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        PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果比較

        2017-07-18 12:02:20劉清源
        豬業(yè)科學(xué) 2017年6期
        關(guān)鍵詞:耳病滴度活疫苗

        劉清源

        (廣東省惠州市惠城區(qū)馬安畜牧獸醫(yī)與漁業(yè)站,廣東 惠州 516001)

        PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果比較

        劉清源

        (廣東省惠州市惠城區(qū)馬安畜牧獸醫(yī)與漁業(yè)站,廣東 惠州 516001)

        為比較豬藍耳病滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果,本試驗在惠城區(qū)某豬場隨機選取100頭仔豬,分成兩組,分別免疫豬藍耳病滅活疫苗與弱毒疫苗,采用ELISA方法檢測血清中的抗體水平,并對兩組抗體的S/P值進行比較。結(jié)果表明,豬藍耳病弱毒疫苗產(chǎn)生的抗體水平比滅活疫苗高,滅活疫苗免疫效果較差,且抗體持續(xù)時間短。本研究為豬場藍耳病的防控及免疫程序的制定提供理論依據(jù)。

        PRRSV;滅活疫苗:弱毒疫苗;比較

        豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一種高致病性傳染病[1]。由于PRRSV具有免疫抑制的特點,病豬對其他疾病的抵抗能力也會降低,增加混合感染的風(fēng)險,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。該病無特效治療藥物,對豬群進行疫苗免疫和抗體水平監(jiān)測是防止PRRSV感染的重要手段[2]。我國的PRRSV商品化疫苗以滅活疫苗和弱毒疫苗為主[3]。為比較兩種疫苗免疫效果,探討2種疫苗的選用及免疫程序的制定,本試驗分別使用上述兩種疫苗對惠城區(qū)某豬場的100頭豬進行分組免疫,于免疫14 d、28 d、42 d、56 d、70 d后采集血清樣品,采用ELISA試劑盒進行抗體檢測,并對兩種疫苗的免疫效果進行比較和分析,為豬場疫苗的選擇及免疫時間的確定提供參考。

        1 材料和方法

        1.1 儀器及試劑

        酶標(biāo)儀ELX800,購自BIOTEK公司;PRRSV抗體試劑盒,購自武漢科前生物公司。

        1.2 疫苗

        PRRSV滅活疫苗(NVDC-JAXI株)和弱毒疫苗(JAXI-R株)均為國家招標(biāo)疫苗。

        1.3 動物分組及免疫情況

        將某豬場100頭豬豬分為A、B兩組,每組50頭,A組接種滅活疫苗,2 mL/頭;B組接種弱毒疫苗,1頭份/頭,均在頸部肌肉注射,首免后48 d進行二免。

        1.4 血清的制備

        分別于免疫前、免疫后1 4d 、28 d、42 d、56 d、70 d后從豬前腔靜脈采血,6 000 r/min離心15 min,取上清于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.5 抗體檢測方法

        待檢血清采用E L ISA方法檢測PRRSV抗體,具體操作步驟參照試劑盒說明書進行。

        1.6 結(jié)果判定

        通過計算樣品孔與陽性孔 OD630nm比值 S/P 值來判定被檢血清PRRSV抗體的結(jié)果。判定標(biāo)準(zhǔn):S/P 值>0.42,判定被檢血清藍耳病病毒抗體陽性;S/ P值<0.42,則判定被檢血清藍耳病抗體陰性。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 PRRSV抗體檢測陽性率比較

        免疫后,A、B兩組抗體陽性率有所升高,A組抗體陽性數(shù)隨時間延長不斷增加,二免28 d后,陽性率達到94%;B組在免疫后42 d,抗體陽性率達到100%,二免后抗體水平趨于穩(wěn)定。B組陽性率在首免后不同時間段內(nèi)抗體陽性率均高于A組,對豬群的保護作用較A組理想(見表1)。

        2.2 PRRSV疫苗誘導(dǎo)抗體的檢測結(jié)果

        從兩種疫苗接種后PRRS V抗體S/P值來看(見圖1),弱毒疫苗激發(fā)機體產(chǎn)生的抗體滴度要明顯高于滅活疫苗,B組在首免后抗體水平不斷升高,二免后抗體增幅較大,二免28 d后抗體水平達到最高值;A組在免疫后抗體滴度開始升高,首免后28~42 d抗體S/P值出現(xiàn)下降的現(xiàn)象,加強免疫后,PRRSV抗體滴度繼續(xù)升高,B組接種疫苗28 d內(nèi),二免抗體水平高于首免。

