一部分與木質(zhì)素緊密結(jié)合[21]。因此，隨著精料比例升高，a會(huì)逐漸增加，而b會(huì)逐漸降低。

粗飼料的蛋白質(zhì)多存在于細(xì)胞內(nèi)容物中，蛋白質(zhì)的降解速度取決于植物細(xì)胞壁的纖維結(jié)構(gòu)[22]，因此，飼料中纖維的降解情況對(duì)蛋白質(zhì)的降解率有重大的影響。本試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，MOS顯著促進(jìn)了綿羊瘤胃CP的降解，顯著增加了CP的a+b。這種改變可能是由于外源寡糖改善了瘤胃發(fā)酵功能，穩(wěn)定和改善了瘤胃內(nèi)環(huán)境，為瘤胃微生物的生長(zhǎng)提供了良好的條件，促進(jìn)了瘤胃微生物的增殖，進(jìn)而提高了CP和纖維物質(zhì)在瘤胃中的降解率。在飼糧中添加適量的MOS還能提高瘤胃中蛋白酶和纖維分解酶的活性，進(jìn)而提高瘤胃中CP的降解率[23-25]。

本試驗(yàn)中飼糧精粗比、MOS添加水平這2個(gè)因子對(duì)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)綿羊瘤胃DM、OM和CP的降解率及其有效降解率均未產(chǎn)生顯著交互作用，這是由于飼糧精粗比對(duì)綿羊瘤胃DM、OM和CP的降解率產(chǎn)生了較強(qiáng)的主效應(yīng)作用，因而沒(méi)有顯示出顯著的交互作用。

4 結(jié) 論

① 隨著飼糧精料比例的升高，綿羊瘤胃DM、OM和CP的降解率和有效降解率均升高，并均在飼糧精粗比為50∶50時(shí)達(dá)最高值。

② 飼糧中添加MOS可提高綿羊瘤胃CP的降解率，當(dāng)MOS添加水平達(dá)到1.6%時(shí)達(dá)最高值。

③ 飼糧精粗比與MOS添加水平對(duì)綿羊瘤胃DM、OM和CP的降解率均沒(méi)有產(chǎn)生顯著的交互作用。

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*Corresponding author, associate professor, E-mail: zhengc@gsau.edu.cn

(責(zé)任編輯 菅景穎)

Effects of Adding Mannan-Oligosaccharides to Diets with Different Concentrate to Roughage Ratios on Nutrient Degradation Rates in Sheep Rumen

WANG Lin ZHAO Chen ZENG Yanxia CHEN Zhilong ZHENG Chen*

(FacultyofAnimalScience&Technology,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070,China)

sheep; concentrate to roughage ratio; mannan oligosaccharides; nylon bag technique; rumen degradation rate

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.07.041

2016-12-27

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31560646)

王 林(1989—)，女，甘肅天水人，碩士研究生，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)專(zhuān)業(yè)。E-mail: 1226084547@qq.com

*通信作者：鄭 琛，副教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: zhengc@gsau.edu.cn

S816

A

1006-267X(2017)07-2556-09