閆勇杰 王麗紅

摘要 通過對南北2種青龍衣化學成分及抗菌、抗腫瘤、鎮(zhèn)痛等藥理作用的研究進展綜述，發(fā)掘其巨大的潛在藥用價值，為胡桃屬植物資源綜合開發(fā)利用提供廣闊的前景。

關鍵詞 青龍衣；山核桃；核桃楸；化學成分；藥理作用

Research Progress on Chemical Constituents and Pharmacological Effects of Two Kinds of Juglans Green Peel

YAN Yong-jie，WANG Li-hong* （School of Pharmacy，Jiamusi University，Jiamusi，Heilongjang 154007）

Abstract This paper summarized chemical constituents and pharmacological effects（such as anti-bacterial，anti-tumor and analgesic effects and so on） of two kinds of Juglans green peel to explore its huge potential medicinal value，and provided broad prospects for the comprehensive development and utilization of walnut plant resources.

Key words Juglans green peel；Juglans cathayensis；Juglans mandshurica；Chemical constituents；Pharmacological effects

山核桃（Juglans cathayensis），又名野核桃、小核桃，主要產于浙江、安徽、甘肅、河北等地，生長在海拔800～2 800 m的雜木林中。核桃楸（Juglans mandshurica），又名胡桃楸，分布于東北三省等地，多生于濕潤、排水良好、土質肥厚的山坡或溝谷兩側[1]。兩者均為胡桃科（Juglandaceae）胡桃屬（Juglans）植物。青龍衣也就是核桃楸皮，即未成熟的山核桃青皮剝制曬干而成，這2種植物的果實青皮均作為青龍衣入藥。味苦、性寒，具有清熱、解毒、止痢、明目等功效[2]，治泄瀉、痢疾、白帶、目赤等。青龍衣作為一味傳統(tǒng)中藥，其開發(fā)利用早就被人重視。《浙江天目山藥植志》記載道：山核桃的青皮搗碎取汁可擦治皮膚癬癥，其種仁具有定喘清肺、滋潤溫腎的功效，黃酒送服可治腰痛[3]。近年來，國內外學者對其化學成分、藥理活性和臨床應用等方面做了大量研究，表明青龍衣具有抗菌消炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤等作用，特別是抗腫瘤作用顯著，具有極其寶貴的藥用價值。經查閱文獻已知國內有的學者將這2種植物及其拉丁名混淆，筆者現(xiàn)將近年來對這2種青龍衣化學成分的研究進展、藥理作用及應用綜述如下。

1 化學成分

山核桃和核桃楸的青龍衣主要含有多糖類、醌類、黃酮類以及大量鞣質等化學成分，萘醌及其衍生物已成為各地學者的研究重點。1973年Ohta等[4]從野核桃新鮮青皮中分離提純出5，8-二羥基-l，4萘醌，得出青龍衣中萘醌的存在。Min等[5]通過對胡桃楸未成熟青皮進行提取研究，分離得到了4種黃酮醇、2種三羥基苯甲酰沒食子酸葡萄糖苷和3種萘基吡喃葡萄糖苷，并鑒定了它們的結構。杜旭等[6]將山核桃嫩皮80 ℃烘干后利用馬福爐灰化得到多種無機鹽，原子吸收分光光度計測得：鉀56.8%，鈣21.4 %，鎂5.5%，鐵5.1%，鋅2.27%，鋰1.98%，銅0.25%。Lee等[7]從胡桃楸的青果皮中分離得到胃毒活性物質，為進一步研究其藥理活性提供了有力的依據。周靖等[8]采用氫化物法和火焰原子吸收法對核桃楸青果皮中金屬元素進行測定，鐵、鉀、錳、鋅、鎂、銅、鈣和砷都有測得，且鉀含量最高，為41 157.96 μg/g。孫墨瓏等[9]分別用超聲提取法、索氏提取法以及常規(guī)加熱提取法提取分離出胡桃醌，并用高效液相色譜儀測定其含量，結果得出超聲提取法純化出該青皮中胡桃醌含量最多，常規(guī)提取法其次，索氏提取法較低。季宇彬等[10]對青龍衣多糖進行提取、分離，經純化后可得多種單糖，如葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、果糖、半乳糖等。李秀鳳[11]運用氣相色譜與質譜聯(lián)用法測出野核桃青皮中脂肪酸的成分及含量，其中不飽和脂肪酸含有2.93%的十六烯酸、1.45%的9-十八碳烯酸、14.36%的9，12-十八碳二烯酸、3.21%的9，12，15-十八碳三烯酸。高小寧等[12]研究了山核桃青皮乙醇提取的氯仿萃取部位，鑒定得出胡桃醌、β-谷甾醇等5個化合物。

