郭 蕊，丁國(guó)濤，孫曉霞，羅 莉，侶麗莎，仵 春，鮑春銘

（河南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，河南 鄭州 450004）

芝麻餅肥中芝麻素和芝麻林素含量的測(cè)定

郭 蕊，丁國(guó)濤，孫曉霞，羅 莉，侶麗莎，仵 春，鮑春銘

（河南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，河南 鄭州 450004）

利用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定芝麻餅肥中芝麻素和芝麻林素的含量。液相色譜條件為：流動(dòng)相為甲醇水溶液（V甲醇∶V水=80∶20），流速 1.0 mL/min，進(jìn)樣量 5.0 μL，柱溫為室溫，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)287 nm。檢驗(yàn)結(jié)果表明：被測(cè)兩峰完全分離，且峰形較好，芝麻素和芝麻林素均在1～100 mg/L范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，R2分別為1.000 0、0.999 9；該方法的精密度、重現(xiàn)性及準(zhǔn)確度均較好，芝麻素平均回收率在98.2%～100.2%之間，芝麻林素平均回收率在96.7%～99.8%之間；樣品提取液在2 h內(nèi)穩(wěn)定。芝麻餅肥中芝麻素和芝麻林素總含量為1.2～133.7 mg/100 g，芝麻素與芝麻林素含量比例為0.9～3.1。試驗(yàn)驗(yàn)證了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定芝麻餅肥中芝麻素、芝麻林素含量的可行性，為芝麻餅肥的質(zhì)量檢測(cè)提供了技術(shù)支持。

芝麻餅肥；芝麻素；芝麻林素

0 引言

芝麻餅是芝麻榨油加工后剩下的殘?jiān)写罅康挠袡C(jī)質(zhì)、蛋白質(zhì)和維生素等，營(yíng)養(yǎng)成分濃度高。芝麻素和芝麻林素是芝麻中特有的木酚素類(lèi)物質(zhì)，制取芝麻油后產(chǎn)生的芝麻餅粕中仍然含有相當(dāng)量的木酚素類(lèi)化合物[1-2]。此外，芝麻餅粕還含有一定的油脂和脂肪酸化合物，吸水較慢，是一種遲效性有機(jī)肥，一般有機(jī)質(zhì)含量為75%～85%，氮為2%～7%，磷為 2%～3%，鉀為 1%～2%，還含有微量元素，必須經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵分解后，才能發(fā)揮肥效。研究表明，配施芝麻餅肥可以有效改良土壤微環(huán)境，更有利于土壤養(yǎng)分的釋放和利用，在同等條件下，芝麻餅肥要比其他肥料肥效高、肥效長(zhǎng)、肥性穩(wěn)定[3]。配施芝麻餅肥對(duì)煙草的生長(zhǎng)起到很大的作用，施肥后不但花木的葉片油綠肥厚，而且花大、色艷。

芝麻素與芝麻林素的含量與比值可以用作判斷芝麻餅肥中芝麻餅含量高低的依據(jù)。芝麻素、芝麻林素的檢測(cè)主要有薄層色譜法[4]，紫外分光光度法[5]，高效液相色譜法[6]等。本文以芝麻餅肥為原料，利用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定芝麻餅中芝麻素和芝麻林素的含量，為芝麻餅肥的質(zhì)量檢測(cè)提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

芝麻餅肥，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎后過(guò)0.25 mm孔徑篩，去除篩上物，在室溫下保存。

芝麻素標(biāo)準(zhǔn)品（607-80-7）、芝麻林素標(biāo)準(zhǔn)品（526-07-8）：Sigma公司；甲醇：色譜純，Merck公司；無(wú)水乙醇：優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；水為超純水。

1.2 儀器

e2695高效液相色譜儀（Waters公司，配備紫外檢測(cè)器）；AUY 220電子天平（梅特勒-托利多公司）；VORTEX 1渦旋混勻器（IKA公司）；SK3300H超聲波清洗儀（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

1.3 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

芝麻中木酚素類(lèi)化合物在200～400 nm紫外區(qū)有特征吸收，其中芝麻素在287 nm和235 nm處有最大紫外吸收，芝麻林素在288.5 nm和235 nm處也有較大的紫外吸收，考慮到287 nm處特征吸收較明顯，雜峰干擾小[5]，選取紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為287 nm。

1.4 高效液相色譜法測(cè)定芝麻素和芝麻林素的含量

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取10.0 mg芝麻素、芝麻林素標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL容量瓶中，用80%乙醇水溶液定容，配制成100 μg/mL的芝麻素、芝麻林素混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。精密吸取 1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、40.0 mL 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于100 mL容量瓶中，用80%乙醇水溶液定容至刻度，搖勻，配制成質(zhì)量濃度為 1、2、5、10、20、50 μg/mL的系列芝麻素、芝麻林素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4.2 樣品處理

稱(chēng)取試樣約0.5 g，置于10 mL離心管中，加入5 mL 80%乙醇水溶液，渦旋混勻，超聲15 min，常溫下8 000 r/min離心6 min，取上清液于試管中；殘?jiān)性偌尤? mL 80%乙醇水溶液按同樣步驟提取，合并提取液，混勻，經(jīng)0.45 μm有機(jī)相濾膜過(guò)濾后待液相色譜分析。

