王文飆，郭淑珍*，才讓鬧日，李保明，趙光平，牟永娟，馬登錄，楊樹猛，楊 振，宋 文，王杰峰，樊江峰

(1.甘肅省甘南州畜牧工作站, 甘肅 合作 747000；2.甘南州合作市畜牧工作站,甘肅 合作 747000；3.甘南州夏河縣畜牧工作站,甘肅 夏河 747100;4.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),甘肅 蘭州 730000)

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不同組合生殖激素誘導(dǎo)牦牛同期發(fā)情的試驗研究

王文飆1，郭淑珍1*，才讓鬧日1，李保明1，趙光平1，牟永娟1，馬登錄1，楊樹猛1，楊 振2*，宋 文1，王杰峰3，樊江峰4

(1.甘肅省甘南州畜牧工作站, 甘肅 合作 747000；2.甘南州合作市畜牧工作站,甘肅 合作 747000；3.甘南州夏河縣畜牧工作站,甘肅 夏河 747100;4.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),甘肅 蘭州 730000)

本研究為探討GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法誘導(dǎo)牦牛同期發(fā)情效果。選擇牦牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社的母牦牛為試驗牛，采用GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法對未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情處理，發(fā)情率及妊娠率分別為92%、90%、95%、93%和76%、70%、70%、67，差異不顯著(P>0.05)。試驗結(jié)果表明，PG+PG+PMSG發(fā)情率高于GnRH+PG+GnRH，但發(fā)情后的妊娠率GnRH+PG+GnRH高于PG+PG+PMSG。結(jié)果顯示,應(yīng)運激素調(diào)控生殖軸中下丘腦和垂體后的效果明顯優(yōu)于直接調(diào)控卵巢的效果。

牦牛；誘導(dǎo)；同期發(fā)情

為提高牦牛單位個體的生產(chǎn)性能，降低雜交改良的成本，促進(jìn)雜交技術(shù)的推廣，利用生殖激素誘導(dǎo)調(diào)控牦牛的發(fā)情周期，使它們集中發(fā)情、集中配種、集中妊娠、集中分娩。本試驗對牦牛1～5月份進(jìn)行冷季補飼，利用GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG生殖激素組合在牦牛發(fā)情受配集中的7～8月份，通過同期發(fā)情、定時授精技術(shù)，使母牦牛達(dá)到同期發(fā)情，提高牦牛的繁殖率，從而降低人工授精的成本，有利于人工授精技術(shù)的進(jìn)一步推廣。由于受傳統(tǒng)放牧條件的影響，牦牛人授精的工作開展較少，并且發(fā)情鑒定、操作困難 ，但當(dāng)年產(chǎn)犢母牦牛在產(chǎn)后一年甚至兩年都不能出現(xiàn)自然發(fā)情，牦牛的繁殖率低下，嚴(yán)重影響農(nóng)牧民的經(jīng)濟(jì)效益，阻礙青藏高原生態(tài)畜牧業(yè)的發(fā)展。促性腺激素釋放激素(GnRH)是下丘腦分泌的激素主要生理作用是刺激垂體前葉釋放促卵泡素(FSH)和促黃體素(LH)，前列腺素(PG)是子宮分泌的激素主要生理作用是溶解黃體，引起子宮收縮,孕馬血清促性腺激素(PMSG)是胎盤分泌的激素主要生理作用類似促卵泡素(FSH)和促黃體素(LH)。

1 材料與方法

1.1 試驗牛

選擇夏河縣阿木去乎鎮(zhèn)牙利吉辦事處牦牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社母牦牛90頭。其中，其中不帶犢母牦牛50頭、帶犢母牦牛40頭。合作市卡加道鄉(xiāng)巴日村牦牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社的母牦牛70頭。其中不帶犢母牦牛40頭、帶犢母牦牛30頭。

1.2 試驗藥品

戈那瑞林注射液(GnRH)，寧波市三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號：C160507,規(guī)格為2 mL:100 ug;氯前列醇鈉注射液(PG)，寧波市三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號：S150915,規(guī)格為2 mL:0.2 mg。注射用血促性素(PMSG),寧波市三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號：B160611,規(guī)格為1 000單位。

1.3 試驗牛補飼

試驗組160頭母牦牛于1月份開始白天放牧、晚上補飼。飼料為正大牛育肥全價顆粒飼料，型號582，補飼強度為0.8 kg/頭·d，并在暖棚內(nèi)過夜，不帶犢母牦牛補飼于5月底結(jié)束，帶犢母牦牛補飼于產(chǎn)犢前結(jié)束。當(dāng)犢牦牛3-4月齡時，帶犢母牦牛與犢牛進(jìn)行隔離斷奶，犢牛飼料為正大犢牛飼料補充料，型號571。

