楊建文,林亞平,陳海交,張程程,劉薇薇,劉 麗,劉 密,彭 艷*
(湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南 長(zhǎng)沙 410208)
·針灸推拿·
電針對(duì)糖尿病胃輕癱大鼠胃竇部INS及IR表達(dá)的影響
楊建文,林亞平,陳海交,張程程,劉薇薇,劉 麗,劉 密,彭 艷*
(湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南 長(zhǎng)沙 410208)
目的觀察電針“足三里”等穴對(duì)糖尿病胃輕癱(diabetic gastroparesis,DGP)模型大鼠胰島素及其受體表達(dá)的影響,探討電針調(diào)整血糖、改善DGP胃腸動(dòng)力的可能機(jī)制。方法將50只SD大鼠隨機(jī)分為5組,即空白對(duì)照組、DGP模型對(duì)照組、電針穴位組、電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組,每組10只。造模組按55 mg/kg單次右下腹腔注射2%鏈脲佐菌素 (STZ)聯(lián)合高脂高糖不規(guī)律飲食建立DGP模型,連續(xù)喂養(yǎng)8周,每周用強(qiáng)生穩(wěn)豪倍易型血糖儀及試紙測(cè)量血糖,尿糖試紙測(cè)量尿糖。電針穴位取大鼠“足三里”、“梁門”、“三陰交”,電針?lè)茄ńM取大鼠“足三里”、“梁門”、“三陰交”的穴位對(duì)照點(diǎn),胃復(fù)安對(duì)照組予1.7%胃復(fù)安藥液 (1 ml/100 g)灌胃。治療結(jié)束后,以酚紅為標(biāo)志物,觀察各組大鼠胃排空率及小腸移行率,以ELISA法檢測(cè)胃竇部胰島素 (INS)及胰島素受體 (IR)的表達(dá)。結(jié)果與空白對(duì)照組比較,模型組血糖水平、癥狀積分明顯升高,胃排空率、小腸移行率、胃竇部INS、IR含量明顯降低 (P<0.01);與模型組比較,電針穴位組血糖水平及癥狀積分明顯降低,胃排空率及小腸移行率、胃竇組織INS及IR表達(dá)升高 (P<0.05,P<0.01),與電針穴位組比較,電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組癥狀積分升高、胃竇部INS、IR含量明顯減少(P<0.05,P<0.01)。結(jié)論電針能降低DGP大鼠血糖,促進(jìn)DGP大鼠胃腸動(dòng)力,其作用機(jī)制可能與增加胃竇部INS及IR含量有關(guān)。
電針;糖尿病胃輕癱;胃排空率;胰島素;胰島素受體
糖尿病胃輕癱(diabetic gastroparesis,DGP)是糖尿病的常見(jiàn)并發(fā)癥之一[1],以胃排空延緩為主要病理特征[2]。DGP發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,近年來(lái)胰島素、干細(xì)胞因子、Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of cajal,ICC)在糖尿病胃輕癱的發(fā)病機(jī)制中的作用逐漸得到重視[3-5]。胰島素是于1921年首次發(fā)現(xiàn),主要有胰島β細(xì)胞分泌,經(jīng)血液循環(huán)運(yùn)輸至靶器官,主要分布于肝臟、肌肉等組織[6]。胰島素受體(insulin receptor,IR)是一類跨膜糖蛋白,廣泛分布于多種組織細(xì)胞表面。研究發(fā)現(xiàn)胰島素通過(guò)與其受體結(jié)合能保護(hù)ICC細(xì)胞,從而調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)[7]。近年來(lái),開(kāi)展不少針灸治療DGP的臨床實(shí)驗(yàn),并取得良好療效[8-10]。但從胰島素細(xì)胞水平角度探討電針治療DGP的相關(guān)研究鮮有報(bào)道。因此,本實(shí)驗(yàn)建立DGP大鼠模型,觀察電針“足三里”對(duì)DGP模型大鼠血糖、胃排空率、胃竇部胰島素(insulin,INS)及IR表達(dá)的影響,探討電針調(diào)整DGP血糖,調(diào)節(jié)胃腸動(dòng)力的可能機(jī)制。
1.1 動(dòng)物與分組
SD大鼠,SPF級(jí),雌雄各半,體質(zhì)量 180~220 g,共50只,購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司,動(dòng)物合格證號(hào):43004700017604。所有大鼠均經(jīng)檢測(cè)后,均血糖正常、尿糖陰性可納入實(shí)驗(yàn)。適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后,隨機(jī)挑選10只為空白對(duì)照組,其余大鼠造模。均飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房?jī)?nèi),溫度25℃,相對(duì)濕度40%~60%,自然采光。實(shí)驗(yàn)期間對(duì)動(dòng)物的操作和處置符合科學(xué)技術(shù)部頒布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》中相關(guān)條文規(guī)定。