1.4.3 色譜分析

液相色譜條件：流動(dòng)相為甲醇水溶液（V甲醇∶V水=80∶20），流速 1.0 mL/min，進(jìn)樣量 5.0 μL，柱溫為室溫，檢測(cè)器波長(zhǎng)287 nm。取芝麻素、芝麻林素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，連同樣品依次進(jìn)樣，進(jìn)行液相色譜分析，依據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

分別根據(jù)各系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（見(jiàn)圖1、圖2），得到芝麻素、芝麻林素質(zhì)量濃度（x）與峰面積（y）之間的線(xiàn)性回歸方程分別為：y=12.906 5x+0.772 3，R2=1.000 0；y=10.169 9x-1.502 7，R2=0.999 9。芝麻素、芝麻林素的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見(jiàn)圖3，芝麻餅肥樣品溶液的色譜圖見(jiàn)圖4。

圖1 芝麻素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)Fig.1 Standard curve of sesamin

圖2 芝麻林素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)Fig.2 Standard curve of sesamolin

圖3 芝麻素、芝麻林素標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖Fig.3 Chromatogram of sesamin and sesamolin standard solutions

圖4 芝麻餅肥樣品溶液色譜圖Fig.4 Chromatogram of sesame cake fertilizer sample solution

結(jié)果表明，芝麻素、芝麻林素均在1～100 mg/L范圍內(nèi)線(xiàn)性良好，由圖3、圖4可以看出，芝麻素、芝麻林素兩峰完全分離，且峰形良好。芝麻素的保留時(shí)間為6.06 min，芝麻林素的保留時(shí)間為7.29 min。

2.2 檢出限

按信噪比（S/N）等于3計(jì)算檢出限，該方法的芝麻素檢出限為0.02 mg/100 g，芝麻林素檢出限為0.04 mg/100 g。

2.3 精密度試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱(chēng)取同一芝麻餅肥樣品1份，按“1.4”方法進(jìn)行預(yù)處理后，按以上色譜條件進(jìn)行測(cè)定，連續(xù)進(jìn)樣6次，分別計(jì)算芝麻素和芝麻林素峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 精密度試驗(yàn)結(jié)果Table 1 Results of precision tests

由表1得出芝麻素、芝麻林素峰面積RSD值分別為0.30%、0.35%，說(shuō)明試驗(yàn)結(jié)果的精密度較高，數(shù)據(jù)可靠。

2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)

取某一芝麻餅肥樣品按照上述方法進(jìn)行預(yù)處理和分析，同時(shí)做6個(gè)平行試驗(yàn)，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），考察方法的重現(xiàn)性，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Results of repeatability tests

由表2中芝麻素、芝麻林素的RSD值可以看出，該檢測(cè)方法的重現(xiàn)性較好。

2.5 回收率試驗(yàn)

分別取高、中、低水平且已知芝麻素、芝麻林素含量的芝麻餅肥樣品，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，分別添加高、中、低濃度的芝麻素、芝麻林素標(biāo)樣，每個(gè)水平同時(shí)測(cè)定3次，平均回收率計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。

表3結(jié)果表明，芝麻素平均回收率在98.2%～100.2%之間，芝麻林素平均回收率在96.7%～99.8%之間，說(shuō)明上述方法準(zhǔn)確度高。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一樣品提取液，分別在 0、10、30、60、90、120 min后按上述方法測(cè)定其中芝麻素和芝麻林素含量，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），考察提取液中芝麻素和芝麻林素在常溫下的穩(wěn)定性，結(jié)果見(jiàn)表4。

表3 樣品回收率試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Results of sample recovery tests

表4 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果Table 4 Results of stability tests

由表4可知，樣品在提取后2 h內(nèi)，芝麻素和芝麻林素含量的測(cè)定結(jié)果相差不大，RSD分別為1.00%和1.67%，說(shuō)明提取液在2 h內(nèi)穩(wěn)定，在其間測(cè)定出的芝麻素和芝麻林素含量的數(shù)據(jù)是可靠的。

2.7 芝麻餅肥樣本中芝麻素和芝麻林素含量分析對(duì)河南省內(nèi)不同企業(yè)生產(chǎn)的56個(gè)芝麻餅肥樣品進(jìn)行檢測(cè)分析，檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5，芝麻素和芝麻林素總含量、芝麻素與芝麻林素含量比值分布分別見(jiàn)圖5、圖 6。

圖5 芝麻素和芝麻林素總含量分布Fig.5 Distribution of total content of sesamin and sesamolin

表5中56個(gè)不同芝麻餅肥樣品基本可以覆蓋河南省內(nèi)企業(yè)生產(chǎn)芝麻餅肥的基本狀況。由表5可以看出，芝麻餅肥中芝麻素和芝麻林素總含量范圍為1.2～133.7 mg/100 g，芝麻素與芝麻林素含量比例波動(dòng)范圍為0.9～3.1。由圖5、圖6可知，省內(nèi)企業(yè)生產(chǎn)的芝麻餅肥中芝麻素和芝麻林素總含量大部分集中在 20～40 mg/100 g、70～110 mg/100 g之間，芝麻餅中芝麻素與芝麻林素含量的比值在2左右。

