□ 李 莉 上海市酒類產(chǎn)品質(zhì)量檢驗中心有限公司

氣相色譜法測定碳酸飲料和果醬中4種對羥基苯甲酸酯

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建立了一種氣相色譜法測定碳酸飲料和果醬中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯含量的檢測方法。樣品經(jīng)無水乙醚提取，濃縮后用無水乙醇復(fù)溶，氣相色譜上機測定。4種對羥基苯甲酸酯在4～300 μg/mL范圍內(nèi)校準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，方法檢出限分別為0.076 0、0.072 8、0.063 3、0.062 5 mg/kg，加標(biāo)實驗回收率為90.11%～105.61%，精密度為0.05%～4.53%。

對羥基苯甲酸酯；氣相色譜法；碳酸飲料；果醬

對羥基苯甲酸酯，又稱尼泊金酯，主要包括對羥基苯甲酸甲酯（Methyl-paraben, MP）、對羥基苯甲酸乙酯（Ethyl-paraben, EP）、對羥基苯甲酸丙酯（Propyl-paraben, PP）、對羥基苯甲酸丁酯（Butylparaben, BP）、對羥基苯甲酸異丙酯（Isopropyl-paraben, IPP）和對羥基苯甲酸異丁酯（Isobutyl-paraben, IBP）等酯類。因其在不同的pH值為4～8條件下具有抑菌作用，且抗菌作用比苯甲酸和山梨酸強，被廣泛用于食品保鮮和防腐，但是大量不當(dāng)使用，一定程度上會造成人體健康損害，因此，建立高效、準(zhǔn)確的檢測方法顯得非常必要[1-2]。我國在《GB 2760-2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中明確規(guī)定：果醬和碳酸飲料中對羥基苯甲酸酯類及其鈉鹽最大使用量分別為0.25 g/kg、0.2 g/kg。本文建立了氣相色譜法測定碳酸飲料和果醬中的4種對羥基苯甲酸酯的方法，可應(yīng)用于此類食品中對羥基苯甲酸酯的檢測。

1 材料與方法

1.1 儀器

Agilent 7890B氣相色譜儀（配FID檢測器）；METTLER ME 204電子天平；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；KD200氮吹儀。

1.2 試劑、標(biāo)準(zhǔn)品

無水乙醚、無水乙醇（均為色譜純）；鹽酸、氯化鈉、無水硫酸鈉、碳酸氫鈉（均為分析純）；甲醇中對羥基苯甲酸甲酯溶液、對羥基苯甲酸乙酯溶液、對羥基苯甲酸丙酯溶液、對羥基苯甲酸丁酯溶液的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（中國計量科學(xué)研究院，濃度均為1.00 mg/mL）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取5 g左右樣品，轉(zhuǎn)移至125 mL分液漏斗中，用10 mL飽和氯化鈉溶液分次洗滌小燒杯，合并洗滌液于125 mL分液漏斗，加入1 mL1∶1鹽酸酸化，搖勻，分別以75 mL、50 mL、50 mL無水乙醚提取三次，每次2 min，放置片刻，棄去水層，合并乙醚層于250 mL分液漏斗中，加入10 mL飽和氯化鈉溶液洗滌一次，再用碳酸氫鈉溶液（10 g/L）30 mL洗滌三次，棄去水層。用濾紙吸去漏斗頸部水分，將有機層經(jīng)過無水硫酸鈉（約20 g）濾入濃縮瓶，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮近干，氮吹除去殘留溶劑，準(zhǔn)確加入2 mL無水乙醇復(fù)溶，氣相色譜上機測定。

1.3.2 氣相色譜條件

色譜柱：HP-5毛細管柱，30 m×320 μm×0.25 μm；升溫程序：初溫100 ℃保持1 min，20 ℃/min升溫至170 ℃保持5 min，12 ℃/min升溫至220 ℃保持1 min，10 ℃/ min升溫至250 ℃保持6 min；進樣口：溫度220 ℃，分流進樣，分流比10∶1；柱流速：2.0 mL/min；檢測器：FID，溫度260 ℃。

表1 校準(zhǔn)曲線的數(shù)學(xué)方程、相關(guān)性與方法檢出限表

表2 碳酸飲料和果醬中對羥基苯甲酸酯的加標(biāo)回收率和精密度表（n=6）

2 結(jié)果與討論

2.1 校準(zhǔn)曲線線性范圍和檢出限

本方法校準(zhǔn)曲線共7個點：4.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、300.0 μg/mL。對羥基苯甲酸甲酯溶液、對羥基苯甲酸乙酯溶液、對羥基苯甲酸丙酯溶液、對羥基苯甲酸丁酯溶液在4～300 μg/mL范圍內(nèi)校準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，說明線性較好。

依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.1-2003 食品衛(wèi)生檢驗方法 理化部分 總則附錄A中色譜法檢出限的定義：色譜儀最低響應(yīng)值為S=3N（N為儀器噪音水平，本方法中濃度為5.0 μg/mL的標(biāo)樣，儀器噪音水平N為0.058 69），通過計算，對羥基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯的方法檢出限見表1。

2.2 加標(biāo)回收率和精密度

在精確稱取的5.00 g樣品（碳酸飲料、果醬）中分別加入4種對羥基苯甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，加標(biāo)濃度分別為2.0、20.0、200.0 mg/kg，加標(biāo)實驗平行測定6次取平均值（200 mg/kg加標(biāo)濃度經(jīng)稀釋5倍后上機分析），樣品（碳酸飲料、果醬）本底中4種對羥基苯甲酸酯均未檢出，具體結(jié)果見表2。

3 結(jié)論

實驗結(jié)果表明：4種對羥基苯甲酸酯在4～300 μg/mL范圍內(nèi)校準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，說明在此范圍內(nèi)線性良好。方法檢出限分別為0.076 0、0.072 8、0.063 3、0.062 5 mg/kg，3水平加標(biāo)實驗（n=6）回收率為90.11%～105.61%，精密度為0.05%～4.53%。

本文采用的氣相色譜法適用于碳酸飲料和果醬中對羥基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯的檢測，方法檢出限低、靈敏度高、回收率和精密度高，可有效測定碳酸飲料和果醬類食品中4種對羥基苯甲酸酯的含量。

[1]黃輝,曹小彥,彭新凱.氣相色譜法快速測定檳榔中的對羥基苯甲酸酯[J].食品科技,2014,35(8):336-338.

[2]曹淑瑞,劉治勇,張雷,等.高效液相色譜法同時測定食品中6種對羥基苯甲酸酯[J].分析化學(xué)研究報告,2012,40(4):529-533.