何志明+官思秀+丘作忠

摘要 在前期開(kāi)展樂(lè)昌含笑多點(diǎn)種源家系試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過(guò)嫁接方法建立基因收集庫(kù)，收集保存樂(lè)昌含笑育種材料，調(diào)查分析基因收集庫(kù)中植株生長(zhǎng)情況。結(jié)果表明，嫁接成活率可達(dá)83.39%，能達(dá)到較好的建庫(kù)效果；接穗徑向粗度、接穗高度2個(gè)生長(zhǎng)性狀的統(tǒng)計(jì)分析表明，基因收集庫(kù)中的基因型存在顯著的遺傳差異，顯示出豐富的遺傳多樣性；盒狀圖分析結(jié)果表明，同一基因型中的不同嫁接株也存在一定的差異?；蚴占瘞?kù)的建立對(duì)樂(lè)昌含笑今后的遺傳改良研究有積極的作用。

關(guān)鍵詞 樂(lè)昌含笑；基因收集庫(kù)；生長(zhǎng)情況

中圖分類號(hào) S718.46 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）12-0153-01

Abstract Based on the early research of provenance and family trial of Michelia chapensis Dandy，grafting was adopted to establish a gene collection library for the preservation of genetic material of Michelia chapensis Dandy.Results obtained from growth analysis of plants in gene collection library indicated that the grafting survival ratio was as high as 83.39%.The difference of diameter and height of the grafting was reached high significant level，which showed abundant genetic diversity.Boxplot analysis also indicated different grafted plants with the same genotype appeared some differences.The establishment of gene collection library has positive role for genetic improvement of Michelia chapensis Dandy.

Key words Michelia chapensis Dandy；gene collection library；growth situation

樂(lè)昌含笑（Michelia chapensis Dandy）為木蘭科含笑屬常綠闊葉喬木，其生長(zhǎng)較快，適應(yīng)性強(qiáng)，干形通直，材質(zhì)細(xì)致，具有較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。其原產(chǎn)于我國(guó)江西、湖南、廣東、廣西、貴州等地，是華南地區(qū)重要的鄉(xiāng)土闊葉用材樹(shù)種[1-3]。為了選育優(yōu)良樂(lè)昌含笑種源和家系，廣東省林業(yè)科學(xué)研究院在國(guó)家林業(yè)局項(xiàng)目“大徑級(jí)用材樹(shù)種樂(lè)昌含笑良種選育與試驗(yàn)示范”（2003-009-03-L09）的資助下，于2003年開(kāi)始開(kāi)展樂(lè)昌含笑良種選育研究，收集了南嶺地區(qū)包括廣東、廣西、湖南和江西等省區(qū)多份種源家系基因材料，并于2005—2006年間在粵北、粵西多個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)建立了樂(lè)昌含笑種源家系試驗(yàn)林，研究結(jié)果表明，樂(lè)昌含笑不同種源、家系間存在豐富的遺傳變異，基因資源的遺傳多樣性高。為了保存豐富的基因資源，有必要建立樂(lè)昌含笑基因收集庫(kù)[4-7]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

基因收集庫(kù)營(yíng)建地點(diǎn)設(shè)在九曲水林場(chǎng)場(chǎng)部，地理坐標(biāo)為東經(jīng)114°05′10″、北緯24°22′03″，處于緩坡山丘下部，海拔250 m左右，花崗巖成土、紅壤，土層深1 m以上，肥力較好。

1.2 基因材料收集方法

2014年，對(duì)收集庫(kù)開(kāi)展規(guī)劃布局、整地施肥和挖種植穴后，定植本種砧木。2015—2016年春季，收集前期營(yíng)建樂(lè)昌含笑種源家系試驗(yàn)林中的基因材料，采用嫩梢髓心形成層對(duì)接法進(jìn)行嫁接，建立樂(lè)昌含笑基因收集庫(kù)。嫁接時(shí)間定于早春芽條萌發(fā)前，取粗度為0.3～0.5 cm、包含2～3個(gè)芽的健壯穗條，以45°斜角削平滑的單面楔形接面；選擇砧木健壯主枝，在皮層與木質(zhì)部之間，用嫁接刀向下推動(dòng)，深度與接穗嫁接面相對(duì)，然后將接穗的削面對(duì)貼砧木接面，穗基插入砧木接面下的殘留皮層內(nèi)，接穗一側(cè)形成層與砧木形成層對(duì)齊，再用寬2 cm、長(zhǎng)40 cm的塑料薄膜條帶綁扎即可[8-12]。

1.3 數(shù)據(jù)收集與統(tǒng)計(jì)方法

對(duì)收集庫(kù)中植株進(jìn)行成活率調(diào)查，成活株記為“1”，死亡株記為“0”，使用SAS 9.1的統(tǒng)計(jì)過(guò)程統(tǒng)計(jì)成活株百分率，分析嫁接成活情況；對(duì)部分相同年份嫁接的植株開(kāi)展了徑向粗度和生長(zhǎng)高度等生長(zhǎng)情況調(diào)查，收集生長(zhǎng)數(shù)據(jù)并在SAS中開(kāi)展統(tǒng)計(jì)分析，研究收集庫(kù)中植株的生長(zhǎng)情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 嫁接成活率情況