1.4 試驗分組

誘導(dǎo)發(fā)情及同期發(fā)情處理試驗對帶犢母牦牛和不帶犢母牦牛進(jìn)行，試驗牦牛標(biāo)記耳號，建立詳細(xì)的處理檔案。將母牦牛分成1、2二個組，采用GnRH+PG+GnRH法處理第1組90頭母牦牛，其中不帶犢母牦牛50頭、帶犢母牦牛40頭。采用PG+PG+PMSG法處理第2組70頭母牦牛，其中不帶犢母牦牛40頭、帶犢母牦牛30頭。

1.5 同期發(fā)情處理

在牦牛發(fā)情集中的7月初開始至8月初結(jié)束，采用GnRH+PG+GnRH法。Ovsynch程序，其程序是在開始當(dāng)天每頭牛注射戈那瑞林100 ug，第7 d注射氯前列醇鈉0.3 mg,第9 d注射戈那瑞林100 ug。第10 d觀察記錄母牦牛發(fā)情結(jié)果，在24 h內(nèi)進(jìn)行人工授精。采用PG+PG+PMSG法。其程序是開始當(dāng)天注射氯前列醇鈉0.2 mg，第7 d注射氯前列醇鈉0.2 mg，第8 d注射孕馬血清促性腺激素(PMSG)1 000單位。第10 d觀察記錄母牦牛發(fā)情結(jié)果，在24 h內(nèi)進(jìn)行人工授精。

1.6 母牦牛發(fā)情鑒定及人工授精

試驗牛于同期發(fā)情藥物處理后24 h內(nèi)觀察發(fā)情表現(xiàn)。觀察陰門流清水或流白色粘液、腫脹，尾巴的尾毛下方有白色或黃色結(jié)塊，外陰唇顏色紅潤或紅色暗淡，互相爬跨，宮頸開張(輸精時輸精搶順利插入子宮頸環(huán)形皺褶的部位)為發(fā)情判定的標(biāo)準(zhǔn)。有發(fā)情表現(xiàn)的母牦牛在24 h內(nèi)分別二次進(jìn)行人工授精，下個情期發(fā)情者為自然發(fā)情牛進(jìn)行人工授精或自然交配。人工授精所用冷凍精液為甘肅省畜牧管理局提供的娟姍牛冷凍細(xì)管精液，自然交配種公牛為西黃雜種公?；蚬笈?。授配三月后通過直腸檢查進(jìn)行妊娠診斷，后期通過外部觀察進(jìn)行妊娠診斷。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)情效果

GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法對未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情處理，發(fā)情率分別為92%、90%、95%、93%，差異不顯著(P>0.05)。用二種組合生殖激素處理后，未帶犢母牦牛發(fā)情率高于帶犢母牦牛發(fā)情率，但差異不顯著(P>0.05)。用二種組合生殖激素處理未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛有粘液或結(jié)塊分別為34%、30%、45%、40%.差異不顯著(P>0.05)，但用二種方法處理未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛有粘液或結(jié)塊平均為32%、43%，差異顯著(P<0.05)。(見表1、表2)

表1 GnRH+PG+GnRH法誘導(dǎo)未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情效果

表2 PG+PG+PMSG法誘導(dǎo)未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情效果

2.2 發(fā)情同步率

用GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法對未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情處理，絕大部分母牦牛發(fā)情集中在處理后48～72 h之間，少部分發(fā)情在0～24 h、72～96 h之間。PG+PG+PMSG發(fā)情同步率高于GnRH+PG+GnRH，但差異不顯著(P>0.05)。(見表3、表4)

表3 GnRH+PG+GnRH法誘導(dǎo)未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛發(fā)情同步率

表4 PG+PG+PMSG法誘導(dǎo)未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛發(fā)情同步率

2.3 妊娠情況

用GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法對未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛處理后，妊娠率分別為76%、70%、70%、67%，差異不顯著(P>0.05)。二種組合生殖激素第一情期妊娠率分別為47%、41%，差異顯著(P<0.05)。GnRH+PG+GnRH法對未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛妊娠率均高于PG+PG+PMSG法，但差異不顯著(P>0.05)。(見表5、表6)

表5 GnRH+PG+GnRH法誘導(dǎo)未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情妊娠率

