陳艷秋，楊禮環(huán)，蔣玉瓊，劉 穎

（重慶市渝北區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，重慶 401120）

炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，是缺血性卒中的重要原因之一[1]。高敏C反應(yīng)蛋白水平（High-Sensitivity C-Reactive Protein，hsCRP）是人體炎癥反應(yīng)的敏感指標(biāo)之一，可能促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化[2]，hsCRP水平增高和急性缺血性卒中患者神經(jīng)損傷嚴(yán)重程度和梗死面積大小有顯著相關(guān)[3]。Song等[4]研究表明血清骨保護(hù)素（Osteoprotegerin，OPG)是卒中神經(jīng)功能預(yù)后的潛在生物標(biāo)志物。本研究探討急性腦梗死（Acute Cerebral Infarction，ACI）患者血清OPG與hsCRP水平的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2014-10—2015-10間在重慶市渝北區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的ACI患者52例（為ACI組），其中男性30例，女性32例，年齡50～80歲，平均年齡 (61.52±10.32)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：診斷均符合1995年第四屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)頭顱CT或MRI證實(shí)，均為首發(fā)病，既往無卒中，24小時(shí)內(nèi)入院。同時(shí)選取健康檢查者62例（為正常對(duì)照組），男性31例，女性31例，平均年齡（60.1±5.65）歲。排除標(biāo)準(zhǔn):（1）鈣磷代謝異常及骨關(guān)節(jié)疾?。唬?）心、腎、呼吸功能衰竭、腫瘤及嚴(yán)重感染者。（3）急性冠脈綜合征及其他血管閉塞性疾病者。（4）嚴(yán)重精神疾病、癡呆者。（5）甲狀腺及腎上腺疾病者。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集：由專人記錄各組對(duì)象的一般資料如年齡、性別、身高、血壓、及計(jì)算體質(zhì)指數(shù)（Body mass index，BMI）等。血壓采用汞式標(biāo)準(zhǔn)袖帶血壓計(jì)測(cè)量右肱的血壓。

1.2.2 生化指標(biāo)檢測(cè)：受檢者禁食8～10 h后，清晨8:00時(shí)采空腹靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，3000 r/min離心15 min分離血清，于-70℃冰箱保存，采用全自動(dòng)生化分析儀（貝克曼庫爾特AU5800系列）測(cè)定血清總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDH-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、空腹血糖（FPG）、hsCRP水平（應(yīng)用膠乳增強(qiáng)的免疫散射比濁法）。

1.2.3 血清OPG水平的測(cè)定：受檢者禁食8～10 h后，清晨8:00時(shí)采空腹靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，3000 r/min離心15 min分離血清，于-70℃冰箱保存，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附雙抗夾心測(cè)定法（ELISA法)測(cè)定標(biāo)本中血清OPG水平。OPG酶聯(lián)免疫試劑盒由上海撫生實(shí)業(yè)有限公司提供，單位為pg/mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s)表示，兩組間均數(shù)比較采用方差分析，非正態(tài)分布兩組間比較采用Mamm-Whitney U檢驗(yàn)，正態(tài)分布資料各因素間相關(guān)性采用Pearson分析，而非正態(tài)分布采用Spearman相關(guān)分析，采用Logistic多因素回歸分析血清OPG與hsCRP水平之間關(guān)系，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床資料及生化資料的比較

兩組間年齡、性別、吸煙、高血壓病史、糖尿病病史、收縮壓、舒張壓、TG、TC、HDL-C、FPG、UA、BMI比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組患者臨床資料及生化指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組患者臨床資料及生化指標(biāo)比較（±s）

組別男/女（例）年齡（歲）吸煙[例（%）]高血壓病史[例（%）]糖尿病病史[例（%）]收縮壓（mmHg)舒張壓（mmHg)TC(mmol/L)TG(mmol/L)LDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)FPG(mmol/L)UA(umol/L)BMI(Kg/m2)ACI組30/32 61.52±10.32 10(16.13)27(43.55)8(12.90)151.20±8.62 86.24±5.45 4.63±2.01 1.53±0.21 3.60±1.32 1.12±0.10 5.20±1.52 396.60±62.65 23.62±5.32正常對(duì)照組31/31 60.1±5.65 9(14.52)25(40.32)6(9.68)146.14±5.12 84.02±3.02 4.32±1.36 1.42±0.22 3.42±1.20 1.10±0.32 4.80±1.62 363.31±62.32 21.52±4.03

2.2 兩組患者血清OPG與hsCRP水平的比較

ACI組和正常對(duì)照組的血清OPG水平分別為（975.22±135.42）pg/mL和 （908.41±110.20）pg/mL，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。ACI組和正常對(duì)照組的血清hsCRP水平分別為 （12.01±3.45）mg/L 和 （5.23±1.11）mg/L，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 血清OPG與血清hsCRP相關(guān)性

表2 兩組血清OPG水平與hsCRP比較（±s）

表2 兩組血清OPG水平與hsCRP比較（±s）

組別OPG（pg/mL）hsCRP（mg/L)ACI組975.22±135.42▲12.01±3.45▲正常對(duì)照組908.41±110.20 5.23±1.11

血清OPG分別與ACI組和正常對(duì)照組的hsCRP做Spearman相關(guān)分析顯示均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為：r=0.432和r=0.312，兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。血清hsCRP水平越大，血清OPG水平越大。