1.2 主要試劑與儀器
鏈脲佐菌素(美國(guó)Sigma公司);胃復(fù)安(山西云鵬制藥有限公司);酚紅(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所);NaOH、三氯乙酸、水合氯醛、檸檬酸鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);檸檬酸(天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司);血糖儀及血糖試紙(美國(guó)強(qiáng)生公司 穩(wěn)豪倍易型);尿糖試紙(廣州市花都高爾寶生物技術(shù)有限公司);電針儀(華佗牌SDZ-V型);華佗牌針灸針(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司生產(chǎn));臺(tái)式高速離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀貝克儀器儀表公司 TG16-WS);超低溫冰箱 (海爾 DW-86L626);大鼠INS、InR酶聯(lián)免疫試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。
1.3 造模方法及評(píng)定方法
根據(jù)參考文獻(xiàn)[11],實(shí)驗(yàn)前所有造模大鼠禁食12 h,禁水 2 h,按55 mg/kg體質(zhì)量劑量將 STZ[臨用前用0.1 mmol/L(pH4.2,4℃)檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液配成2%濃度]于右下腹腔內(nèi)單次注射,72 h后取尾靜脈血測(cè)即刻血糖,即刻血糖≥16.7 mmol/L者作為糖尿病大鼠,配合高脂高糖飼料(普通飼料、熟豬油、蔗糖、奶粉、雞蛋之比為 58∶15∶20∶5∶2)不規(guī)律喂養(yǎng)8周,即單日上午和雙日下午進(jìn)食的方法??瞻捉M予單次右下腹腔注射等容量的0.1 mmol/L(pH 4.2,4℃)檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液,普通飼料規(guī)律喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)期間,每周測(cè)量血糖、尿糖一次,觀察大鼠的一般情況,并評(píng)分。血糖<16.7 mmol/L,尿糖陰性者剔除實(shí)驗(yàn)。DGP模型成功標(biāo)志[12]:血糖≥16.7 mmol/L,尿糖陽(yáng)性者;造模組大鼠精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、皮毛色澤、大便性狀與空白對(duì)照組有明顯差異;造模組胃排空率及小腸移行率與空白對(duì)照組有明顯差異。將造模成功的大鼠再次隨機(jī)分為模型組、電針穴位組、電針?lè)茄ńM和胃復(fù)安對(duì)照組,每組10只。
1.4 各組干預(yù)方法
穴位定位是參考李忠仁主編《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》“動(dòng)物針灸穴位圖譜”[13],并結(jié)合解剖學(xué)方法及擬人對(duì)照法進(jìn)行大鼠穴位定位?!白闳铩保合リP(guān)節(jié)后外側(cè),腓骨小頭下約5 mm處;“梁門”:以胸骨柄上緣至恥骨聯(lián)合連線的上3/4與下1/4交界處為肚臍,胸劍聯(lián)合到肚臍連線中點(diǎn)水平線至鎖骨中線相交處;“三陰交”:后肢內(nèi)踝尖直上10 mm。穴位對(duì)照點(diǎn)定位:“足三里”的對(duì)照點(diǎn)設(shè)在“足三里”水平外側(cè)5 mm;“梁門”的對(duì)照點(diǎn)設(shè)在“梁門”水平外側(cè)5 mm;“三陰交”的對(duì)照點(diǎn)設(shè)在“三陰交”水平內(nèi)側(cè)5 mm。
空白對(duì)照組、DGP模型組:將大鼠仰臥位捆綁于鼠板20 min,并予生理鹽水灌胃(1 mL/100 g),連續(xù)15 d。
電針穴位組:取同側(cè)足三里、梁門、三陰交穴,用0.30 mm×13 mm的華佗牌針灸針直刺3 mm,再循經(jīng)分別于足三里、梁門、三陰交直下2 mm取一點(diǎn)作為電針連接點(diǎn) (附點(diǎn)),針刺深度2 mm。將華佗牌SDZ-V型電針治療儀的三組輸出線分別連接在3個(gè)穴位及其附點(diǎn)的針灸針上,穴位接負(fù)極,附點(diǎn)接正極,采用疏密波(疏波為10HZ,密波為50HZ,疏波時(shí)間為10 s,密波時(shí)間為15 s);強(qiáng)度為2 mA,電針時(shí)間20 min,每天1次,連續(xù)15 d,左右兩側(cè)穴位交替使用。電針結(jié)束后給予生理鹽水灌胃 (1 mL/100 g)