表6 PG+PG+PMSG法誘導(dǎo)未帶犢母牦牛和帶犢母牦牛同期發(fā)情妊娠率

3 討論

利用GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法對母牦牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，雖然可以獲得較高的發(fā)情率和同步率，但發(fā)情表現(xiàn)不明顯,大部分無粘液或結(jié)塊[1]，母牦牛的發(fā)情鑒定較為困難。在人工授精時若輸精槍順利插入子宮頸皺褶二環(huán)或三環(huán)，認(rèn)為是發(fā)情后期,即可輸精[2]。從發(fā)情同期率看，0～72 h發(fā)情同期率分別為91%、94%，高于陳世彪[4]何世明[3]的研究結(jié)果，而大部分母牦牛發(fā)情都集中在25～48 h,這一結(jié)果相一致。

通過GnRH+PG+GnRH、PG+PG+PMSG法對母牦牛同期發(fā)情處理后，發(fā)情率分別為91%、94%，妊娠率分別為73%、69%，雖然PG+PG+PMSG發(fā)情率高于GnRH+PG+GnRH，但發(fā)情后的妊娠率GnRH+PG+GnRH法高于PG+PG+PMSG，這在第一情期更為明顯。試驗結(jié)果顯示，應(yīng)運激素調(diào)控生殖軸中下丘腦和垂體后的效果明顯優(yōu)于直接調(diào)控卵巢的效果[4]。

通過試驗，認(rèn)為在組織實施牦牛同期發(fā)情處理時須認(rèn)真選擇母牦牛，對于那些老弱、體質(zhì)差和有生殖器官疾病的母牦牛，要嚴(yán)格進(jìn)行淘汰，否則即浪費藥品，又影響生產(chǎn)。本次試驗所選的母牦牛都進(jìn)行嚴(yán)格的挑選，并經(jīng)過5個月的補飼，同期發(fā)情在7～8月份進(jìn)行，有利于開展人工授精。

[1] 張容昶.中國的牦牛[M].蘭州：甘肅科學(xué)技術(shù)出版社，1989：194-214.

[2] 李保明，南交加，貢保當(dāng)知，邱玉良，李海云，樊江峰.牦牛人工授精四字決[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2016,32(9):63.

[3] 陳世彪，許生成，張君.誘導(dǎo)乏情母牦牛發(fā)情效果的方案探索[J].2014.46(10):54-55.

[5] 何世明，馮吉安，余忠華，王蓉芳，顧飛，吳賢智，王天富.等.誘導(dǎo)牦牛同期發(fā)情的幾種處理方法研究[J].草業(yè)與畜牧，2008，6(15):25-27.

Study on Different Combinations of Reproductive Hormones Inducing the Yak Synchronization Estrus

WANG Wen-biao1,GUO Shu-zhen1*,Cairangnaori1,LI Bao-ming1,ZHAO Guang-ping1,MOU Yong-juan1,MA Deng-lu1,YANG Shu-meng1,YANG Zhen2*,SONG Wen1,WANG Jie-feng3,FAN Jiang-feng4

(1.LivestockWorkstationofGannancounty,HezuoCity,Gansu747000;2.LivestockWorkstationofGannaHezuo,Gansu747000; 3.LivestockWorkstationofXiaheCountyXiahe,Gansu747100; 4.GansuAgriculturalUniversityLanzhou,Gansu, 730000)

The aim of this study was to explored the effects of GnRH+PG+GnRH and PG+PG+PMSG ininducing the Yaksynchronous estrus.The female yaks from cattle farming cooperatives was chose as test cattle.GnRH+PG+GnRH and PG+PG+PMSG methods were used for the synchronous estrus of female yak without baby and female yak with baby,and the result showed that the rate of estrus were 92%,90%,95% and 93%,the rate of pregnancy were 76%,70%,70% and 67%,respectively (P>0.05).The results indicated that rate of estrus of yak treated with PG+PG+PMSGwas higher than GnRH+PG+GnRH,but the pregnancy rate of yak treated with GnRH+PG+GnRH was higher than PG+PG+PMSG.And the result demonstrated that the effect of hypothalamus and pituitary hormone regulation of reproductive axis is superior todirect regulation effect of the ovary.

yak;induce;synchronous estrus

7-02-18

2017-02-28

甘肅省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究與應(yīng)用開發(fā)項目“甘南牦牛繁殖調(diào)控技術(shù)研究與應(yīng)用”。

王文飆(1966-)，男，高級獸醫(yī)師,主要從事畜牧推廣工作和研究。

*通訊作者：郭淑珍(1965-)，女，藏族，推廣研究員，主要從事畜牧科研推廣。

S814

A

1001-9111(2017)03-0017-04