青龍衣中的胡桃醌（Juglone，5-hydroxy-1，4-naphthoquinone）為其抑制癌癥的主要成分。劉薇等[13]研究發(fā)現(xiàn)，青龍衣三氯甲烷提取物具有一定的抗腫瘤作用。陳向明[14]對山核桃青皮做了大量研究，通過正交試驗優(yōu)選出最佳提取溶劑和方法是：以70%乙醇為溶劑的萃取法，乙醇與青皮的料液比為10∶1，在60 ℃水浴加熱的條件下回流提取4 h，總醌提取量可達0.84%；并得出色譜柱層析法為最佳的分離方法，以硅膠為填柱材料，按硅膠材料與浸提樣液的配比為1∶3，得醌類的回收率高達88.71%，純度可達86.08%。

目前關于青龍衣研究最多，藥用價值最高的是醌類化合物及其衍生物，如α-和β-氫化胡桃醌、胡桃醌、3，3-雙胡桃醌及3，6-雙胡桃醌等；其次是黃酮類化合物，如胡桃苷、山奈酚、槲皮素、球松素、柚皮素等[15-16]。吳德玲等[17]對山核桃外蒲殼進行研究，從中共分離鑒定出大黃素甲醚、4，8-二羥基-1-四氫萘酮、球松素等5個化合物，其中4，8-二羥基-1-四氫萘酮和大黃素甲醚是首次從該植物青皮中分離得出。青龍衣中化學成分結構式如圖1所示。

2 藥理作用

2.1 抗菌作用

青龍衣提取物表現(xiàn)出以劑量依賴的方式具有廣譜抗菌活性，試驗表明因菌種不同，抑菌測試反應也不相同。20世紀90年代初，楊志等[18]就用胡桃楸內皮水煎劑做了相應的抑菌試驗，結果發(fā)現(xiàn)，該水煎劑對水弧桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌OX10、1485均有較強的抗菌作用。聞平等[19]將山核桃乙醇提取物應用到煙曲霉菌、新生隱球菌、白色念珠菌中，并與臨床上常用的抗真菌藥物進行對比，結果顯示，其對致病性真菌具有較強的抑制和殺死作用，其作用強度與FCZ、ICZ相當，但不如AMB和5-FC見效。Oliveira等[20]研究表明，青龍衣水提物對金黃色葡萄球菌以及許多革蘭陽性菌、陰性菌均有較強的抑制作用。林君陽[21]采用生長速率法測定了青龍衣甲醇提取物4個有機萃取相的抑菌作用，結果表明，α-谷甾醇、喬松酮、5-羥基-2-甲氧基-1，4-萘醌和喬松素等8個化合物對玉米人斑病菌、水稻稻瘟病菌孢子萌發(fā)的抑制率均在90%以上。王艷梅[22]通過用青龍衣95%乙醇提取物做抑菌試驗，結果表明，抑菌活性成分溶解在氯仿和石油醚萃取相中。在臨床方面，千學技等[23]將山核桃嫩皮與具有抑菌、清熱、收斂作用的兒茶配伍制成復方山核桃酊，治療了困擾患者近一年的頑固性陰囊濕疹，取得了令人非常滿意的效果。