電針?lè)茄ńM:取同側(cè)足三里、梁門、三陰交穴的對(duì)照點(diǎn),用0.30 mm×13 mm的華佗牌針灸針直刺3 mm,再分別于對(duì)照點(diǎn)直下2 mm取一點(diǎn)作為電針連接點(diǎn)(附點(diǎn)),針刺深度2 mm,電針操作同電針穴位組,每天1次,連續(xù)15 d,左右兩側(cè)穴位交替使用。電針結(jié)束后給予生理鹽水灌胃(1 mL/100 g)。
胃復(fù)安對(duì)照組:將大鼠仰臥位固定于鼠板上20 min,予1.7%胃復(fù)安藥液 (1 mL/100 g),1次/d灌胃,連續(xù)給藥15 d。
1.5 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法
1.5.1 一般情況 每周觀察并記錄大鼠精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、皮毛色澤、糞便性狀,并用自擬一般情況評(píng)分表評(píng)分,計(jì)算各組大鼠癥狀積分。見(jiàn)表1。
表1 大鼠一般狀況評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
1.5.2 血糖及尿糖測(cè)量方法 剪尾采集尾靜脈血,每周以強(qiáng)生穩(wěn)豪倍易型血糖儀和血糖試紙測(cè)血糖并記錄;尿液收集以壓迫大鼠腹部促使膀胱排空,收集尿液,用尿糖試紙測(cè)量其尿糖值。
1.5.3 胃排空率測(cè)定方法[14-15]治療結(jié)束后,將所有大鼠禁食24 h,禁水2 h。每只大鼠給予50 mg/dL酚紅溶液2 mL灌胃,20 min后處死,剖腹,結(jié)扎賁門和幽門,取出整個(gè)鼠胃,沿胃大彎切開(kāi),以蒸餾水沖洗胃內(nèi)容物,定容為20 mL。再加入0.5 mol/L Na0H 20 mL攪拌混勻,靜置1 h后取5 mL上清液,加入20%三氯乙酸0.5 mL去蛋白,以3500 r/min(離心半徑0.1 m)離心10 min,取上清液用分光光度計(jì)在560 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值(OD)。另取酚紅溶液2 mL,先后加入蒸餾水18 mL、0.5 mol/L Na0H 20 mL、20%三氯乙酸 4 mL攪拌混勻,測(cè)定吸光度值。大鼠胃排空率=(1-實(shí)測(cè)酚紅吸光度/標(biāo)準(zhǔn)酚紅吸光度)×100%。
1.5.4 小腸移行率測(cè)定方法[14-15]打開(kāi)大鼠腹腔后迅速取出小腸,輕輕剝離后直鋪于冰面上,先用肉眼觀察小腸被酚紅染成紅色的末端,用眼科剪在該末端剪一小口,在此處滴少量0.5 mol/L Na0H溶液,若變成紫色則是酚紅所到達(dá)的部位。再在此紫色區(qū)域各滴少量0.5 mol/L Na0H溶液以確定酚紅所到達(dá)的實(shí)際部位。用直尺測(cè)量幽門到回盲瓣全長(zhǎng)(A)及幽門至酚紅染成紅色末端距離(a)。小腸移行率為幽門至酚紅染成紅色末端距離與幽門到回盲瓣全長(zhǎng)的百分率為小腸移行率。即小腸移行率=a/A×100%。
1.5.5 胃竇INS及IR檢測(cè) 大鼠麻醉處死后,迅速剪取胃竇部組織一塊,保存至-80℃冰箱,待測(cè)。按照試劑盒說(shuō)明依次操作采用ELISA法檢測(cè)。
1.6 統(tǒng)計(jì)方法
2.1 各組大鼠癥狀積分情況比較
與造模前比較,造模后模型組、電針穴位組、電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組大鼠的精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、皮毛色澤、大便性狀均出現(xiàn)明顯改變,與正常對(duì)照組比較有顯著差異(P<0.01)。連續(xù)干預(yù)15 d后,電針穴位組大鼠精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、皮毛色澤、大便性狀較前有明顯改善(P<0.01),電針穴位組大鼠精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、皮毛色澤、大便性狀較模型組、電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安組有明顯改善 (P<0.01,P<0.05)。 見(jiàn)表2。*
表2 各組大鼠癥狀積分情況比較 (分,±s,n=10)
表2 各組大鼠癥狀積分情況比較 (分,±s,n=10)
注:①組內(nèi)比較:與造模前比較△△P<0.01,與造模后比較☆☆P<0.01;②組間比較:與空白對(duì)照組比較▲P<0.01,與模型組比較◆◆P<0.01,與電針?lè)茄ńM比較★P<0.05,與胃復(fù)安組比較*P<0.05。
★
2.2 各組大鼠血糖水平比較
造模后模型組、電針穴位組、電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組血糖水平較前明顯升高,與空白對(duì)照組亦有顯著差異(P<0.01)。治療15天后,電針穴位組血糖水平較造模后下降,且電針穴位組血糖水平較治療后模型組下降(P<0.05),見(jiàn)表3。
表3 各組大鼠血糖水平比較 (mmol/Ls,n=10)
表3 各組大鼠血糖水平比較 (mmol/Ls,n=10)