關(guān)于樂(lè)昌含笑嫁接方法的報(bào)道較少，本試驗(yàn)研究于2015年春季開(kāi)展了多種樂(lè)昌含笑嫁接方法的嘗試，結(jié)果表明，嫁接成活率并不理想，成活率在20%～30%之間。2016年春季，在嘗試了多種嫁接方法后，選定嫩梢髓心形成層對(duì)接法，嫁接時(shí)間控制在嫩芽未萌發(fā)，采用1株砧木不同枝條嫁接2～3個(gè)接穗等多種關(guān)鍵技術(shù)措施，最終提高了嫁接成活率，獲得理想的嫁接建立基因庫(kù)的效果。2016年5月，調(diào)查樂(lè)昌含笑基因庫(kù)嫁接成活情況，調(diào)查了867株嫁接植株，其中成活723株，死亡144株，成活率83.39%。

2.2 多樣性分析

早期多點(diǎn)開(kāi)展的樂(lè)昌含笑種源家系試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在種源和家系2個(gè)水平，樂(lè)昌含笑均存在顯著的遺傳差異，遺傳多樣性豐富。為了分析新建樂(lè)昌含笑基因收集庫(kù)中的基因材料遺傳多樣性情況，2017年4月對(duì)收集庫(kù)中的嫁接植株的接穗徑向粗度和高度開(kāi)展調(diào)查分析，按不同基因型單因素方差分析方法，對(duì)同一年度嫁接的43個(gè)嫁接株開(kāi)展分析，結(jié)果見(jiàn)表1?？梢钥闯觯诮铀氲膹较虼侄群透叨?個(gè)性狀上，不同基因型間均存在極顯著的遺傳差異，達(dá)到0.000 1的極顯著水平。

2.3 嫁接株高度生長(zhǎng)分布情況

對(duì)接穗高度生長(zhǎng)情況開(kāi)展統(tǒng)計(jì)分析，采用盒狀圖（boxplot）分析方法展示同一基因型不同嫁接株在高度生長(zhǎng)性狀上的數(shù)據(jù)分布情況，結(jié)果如圖1所示?？梢钥闯?，同一基因型內(nèi)的不同嫁接株在高度生長(zhǎng)上也表現(xiàn)出較大的差別，其中的原因應(yīng)與立地差異、砧木差異、接穗部位和嫁接方法等因素有關(guān)。個(gè)別嫁接株生長(zhǎng)情況如圖2所示。

3 結(jié)論與討論

基因資源的收集保存對(duì)于遺傳改良研究具有重要的意義和作用，在當(dāng)前生態(tài)環(huán)境被日益重視和物種多樣性逐漸下降的背景下，基因資源收集保存的重要性更有意義。樂(lè)昌含笑是我國(guó)南方地區(qū)常用的綠化造林樹(shù)種之一，其遺傳改良程度相對(duì)來(lái)說(shuō)還處于初級(jí)階段，有很大的提升空間。在當(dāng)前多點(diǎn)種源家系試驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上開(kāi)展基因收集保存，建立樂(lè)昌含笑基因收集庫(kù)對(duì)該樹(shù)種今后的遺傳改良，以及提高栽培的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益有積極作用。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 胡德活，韋如萍，王潤(rùn)輝，等.2年生樂(lè)昌含笑種源生長(zhǎng)研究[J].廣東林業(yè)科技，2009，25（1）：7-12.

[3] 韋如萍，胡德活，張照勛，等.樂(lè)昌含笑果實(shí)特征[J].廣東林業(yè)科技，2006，22（1）：60-63.

[4] 王潤(rùn)輝，張偉紅，鄭會(huì)全，等.樂(lè)昌含笑多點(diǎn)種源試驗(yàn)與優(yōu)良種源選擇研究[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2014（5）：16-21.

[5] 胡德活，韋如萍，張照勛，等.樂(lè)昌含笑種源與家系種子育苗試驗(yàn)[J].廣東林業(yè)科技，2006，22（3）：1-7.

[6] 張偉紅，王潤(rùn)輝，鄭會(huì)全，等.樂(lè)昌含笑優(yōu)樹(shù)多點(diǎn)子代測(cè)定及優(yōu)良家系選擇研究[J].浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，32（5）：763-769.

[7] 張偉紅，王潤(rùn)輝，鄭會(huì)全，等.樂(lè)昌含笑種源地理變異研究[J].西南林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，35（2）：24-29.

[8] 鄒壽明，晏姝，王潤(rùn)輝，等.樂(lè)昌含笑家系試驗(yàn)初報(bào)[J].廣東林業(yè)科技，2009，25（2）：10-15.

[9] 王潤(rùn)輝，胡德活，鄭會(huì)全，等.杉木無(wú)性系生長(zhǎng)和材性變異及多性狀指數(shù)選擇[J].林業(yè)科學(xué)，2012，48（3）：45-50.

[10] 王潤(rùn)輝，胡德活.SAS Proc Mixed在林木育種試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)中應(yīng)用簡(jiǎn)介[J].廣東林業(yè)科技，2011，27（3）：50-54.

[11] 黃少偉，謝維輝.實(shí)用SAS編程與林業(yè)試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析[M].廣州：華南理工大學(xué)出版社，2001.

[12] 丘作忠，王潤(rùn)輝，鄭會(huì)全，等，樂(lè)昌含笑優(yōu)樹(shù)子代測(cè)定及選擇[J].廣東林業(yè)科技，2015，31（3）：1-5.