        3 討論

        本研究表明,PRRSV弱毒疫苗接種后能快速激發(fā)機體產(chǎn)生抗體,從表1中可以看出,接種弱毒疫苗28 d后,B組試驗豬群的平均抗體滴度超過國家規(guī)定的“抗體合格率超過70%”的標(biāo)準(zhǔn)。而A組結(jié)果顯示,PRRSV滅活疫苗在二免前豬群抗體合格率僅為64%,需要進行補免才能使抗體合格率達到國家的基本要求。圖1結(jié)果顯示,B組在接種弱毒疫苗28 d后,PRRSV抗體檢測結(jié)果呈陽性。隨后,S/P值繼續(xù)升高,表明體內(nèi)的抗體滴度在免疫后不斷增強,抗體水平穩(wěn)定,能夠有效保護豬群不受該病的感染。而A組在接種滅活疫苗后28 d,仍有部分豬的抗體S/P值低于0.42,表1 中A組在免疫后42 d相比2周前抗體陽性率較高,但是在28~42 d內(nèi),S/P值還出現(xiàn)下降的趨勢,說明首免28 d后抗原蛋白在機體內(nèi)激發(fā)抗體產(chǎn)生的能力已開始減弱,因此,即使抗體陽性率符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn),仍需對抗體S/P值進行定期監(jiān)測,不能忽視因為體內(nèi)抗原降解而導(dǎo)致的豬群在出欄前抗體水平下降。二免后抗體水平雖然有所上升,首免70 d后,還存在個別豬出現(xiàn)抗體陰性的現(xiàn)象。在整個免疫過程中,滅活疫苗誘導(dǎo)的抗體始終低于弱毒疫苗,弱毒疫苗在接種1頭份/頭即可產(chǎn)生良好的效果,無需進行二次免疫。而滅活疫苗要達到國家規(guī)定的抗體合格率,則需進行加強免疫,時間設(shè)置在首免30日左右最為適宜。

        表1 PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗免疫組的抗體陽性率 %

        圖1 接種疫苗后PRRSV抗體S/P值變化情況

        PRRSV滅活疫苗安全性較高,易于運輸和保存,使用方便,因此為眾多養(yǎng)殖戶所青睞[4]。滅活疫苗可能在加工過程中造成一些重要的抗原表位喪失[5],僅能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生體液免疫,導(dǎo)致首免效果不理想,需要二次免疫才能產(chǎn)生對豬群的有效保護。而弱毒疫苗具有快速誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生,抗體有效時間長等優(yōu)點,近年來也備受用戶關(guān)注,這可能是因為弱毒疫苗接種后,機體內(nèi)部免疫與自然感染病毒類似,能同時誘導(dǎo)體液反應(yīng)和細胞免疫反應(yīng)[6],使得抗體的產(chǎn)生速度更快,持續(xù)時間更長。但是PRRSV弱毒疫苗使用過程中存在安全性方面的問題,活的毒株可能在豬體內(nèi)發(fā)生弱毒返強的現(xiàn)象。豬場在疫苗選擇的問題上,應(yīng)該根據(jù)具體實際情況而定,在周邊PRRSV感染威脅較小的情況下,應(yīng)盡可能選用滅活疫苗,增加免疫次數(shù),進行定期抗體水平監(jiān)測,以期達到凈化PRRSV的目的[7]。而在PRRSV流行地區(qū),或豬場已經(jīng)暴發(fā)該病,則應(yīng)選用弱毒疫苗,但需注意的是,斷奶仔豬不宜接種弱毒疫苗,因為部分弱毒疫苗可能由于減毒效果不理想,使抵抗力較低的仔豬出現(xiàn)“疫苗毒”感染[8]。另外,PRRSV弱毒疫苗的毒株在機體內(nèi)容易與其他毒株發(fā)生重組,產(chǎn)生病毒變異株,因而豬場在選用弱毒疫苗時,應(yīng)盡量避免不同毒株的疫苗混用。

        [1] 李祥健, 劉有昌, 趙東升. 豬藍耳病[J]. 畜禽業(yè), 2009 (3): 64-66.

        [2] 劉生杰, 劉成文. 豬藍耳病及繼發(fā)感染試驗診斷與綜合防治研究[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報, 2007, 23(9): 40-43.

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        [4] 曹斌, 王海燕, 周廣生, 等. 不同類型豬藍耳病疫苗的體液免疫效果比較[J]. 中國動物檢疫, 2010, 27(8): 51-52.

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        2017-02-16)

        劉清源(1990-),男,廣東惠州人,碩士研究生,從事臨床獸醫(yī)方面研究

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