注:①組內(nèi)比較:與造模前比較△△P<0.01;與造模后比較☆P<0.05;②組間比較:與空白對(duì)照組比較●●P<0.01,與模型組比較▲P<0.05。
組別 造模前 造模后 治療后空白對(duì)照組 6.09±0.99 5.29±0.50 5.61±1.24模型組 6.69±1.30 28.93±1.75△△●● 25.72±3.33●●電針穴位組 6.37±0.55 27.67±2.80△△●● 22.62±4.09☆●●▲電針?lè)茄ńM 6.32±1.01 27.79±2.52△△●● 24.37±3.55●●胃復(fù)安對(duì)照組 6.84±0.93 26.45±2.68△△●● 23.21±3.16●●F0.93 43.25 66.46P0.46 0.00 0.00
2.3 各組大鼠胃排空率與小腸推進(jìn)率比較
與空白對(duì)照組比較,模型組大鼠胃排空率、小腸移行率均明顯降低 (P<0.01),說(shuō)明造模后DGP模型大鼠胃腸排空時(shí)間延長(zhǎng),結(jié)合癥狀積分和血糖,說(shuō)明造模成功;與模型組比較,治療后電針穴位組胃排空率、小腸移行率升高 (P<0.05,P<0.01),說(shuō)明電針能改善改善DGP大鼠胃排空,促進(jìn)胃腸道運(yùn)動(dòng)。見(jiàn)表4。
表4 各組大鼠治療后胃排空率、小腸推進(jìn)率的比較 (%,±s)
表4 各組大鼠治療后胃排空率、小腸推進(jìn)率的比較 (%,±s)
注:與空白組比較●●P<0.01;與模型組比較▲▲P<0.01,▲P<0.05。
組別 n 胃排空率 小腸推進(jìn)率空白對(duì)照組 10 70.14±15.50 66.71±12.38模型組 10 47.10±14.46●● 37.53±7.25●●電針穴位組 10 64.63±18.28▲ 52.65±9.84●●▲▲電針?lè)茄ńM 10 58.65±15.64 48.84±6.41●●胃復(fù)安對(duì)照組 10 63.00±12.15 52.41±11.09●●F3.18 11.67P0.22 0.00
2.4 各組大鼠胃竇組織INS、IR含量比較
與空白對(duì)照組比較,模型組為胃竇組織INS、IR含量明顯下降(P<0.01);與模型組比較,電針穴位組胃竇組織INS、IR含量顯著升高,電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組胃竇組織INS含量明顯增加 (P<0.05,P<0.01);與電針穴位組比較,電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組胃竇組織 INS、IR 含量明顯減少 (P<0.05,P<0.01)。 見(jiàn)表5。
表5 各組大鼠胃竇組織INS、IR含量比較 (mIU/L±s)
表5 各組大鼠胃竇組織INS、IR含量比較 (mIU/L±s)
注:與空白組比較●●P<0.01,與模型組比較▲P<0.05,▲▲P<0.01,與電針?lè)茄ńM比較★P<0.05,與胃復(fù)安組比較◆◆P<0.01。
組別 n INS IR空白對(duì)照組 10 12.08±1.65 5.98±1.10模型組 10 9.35±2.27●● 4.92±0.73●●電針穴位組 10 13.12±1.19▲▲★◆◆ 6.41±0.62▲▲★◆◆電針?lè)茄ńM 10 11.47±1.34▲▲ 5.51±0.91胃復(fù)安對(duì)照組 10 10.96±1.89▲ 5.54±0.83FP6.66 4.28 0.00 0.00
中醫(yī)古籍中沒(méi)有明確的“糖尿病胃輕癱”病名,根據(jù)病史和臨床表現(xiàn),多認(rèn)為糖尿病胃輕癱是以消渴病為基礎(chǔ)的脾胃病,屬于中醫(yī)學(xué)的 “痞滿”、“反胃”、“嘔吐”等范疇。針灸治療DGP立足于辨證論治,從整體出發(fā),健脾和胃、疏經(jīng)通絡(luò)、調(diào)理臟腑,作用于DGP發(fā)病的多個(gè)環(huán)節(jié),標(biāo)本兼治,從多層次、多角度發(fā)揮作用?!白闳铩睘槲附?jīng)之合穴,又為胃經(jīng)之下合穴,具有理氣和胃之效,大量文獻(xiàn)研究表明電針足三里能夠提高胃排空速度[16-17]。梁門穴具有和胃理氣,健脾和中的功效,有研究證實(shí)“梁門穴”對(duì)胃粘膜有保護(hù)作用[18-19]?!叭幗弧睘樽闳幗?jīng)之交會(huì)穴,研究發(fā)現(xiàn)電針“三陰交”等穴能改善胃運(yùn)動(dòng),其作用主要通過(guò)調(diào)節(jié)胃腸激素實(shí)現(xiàn)[20-21]。諸穴配伍具有補(bǔ)益脾胃、和胃降逆、理氣活血、疏通經(jīng)絡(luò)的作用。