2.2 抗腫瘤作用

青龍衣在民間用于抑制及治療各種癌癥已經取得不錯的效果。青龍衣中多種組分均表現(xiàn)出抗腫瘤的藥效作用，許多單體成分也表現(xiàn)出較強的抗腫瘤增殖作用。從作用機理的角度看，青龍衣抗腫瘤增殖作用總是與抗氧化、免疫調節(jié)、毒性作用等相聯(lián)系，而主要得益于其中的胡桃醌（5-羥基-1，4-萘醌）等成分，胡桃醌已經成為抗腫瘤作用研究的熱點。許紹惠等[24-25]通過研究核桃揪青皮的有效成分，并從其中提取分離出胡桃醌及衍生物胡桃醌二聚體的3種結晶化合物，鑒定出結構且與國際學者的報道一致。抑瘤率也稱抗癌率，是衡量一種藥物抗腫瘤作用的重要指標之一，是篩選抗腫瘤藥物的主要依據。吳德玲等[26]從野核桃外蒲殼中分離純化出5 個單體化合物，并針對肝癌HepG2 細胞采用MTT法進行了活性試驗，結果表明，4，8-二羥基-1-四氫萘酮、喬松酮、大黃酚3個化合物對肝癌HepG2 細胞均有很強的抑制和殺傷作用，最高抑制率分別為67%、70%和69%。姜秀梅等[27]將青龍衣乙醇提取物和人乳腺癌細胞體外共同培養(yǎng)，當藥物濃度為400 μg/mL時，抑癌率達38.4%；600 μg/mL 時，達 47.9%，試驗表明青龍衣乙醇提取物對乳腺癌細胞有一定抑制作用。王少東等[28]用胡桃楸青果皮水提浸膏對體外肉瘤S180細胞和小鼠肝癌進行試驗，結果顯示，癌細胞的核酸代謝受到抑制，從而被殺死，其作用效果與藥物濃度和作用時間呈正相關性，是一種有前途的抗腫瘤藥物。宋華等[29]通過體外試驗研究發(fā)現(xiàn)，核桃楸葉的乙酸乙酯提取液能抑制乳腺癌細胞（MCF7/ADR）、肺癌細胞（NCIH460）、慢性髓原白血病細胞（K562）這3種癌細胞的增殖，藥物濃度為0.5 mg/L時這3種癌細胞100%死亡，因而確定0.5 mg/L濃度為這3種細胞的最大致死劑量。

李巖等[30]利用胡桃醌對人肺癌細胞A549的生長抑制作用及對細胞周期的影響作為研究機制，并以血清藥理學原理為基礎進行研究，結果發(fā)現(xiàn)，胡桃醌對A549的增殖具有明顯抑制作用，能將這種癌細胞復制阻滯在S期，誘導其凋亡。李生正等[31]應用BSLB法[32]對青龍衣乙酸乙酯提取物進行了相關研究，發(fā)現(xiàn)其提取物LC50值為79.102 3，具有較明顯的抗癌活性。

在我國東三省地區(qū)，民間就有流傳把核桃楸青果皮當茶飲用來治療腫瘤或是減緩癌癥帶來的疼痛。青龍衣的抗腫瘤作用在臨床上亦有許多應用。李中原等[33]在河北省食管賁門癌高發(fā)區(qū)——涉縣，共用核桃楸樹皮對120例食管賁門癌患者進行治療，綜合有效治療率高達53%。高奎濱在二十多年對656例臨床癌癥患者用青核桃和刺五加配伍使用的治療得出，對肺癌、胃癌、食管癌等6種癌癥有效治療率為30.46%，且無其他抗癌藥的毒副作用[34]。

2.3 鎮(zhèn)痛作用

關于青龍衣的鎮(zhèn)痛消炎作用，無機鹽（鉀鹽）可能是鎮(zhèn)痛活性之一，但鉀同時卻是一種致痛物質，因此成為許多學者研究的焦點。杜旭等[35]通過原子吸收分光光度法對青龍衣中鎮(zhèn)痛活性成分進行了分析測定，得出鉀鹽是其鎮(zhèn)痛活性成分，能提高小鼠基礎痛閾，減少扭體次數及熱板反應，其作用機制與提高動物低鈣高鉀條件下痛閾有關。又有學者對青龍衣提取分離、純化得出鉀鹽是青龍衣中主要鎮(zhèn)痛成分[36]。此外，Erdemoglu等[37]通過p-苯醌誘導小鼠腹部疼痛，用以青龍衣的乙醇和水提取物灌胃后根據小鼠腹部抗傷害感受不同的收縮程度得出具有鎮(zhèn)痛和抗炎活性。宛蕾等[38]通過醋酸、熱板傳導致小鼠疼痛后用胡桃青皮乙醇提取液灌胃，得出該青皮對化學刺激及熱傳導引起的小鼠疼痛有顯著的鎮(zhèn)痛效果，且隨劑量的增加，鎮(zhèn)痛效果逐漸增強。

