郭坤元　王華　張宇　穆森　何美軍

摘要：本研究用聯(lián)苯胺一過氧化氫法測定了野葛花柱頭可授性，結(jié)果表明，野葛花柱頭在將要開放時已具備一定可授性，在開花3h時達(dá)到最大值，之后開始下降，在2個月花期期間柱頭可授性呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢。另外從葛花中分離得到2個化合物，經(jīng)理化和光譜鑒定分析為鳶尾苷和黃豆黃苷2種異黃酮類化合物。

關(guān)鍵詞：野葛；柱頭可授性；化學(xué)成分

野葛是我國傳統(tǒng)的大宗中藥材，富含淀粉及異黃酮類物質(zhì)，其中淀粉具有可食用性，異黃酮類物質(zhì)具有擴(kuò)張冠狀動脈，保護(hù)肝功能等作用，具有良好的食用和藥用價值。本研究試圖從野葛花柱頭的可授性，花粉的儲藏條件入手，對野葛花化學(xué)成分進(jìn)行測定，了解野葛花的一些生理理化特性，以期為野葛后期的有性繁育，雜交育種和產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供研究基礎(chǔ)。

1材料和方法

1.1材料

采用華中藥用植物園基地里收集的野葛為試驗(yàn)材料，選擇盛花期間且待開花苞多的植株藤條帶回實(shí)驗(yàn)室，作為實(shí)驗(yàn)材料備用。

1.2方法

1.2.1柱頭可授性檢測。采用聯(lián)苯胺-過氧化氫法檢測柱頭可授性。在盛花期間，每天中午12點(diǎn)采開花后不同天數(shù)的花朵，將柱頭浸入含有聯(lián)苯胺一過氧化氫反應(yīng)液中，若柱頭具可授性，則柱頭周圍的反應(yīng)液呈現(xiàn)藍(lán)色并有大量氣泡出現(xiàn)，重復(fù)3次。

1.2.2化學(xué)成分的提取與分離。具體步驟參考。將干燥的葛花用95%乙醇回流提取2次得到乙醇提取物，然后將乙醇提取物用乙酸乙酯反復(fù)萃取濃縮得到乙酸乙酯部分浸膏，所得浸膏用少量乙酸乙酯溶解，加入柱層析硅膠拌勻裝柱，用不同濃度的乙醇梯度洗脫逐份收集，放置析出結(jié)晶以備檢測。

2結(jié)果和分析

2.1柱頭可授性檢測結(jié)果

分別對葛花盛花期的1天和整個花期的柱頭可授性進(jìn)行了測定。從圖1A中可以看出，盛花期的野葛花在將要開放時柱頭就已具有過氧化物酶活性，也即柱頭已具備一定的可授性。在花苞開放的2h內(nèi)，柱頭過氧化物酶活性逐漸增加且增長相對緩慢。開花2h后，過氧化物酶的活性明顯增強(qiáng)，在開花3h時達(dá)到最大值，也即柱頭可授性達(dá)當(dāng)天最高值，開花3h后柱頭可授性開始下降，到開花8h時柱頭的可授性降至開花2h左右的水平。另外從圖1B中可以看出，在花期的前15d時，柱頭的可授性逐漸增加且在第15d后達(dá)到最大值，在15～40d時，柱頭的可授性保持在較高水平，在40d后，柱頭的可授性開始逐漸下降。

2.2葛花化學(xué)成分的鑒定

3討論

柱頭可授期是花朵成熟過程中的一個重要時期，它能在很大程度上影響傳粉的成功率。受時間、年齡以及柱頭分泌物等因素影響，不同的植物有著不同的柱頭可授期。在本研究中，葛花柱頭在將要開放的時候就已具有一定可授性，在開花3h時達(dá)到最大值，推測這一變化應(yīng)與開花時1d的日照變化以及植物生物鐘的調(diào)節(jié)有關(guān)，另外在2個月的花期研究中發(fā)現(xiàn)，葛花的可授性先增加后降低，分析這也是植物適應(yīng)自然，是植物自身生物學(xué)特性的一種表現(xiàn)。另外對葛花化學(xué)成分的研究過程中，鑒定出了鳶尾苷和黃豆黃苷2種在醫(yī)藥中有重要作用的異黃酮類化合物，這也進(jìn)一步表明深入研究野葛的化學(xué)成分，明確其生理理化特性具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

（收稿：2016-08-30）endprint