＊張賈亮 陳敏 雷翔霄 王洋

（常州方圓制藥有限公司工程中心 江蘇 213125）

探究高效液相色譜法檢測脂肪乳注射液中的抗氧劑BHT

＊張賈亮 陳敏 雷翔霄 王洋

（常州方圓制藥有限公司工程中心 江蘇 213125）

應(yīng)用液液萃取的方法能夠獲得脂肪乳內(nèi)的BHT（2，6-叔丁基-4-甲基苯酚）抗氧劑，基于此應(yīng)用高效液相色譜法檢測脂肪乳注射液中抗氧BHT。實驗結(jié)果證明，在2.07～259.00ug/mL區(qū)間內(nèi)BHT線性關(guān)系優(yōu)良。回收效率也處于較高層次上。由此可見，對脂肪乳注射液中的抗氧劑BHT采用這樣的檢測方法，在精確性以及時效性等方面均體現(xiàn)出巨大的優(yōu)越性。

脂肪乳注射液；抗氧劑BHT；探究高效液相色譜；精確性

應(yīng)用的色譜柱為Inertsil ODS-SP，柱表溫度為36℃，乙腈-水為其流動相，流動速度為1．5mL/min，檢測波長度為280nm。與天然橡膠相比較，藥用丁基膠塞在密封性、穩(wěn)定性以及低滲出性等方面均體現(xiàn)出優(yōu)良性，正因如此其在藥物包裝領(lǐng)域獲得高頻率的應(yīng)用。基于膠塞組成成分的多樣性，加大了化合物滲透進(jìn)藥液中的幾率，對藥品性能以及潔凈度造成一定程度的干擾。在GC-MS方法以及相關(guān)器具的協(xié)助下，才能對BHT的滲透量進(jìn)行測量，但是這一方法很難普及。所以本文在采用高效液相色譜法，檢測輸液瓶裝脂肪乳注射液膠塞化合物滲透到藥液中的BHT情況。

1.器具和試劑

(1)器具。LC-20A高效液相色譜儀，由日本島津公司制造；低速臺式離心機，由上海安亭科學(xué)儀器廠提供；電子天平，由曝多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司生產(chǎn)。

(2)試劑?？寡鮿〣HT對比樣品品（批號：20627）；四氫呋喃、乙睛、脂肪乳注射液。

2.方法與結(jié)果

(1)色譜條件。色譜柱Inertsil ODS-SP，規(guī)格為0．46cm x1．5，柱內(nèi)5um，柱表溫度為36℃，流動相為乙睛-水，混合比例為4：1，流動速度為1．5mL/min，檢測波長為280 nm，樣品進(jìn)樣量為20uL/次。在上述色譜狀態(tài)下，BHT對比樣品與脂肪乳注射液供試品的HPLC色譜圖如圖1所示。

(2)溶液配制。對比樣品(A)存儲液的配制，精確量取抗氧劑。

BHT對比樣品25．0mg與10mL蒸餾水混合，對其定容之時借用等體積乙睛和四氫呋喃混合液。

脂肪乳注射液供試品的配制。精確量取稱取0．50g脂肪乳注射液，與2mL乙睛充分混合，將其置于轉(zhuǎn)速為3000r/ min的離心機上0．5h，繼而對其施以靜放對策，旨在使脂肪乳注射液與乙睛處于不同的層次上，將乙睛層導(dǎo)入圓底燒瓶內(nèi)，連續(xù)提取3次，對其整合后采取減壓干燥措施然后，將5mL乙睛融入其中，應(yīng)用0．22um濾膜對其施以過濾舉措，即得預(yù)配溶液。

(3)線性關(guān)系。量取一定量抗氧劑BHT儲存液，按照1：1比例對乙睛和四氫呋喃施以混合對策，用混合液稀釋BHT儲存液到2．060、10．32、20．82、51．60、102．6、245．0ug/ mL，進(jìn)樣量均為20uL，應(yīng)用HPLC對其進(jìn)行檢測。每一濃度檢測次數(shù)均為3次，最后計算平均值。基于質(zhì)量濃度與色譜峰面積存在線性關(guān)系這一實況，設(shè)定的線性方程如下，即C=0．0001661A-0．6930，R2=0．9999。檢測結(jié)果證明，抗氧劑BHT儲存液在2．070～259．0ug/mL區(qū)間里線性關(guān)系優(yōu)良。

(4)精密度。量取濃度為8．390、10．26，19．42ug/mL的抗氧劑BHT對比樣品，參照“2．1色譜條件”將其導(dǎo)入液相色譜儀內(nèi)，進(jìn)樣量均為20uL，每一溶液進(jìn)樣總量為60uL，每日中峰面積RSD值分別為0．17%，0．45%，0．06%，在日照條件下，檢測得到的峰面積的RSD值分別為0．25%、0．54%、0．12%。