2.4 其他作用

有文獻記載青龍衣水煎劑治療Ⅱ型糖尿病有良好的效果[39]。王宏虬等[40]通過研究胡桃楸青皮的不同提取物對馬鈴薯害蟲的殺傷作用，表明其對蚜蟲的觸殺效果好于對瓢蟲的觸殺效果。何志平[41]研究發(fā)現(xiàn)，不同青龍衣提取物清除自由基能力由弱到強依次為80%乙醇提取物、水提取物、乙酸乙酯提取物，得出青龍衣具有良好的抗氧化功能。

3 結語

綜上所述，山核桃和核桃楸是我國分布最廣泛的樹種之一，青龍衣資源豐富，隨著對青龍衣的研究不斷加深，提取分離的方法不斷得到改進，提取效率也有所提高。進一步對青龍衣抗腫瘤成分的作用機理進行研究，提取其活性成分，大力開發(fā)出一種青龍衣藥物，為癌癥病人的治療尋找一種新的途徑，使青龍衣在臨床上得到更多的應用，有一定的經濟價值和實際意義。這必將為胡桃屬植物的開發(fā)提供更加廣闊的前景，實現(xiàn)青龍衣的綜合利用。

[29] 宋華，包永明，張紅梅，等.核桃楸葉提取液對腫瘤細胞的抑制作用[J].大連輕工業(yè)學院學報，2001，20（2）：109-111.

[30] 李巖，趙劍璞，王燕妮，等.胡桃醌含藥血清體外抗腫瘤實驗研究[J].北京理工大學學報，2013，33（5）：545-550.

[31] 李生正，王云彩，蔣東風，等.BSLB法篩選青龍衣與核桃枝抗腫瘤作用有效部位[ J] .西北藥學雜志，2006，15（3）：114.

[32] MEYER B N，F(xiàn)ERRIGNI N R，PUTNAM J E，et al.Brineshrimp：A convenient general bioassay for active plant constituents[J].Planta Med，1982，45（5）：31-34.

[33] 李中原，高奎濱.“青龍衣”治療食管賁門癌120例臨床觀察[J].中醫(yī)藥信息，1988（3）：31.

[34] 張洪娟，桑樹榮.高奎濱用青龍衣制劑治療腫瘤用藥經驗[J].黑龍江中醫(yī)藥，2000，3（2）：62.

[35] 杜旭，李玉文，倪雁，等.中藥青核桃鎮(zhèn)痛作用研究與展望[J].中國中藥雜志，2000，25（1）：7-10.

[36] 杜旭，王明晶.中藥青龍衣鎮(zhèn)痛作用機理的研究[J].中國中醫(yī)藥科技，1997（3）：155-156.

[37] ERDEMOGLU N，KPELI E，YESILADA E.Anti-inflammatory and antinociceptive activity assessment of plants used as remedy in Turkish folk medicine[J].Journal of ethnopharmacology，2003，89（1）：123-129.

[38] 宛蕾，陳秀芬，杜江.胡桃青皮抗炎及鎮(zhèn)痛作用的研究[J].中藥藥理與臨床，1999，15（2）：29-30.

[39] 梁慧峰.核桃楸的化學成分及利用研究進展[J].北方園藝，2010（16）：219 -221.

[40] 王宏虬，廖?？。畋?，等.核桃青皮提取物對馬鈴薯蚜蟲與瓢蟲的殺蟲活性[J].江蘇農業(yè)科學，2012，40（7）： 112-114.

[41] 何志平.浙江山核桃抗氧化與蛋白質特性研究[D].杭州：浙江大學，2011.