ICC是胃腸道中一類特殊間質(zhì)細(xì)胞,為胃腸慢波電位的起搏者和傳播者,主要參與胃腸基本電節(jié)律的調(diào)控和神經(jīng)遞質(zhì)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。有研究發(fā)現(xiàn)DGP患者及動(dòng)物模型均存在ICC數(shù)目減少、結(jié)構(gòu)破壞、且與神經(jīng)末梢及平滑肌連接減少。ICC異??赡苁翘悄虿∥改c道功能紊亂的機(jī)制之一[22]。INS是由胰臟內(nèi)的胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素,主要分布于肝臟、肌肉、脂肪等組織,其最明顯的作用是促進(jìn)合成代謝[6]。IR是一類具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜糖蛋白,由α、β各兩個(gè)亞單位組成,廣泛分布于各型細(xì)胞表面如胃平滑肌細(xì)胞,與其配體INS結(jié)合后使其自身磷酸化,激活胰島素受體底物(IRS),介導(dǎo)細(xì)胞的代謝、生長(zhǎng)、分化、凋亡等[23]。既往研究認(rèn)為高血糖是糖尿病胃輕癱胃腸道ICC病變的重要機(jī)制,胰島素通過(guò)控制血糖對(duì)ICC起保護(hù)作用。但有研究發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠胃腸道ICC網(wǎng)絡(luò)破壞與INS/IR信號(hào)減弱有關(guān),而非高血糖所致。并做進(jìn)一步研究推測(cè)胰島素可能直接作用于胃平滑肌細(xì)胞相應(yīng)受體,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、抑制其凋亡,保護(hù)胃平滑肌細(xì)胞,從而促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)[7,24]。
有實(shí)驗(yàn)研究表明糖尿病合并胃腸動(dòng)力障礙與胃腸道INS、IR含量減少有關(guān)[24]。本研究結(jié)果提示,胃腸運(yùn)動(dòng)功能低下與胃竇部INS及IR含量下降有關(guān),這與以往研究一致。并進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn),電針穴位組大鼠癥狀積分、血糖水平均較模型組下降,胃排空率及小腸移行率升高,表明電針“足三里”等穴能促進(jìn)DGP模型大鼠胃腸運(yùn)動(dòng),改善DGP癥狀,并且可能通過(guò)促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)從而調(diào)節(jié)大鼠血糖水平。同時(shí),本研究結(jié)果顯示電針穴位組大鼠胃竇部INS、IR含量較模型組均有明顯升高,提示電針“足三里”等穴改善胃腸動(dòng)力可能通過(guò)增加胃竇部INS、IR含量有關(guān)。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每周觀察并記錄大鼠精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、皮毛色澤、糞便性狀,并用自擬一般情況評(píng)分表評(píng)分,每組數(shù)據(jù)采集時(shí)間相同,胃竇組織采集的時(shí)間點(diǎn)亦相同,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,電針穴位組癥狀積分較電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組明顯降低,而電針穴位組胃竇部INS、IR含量較電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組明顯升高(P<0.05,P<0.01),表明電針穴位組改善DGP癥狀的效應(yīng)明顯優(yōu)于電針?lè)茄ńM、胃復(fù)安對(duì)照組,可能與電針增加胃竇部INS、IR含量,促進(jìn)胃排空有關(guān)。而電針?lè)茄ńM癥狀積分、胃竇部INS及IR含量與胃復(fù)安對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,電針“足三里”等穴能改善DGP癥狀,促進(jìn)胃腸功能,調(diào)節(jié)血糖水平,可能與電針增加胃竇部INS、IR含量有關(guān),這一過(guò)程涉及的機(jī)制十分復(fù)雜,有待后續(xù)做進(jìn)一步研究。
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(本文編輯 匡靜之)
Effects of Electroacupuncture on the Expression of INS and IR in Gastric Antrum of Diabetic Gastroparesis Rats
YANG Jianwen,LIN Yaping,CHEN Haijiao,ZHANG Chengcheng,LIU Weiwei,LIU Li,LIU Mi,PENG Yan*
(Hunan University of Chinese Medicine,Changsha,Hunan 410208,China)