表1

圖1 BHT對比樣品（A）和脂肪乳注射液供試品(B)HPLC色譜圖

(5)抗氧劑BHT在脂肪乳注射液中遷移量的回收效率。準(zhǔn)確稱量0．60g脂肪乳注射液3份，將其分別注入濃度為0．1154、0．2310與0．5740mg的BHT內(nèi)。與2mL乙睛充分混合，將其置于轉(zhuǎn)速為3000r/min的離心機上0．5h，繼而對其施以靜放對策，旨在使脂肪乳注射液與乙睛處于不同的層次上，將乙睛層導(dǎo)入圓底燒瓶內(nèi)，連續(xù)提取3次，對其整合以后采取減壓干燥措施以后，將5mL乙睛融入其中，應(yīng)用0．22um濾膜對其施以過濾舉措，即得預(yù)配溶液將其導(dǎo)入高效液相色譜內(nèi)，統(tǒng)計結(jié)果見表1。

(6)脂肪乳注射液內(nèi)抗氧劑BHT遷移量的檢測?；?類脂肪乳注射液都沒有測試出抗氧劑BHT，并且樣品前處理環(huán)節(jié)中0．60g脂肪乳注射液處理后定容到5mL，并且本實驗中構(gòu)建的高效液相色譜法的檢測限設(shè)定為0．20ug/mL，因此抗氧劑BHT在脂肪乳注射液中遷移量都低于1．67ug/g。

3.討論

基于脂肪乳注射液體系成分的復(fù)雜性，液液萃取方法在本次實驗進(jìn)程中的應(yīng)用，對樣品處理的效果是極為優(yōu)良的。

將乙睛設(shè)置為提取溶劑，在其協(xié)助下抗氧劑BHT在脂肪乳注射內(nèi)的回收效率處于較高的水平，并且其也承擔(dān)著本次實驗流動相的角色。萃取效果與離心時間存在一定的關(guān)聯(lián)性，實踐證明，與10min與60min相比較，離心為30min時所取得的效果是最佳的。

在最適檢測波長度確定上，對比樣品在200nm～280 nm產(chǎn)生最大吸收，但基于乙睛的截止波長是190nm的緣故，若將波長設(shè)置為200nm，將會產(chǎn)生較大噪音，所以該實驗擇取280nm為檢測波長。

結(jié)束語

借助構(gòu)建HPLC方法并在液液萃取檢方法的協(xié)助下對脂肪乳注射液中的抗氧劑BHT進(jìn)行測定。明確了脂肪乳注射液中BHT的萃取方法，溶劑成分選擇。對3類脂肪乳注射液開展檢測工作，均沒有顯示抗氧劑BHT存在的指標(biāo)出現(xiàn)。由此可見，該方法在脂肪乳注射液中抗氧劑BHT方面帶有精確性與穩(wěn)固性。

[1]李莉,李培,于嬋娟,劉亞華,楊勁．多民族麻醉手術(shù)患者血漿丙泊酚濃度的測定及分析[J]．中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2014,34:84-88．

[2]姜麗娜．高效液相色譜法測定注射用亞胺培南西司他丁鈉含量的分析[J]．中國醫(yī)藥指南,2015,04:57-58．

[3]田宇,史小平,賀春浩,許雪飛,何聰芬．HPLC技術(shù)研究美白類化妝品中熊果苷穩(wěn)定性[J]．香料香精化妝品,2015,02:33-36．

(責(zé)任編輯：王恒)

Study on the Detection of Antioxygen BHT in Fat Emulsion Injection by High Performance Liquid Chromatography Method

Zhang Jialiang, Chen Min, Lei Xiangxiao, Wang Yang

（Engineering Center, Changzhou Fangyuan pharmacy Co., ltd., Jiangsu, 213125）

Application liquid-liquid extraction method can obtain the BHT(2,6-tertiary butyl-methylphenol)antioxygen in fat emulsion, based on which, using the high performance liquid chromatography method to detect take detection of the antioxygen BHT in fat emulsion injection. The experiment result proves that in the range of 2.07～259.00ug/mL, the BHT linear relation is good and the recovey rate is also in the higher level. Thus, it can seen that, adopting this method has great superiority in the aspects of accuracy and effectiveness.

fat emulsion injection；antioxygen BHT；high performance liquid chromatography study；accuracy

T < class="emphasis_bold"> 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

A

張賈亮（1987～)，男，常州方圓制藥有限公司工程中心；研究方向：生物工程（生物制藥)。