2.4 血清OPG危險(xiǎn)因素分析

以血清OPG為因變量，以性別、年齡、吸煙、收縮壓、舒張壓、TC、TG、LDL-C、FPG、UA、hsCRP、BMI等為自變量，進(jìn)行Logistic多因素回歸分析。結(jié)果顯示，年齡、BMI、FPG、收縮壓、舒張壓、hsCRP為ACI患者血清OPG的危險(xiǎn)因素，血清OPG與hsCRP呈明顯正相關(guān)（P＜0.05）。見表3。

表3 血清OPG危險(xiǎn)因素分析

3 討論

ACI特點(diǎn)是腦組織血流量突然中斷，從而導(dǎo)致葡萄糖和氧立即被剝奪。不同的機(jī)制參與中風(fēng)的發(fā)病機(jī)制，但越來越多的證據(jù)表明，臨床結(jié)果的惡化原因之一與炎癥反應(yīng)和各種炎性細(xì)胞因子密切相關(guān)。研究證實(shí)，ACI患者h(yuǎn)sCRP，白細(xì)胞介素6（Interleukin 6，IL-6），基質(zhì)金屬蛋白酶9（Matrix Metalloproteinase 9，MMP-9）明顯增高[2]。

C反應(yīng)蛋白（C-Reactive Protein，CRP）是一種炎癥急性時(shí)相反應(yīng)物，由肝臟合成分泌，受IL-6刺激產(chǎn)生，在炎癥反應(yīng)和組織損傷時(shí)釋放入血液中。CRP刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生多種黏附分子，如細(xì)胞間黏附分子-1，血管細(xì)胞黏附分子-1，E-選擇素，這些分子允許單個(gè)核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞在血管壁的遷移和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成中起關(guān)鍵作用。CRP也有助于釋放超氧陰離子和刺激組織因子活性。此外，它誘導(dǎo)纖溶酶原激活物抑制劑-1（Plasminogen Activator Inhibitor-1，PAI-1），而PAI-1是纖溶的中斷和血栓形成的一個(gè)標(biāo)志。最后，CRP可能會(huì)增加內(nèi)皮細(xì)胞裂解的機(jī)會(huì)和斑塊的侵蝕[5]。

CRP被公認(rèn)為與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切的炎癥標(biāo)志物。目前應(yīng)用膠乳增強(qiáng)的免疫散射比濁法等方法檢測(cè)低限可達(dá)0.005～0.10mg/L，用這些方法所測(cè)定CRP稱為hsCRP。Chaudhuri J R等[5]研究表明，高h(yuǎn)sCRP水平是急性缺血性腦卒中的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。入院時(shí)血清hsCRP是缺血性腦卒中后長(zhǎng)期死亡率的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[6]。

OPG是一個(gè)屬于腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor,TNF)受體超家族中一個(gè)關(guān)鍵細(xì)胞因子，很多的細(xì)胞如成骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞均能產(chǎn)生OPG，對(duì)骨代謝和內(nèi)分泌功能有廣譜的多效性。血管鈣化是動(dòng)脈粥樣硬化的病理生理過程，然而，骨骼骨質(zhì)流失和血管鈣化共享相似的機(jī)制途徑，OPG在兩者起重要作用[7]。OPG作為核因子κB配體受體激活劑，它的表達(dá)和產(chǎn)生受各種炎癥細(xì)胞如白介素-1和TNF-α的調(diào)節(jié)。RANKL可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的成骨分化，刺激趨化因子的釋放、金屬蛋白酶-9活動(dòng)、及單核/巨噬細(xì)胞基質(zhì)位移[8]。OPG通過結(jié)合及中和RANK/RANKL系統(tǒng)受體激活劑，既可減少破骨細(xì)胞分化、激活和生存，及調(diào)節(jié)骨的吸收[9-10]，又在動(dòng)脈鈣化和動(dòng)脈粥樣硬化病理過程中起重要調(diào)節(jié)作用[11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，ACI組和正常對(duì)照組的一般臨床資料比較無明顯差別，但ACI組的血清OPG和hsCRP水平分別比正常對(duì)照組明顯升高，ACI組炎癥指標(biāo)hsCRP水平越高，血清OPG水平越高，Spearman相關(guān)分析和Logistic多因素回歸分析顯示，血清OPG和hsCRP水平呈明顯正相關(guān)。故血清OPG也可能為急性腦梗死患者炎癥指標(biāo)。目前研究表明：（1）促炎介質(zhì)如TNF-α、白介素-1、血小板源生長(zhǎng)因子能促進(jìn)血管細(xì)胞OPG的表達(dá)和生成。高水平的OPG能提示持續(xù)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷和平滑肌的增殖，能促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展和不穩(wěn)定性[12]。（2）OPG通過TNF-α刺激內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞間黏附分子-1、血管細(xì)胞黏附分子-1、E-選擇素的表達(dá)，促進(jìn)單核細(xì)胞結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞[13]。（3）OPG本身參與動(dòng)脈粥樣硬化過程的不同步驟，因炎癥反應(yīng)而損傷的內(nèi)皮細(xì)胞，可從Weibel-Palade體中釋放OPG。血管內(nèi)皮細(xì)胞可能OPG的源泉[14]。OPG在內(nèi)皮細(xì)胞刺激和功能異常[15]、巨噬細(xì)胞滲透[16]、白細(xì)胞黏附[17]、促進(jìn)平滑細(xì)胞增殖[18]等病理生理中起重要作用。

ACI患者血清hsCRP和OPG水平均可能由IL-6等炎性因子刺激而表達(dá)和生成，兩者均對(duì)炎癥反應(yīng)、斑塊破裂、血栓的形成及動(dòng)脈粥樣硬化等病理生理過程產(chǎn)生明顯影響，故可能兩者相互影響、相互作用，血清OPG水平可能為ACI患者重要的炎癥指標(biāo)。

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