ObjectiveTo observe the effects of electroacupuncture (EA)stimulation at"Zusanli"etc.on level of insulin(INS)and insulin-like receptor(IR)in diabetic gastroparesis(DGP)rats,so as to investigate its mechanism underlying adjusting blood glucose level and improving gastrointestinal motility.MethodsFifty Sprague-Dawley(SD)rats were randomly divided into five groups:black control group,DGP model group,EA acupoint group,EA non-acupoint group,metocloppramide group,10 rats in each group.The DGP models were established by intraperitoneal injection of 2%concentration of streptozotocin(STZ,55 mg/kg)and by feeding the ratswith high fat-sugarforage forirregularly 8 weeks.Blood glucose ofallrats were determined by blood glucose meters and test strips produced by American Johnson company and its urine sugar by tes-tape for every week.The EA was performed to"Zusanli","Liangmen","Sanyingjiao"and non-acupoints.The metocloppramide group were received 1.7%concentration of metocloppramide (1 mL/100 g).After treatment,with 50 mg/dL phenol red solution as maker,the gastric empting rates (GER)were identified by its absorbance values,and the intestinal propulsion rats(IPR)were assessed by measuring the ratio of the distance of phenol red running in the intestine and the total length.The insulin(INS)and insulin-like receptor(IR)level in gastric antrumwere detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsCompared with the normal control group,the blood glucoses and symptom score in the model group were significantlyincreased,whileGER,IPR and antrum INS and IR decreased (P<0.01).In comparison with themodelgroup,the blood glucoses and symptom score obviously diminished after EA stimulation of acupoint,while the GER,IPR,antrum INS and IR were respectively raised (P<0.05,P<0.01).Compared with EA acupointgroup,the INS and IR in gastric antrum markedly increased in EA non-acupoint group,while the symptom score reduced(P<0.05,P<0.01).ConclusionEA stimulation can adjust blood glucose level and improve gastrointestinal motility,which may be closely associated with its effects of raising INS and IR in gastric antrum.
electroacupuncture;diabetic gastroparesis;gastric empting rates;insulin;insulin-like receptor
R245.9
A
10.3969/j.issn.1674-070X.2017.02.016
2016-08-28
國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81403487);湖南省教育廳青年基金(14B128,14B129)。
楊建文,女,在讀碩士研究生,研究方向:針灸治病作用機(jī)制的研究。
* 彭 艷,女,副教授,E-mail:penyatcm@126.com。
本文引用:楊建文,林亞平,陳海交,張程程,劉薇薇,劉 麗,劉 密,彭 艷.電針對(duì)糖尿病胃輕癱大鼠胃竇部 INS及 IR 表達(dá)的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2017,37(2):172-176.