圖6 芝麻素與芝麻林素含量比值分布Fig.6 Distribution of content ratio of sesamin to sesamolin

3 結(jié)論

利用高效液相色譜法測(cè)定芝麻餅肥中芝麻素和芝麻林素的含量，結(jié)果表明，芝麻素和芝麻林素均在1～100 mg/L范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，該方法的精密度、重現(xiàn)性及準(zhǔn)確度均較好，芝麻素平均回收率在98.2%～100.2%之間，芝麻林素平均回收率在96.7%～99.8%之間，樣品在提取后2 h內(nèi)芝麻素和芝麻林素含量的測(cè)定結(jié)果相差不大。同時(shí)對(duì)河南省內(nèi)不同企業(yè)生產(chǎn)的56個(gè)芝麻餅肥樣品進(jìn)行檢測(cè)，這些樣品基本可以覆蓋省內(nèi)芝麻餅肥質(zhì)量的基本狀況，檢測(cè)結(jié)果顯示，芝麻餅肥樣品中芝麻素和芝麻林素總含量范圍為1.2～133.7 mg/100 g，芝麻素與芝麻林素含量比例范圍為0.9～3.1。

本文驗(yàn)證了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定芝麻餅肥中芝麻素、芝麻林素含量的可行性，同時(shí)為芝麻餅肥的質(zhì)量檢測(cè)提供了技術(shù)支持，芝麻素與芝麻林素的含量異?？梢哉f(shuō)明其摻假的可能性。芝麻餅粕的添加量及發(fā)酵程度均會(huì)影響芝麻餅肥樣品中芝麻素、芝麻林素的含量，具體影響因素有待進(jìn)一步研究。

表5 不同芝麻餅肥樣本中芝麻素、芝麻林素的含量Table 5 Contents of sesamin and sesamolin in different sesame cake fertilizer samples

［1］ SUJA K P，ABRAHAM J T，THAMIZH S N，etal.Antioxidantefficacy ofsesame cake extract in vegetable oil protection［J］.Food Chemistry，2004，84:393-400.

［2］ SUJA K P，JAYALEKSHMY A，ARUMUGHAN C.Antioxidant activity of sesame cake extract［J］.Food Chemistry，2005，91:213-219.

［3］ 武雪萍，劉增俊，趙躍華，等.施用芝麻餅肥對(duì)植煙根際土壤酶活性和微生物碳、氮的影響［J］.植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2005，11（4）：541-546.

［4］ 李泳雪，曾偉杰，吳斌.薄層掃描法測(cè)定便通膠囊中芝麻素的含量［J］.中國(guó)中藥雜志，2002，27（7）：517-518.

［5］ 馮志勇，谷克仁.紫外光譜法測(cè)定芝麻素與芝麻林素含量［J］.中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2006，21（3）：296-300.

［6］ 陳偉，劉紅彥，倪云霞.C18凈化－HPLC測(cè)定芝麻中芝麻素和芝麻林素含量［J］.中國(guó)油脂，2011，36（3）：71-74.

DETERMINATION OF SESAMIN AND SESAMOLIN CONTENT IN SESAME CAKE FERTILIZER

GUO Rui， DING Guotao， SUN Xiaoxia， LUO Li， LV Lisha， WU Chun， BAO Chunming
（Henan Province Product Quality Supervision and Inspection Institute， Zhengzhou 450004， China）

The contents of sesamin and sesamolin in sesame cake fertilizer samples were determined by high-performance liquid chromatography at the same time.The determination conditions of high-performance liquid chromatography were as follows:methanol solution （Vmethanol∶Vwater=80∶20）as mobile phase，flow rate 1.0 mL/min，injection volume 5.0 μL，column temperature room temperature，and UVD wavelength 287 nm.Results showed that the two tested peaks were separated completely and had good peak shapes;both the sesamin and sesamolin had good linear relationship within 1 to 100 μg/mL with correlation coefficients of 1.000 0 and 0.999 9，respectively.The method had high precision，high repeatability and high accuracy;the average recoveries of sesamin and sesamolin were within 98.2%to 100.2%and 96.7%to 99.8%，respectively;and the sample extract was stable in two hours.The total content of sesamin and sesamolin in sesame cake fertilizer was 1.2 to 133.7 mg/100 g，and the ratio of sesamin to sesamolin was 0.9 to 3.1.The experiments verified the feasibility of using high-performance liquid chromatography to determine sesamin and sesamolin in sesame cake fertilizer at the same time，thereby providing technical support for quality detection of sesame cake fertilizer.

sesame cake fertilizers；sesamin；sesamolin

TS229

B

1673-2383(2017)03-0093-06

http://kns.cnki.net/kcms/detail/41.1378.N.20170621.1051.034.html

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2017-6-21 10:51:10

2016-10-31

河南省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2016ZJ07）

郭蕊（1987—），女，河南新鄉(xiāng)人，碩士研究生，工程師，主要從事化工產(chǎn)品的分析研究工作。