譚成俠，戴丹丹，魏優(yōu)昌，胡冬松，譚 悅

(1.浙江工業(yè)大學 化學工程學院，浙江 杭州 310014；2.浙江省化工研究院 國家南方農(nóng)藥創(chuàng)制中心浙江基地，浙江 杭州 310023)

氯胺嘧草醚在土壤中的殘留分析方法

譚成俠，戴丹丹1，魏優(yōu)昌2，胡冬松2，譚 悅2

(1.浙江工業(yè)大學 化學工程學院，浙江 杭州 310014；2.浙江省化工研究院 國家南方農(nóng)藥創(chuàng)制中心浙江基地，浙江 杭州 310023)

建立了氯胺嘧草醚在土壤中的殘留分析方法.土壤樣品用乙腈提取，弗羅里硅土小柱凈化，高效液相色譜-DAD檢測器檢測.氯胺嘧草醚在0.1～10.0 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 8；土壤中的最低檢出限為0.002 mg/kg，最小檢出量為1.0×10-12g；在土壤中氯胺嘧草醚的平均添加回收率回收率分別96.7%～99.5%，變異系數(shù)分別為2.4%～4.6%.該方法的準確度、精確度及靈敏度均達到農(nóng)藥殘留分析的要求.

氯胺嘧草醚；土壤；殘留；分析方法

氯胺嘧草醚(ZJ1835)[N-(2-氯-6-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-氧基)芐基)苯胺]是在“2-嘧啶氧基-N-芳基芐胺類化合物”結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上優(yōu)化而來的新型高除草活性化合物，屬于嘧啶水楊酸類除草劑，是由浙江省化工研究院和中科院上海有機化學研究所共同發(fā)現(xiàn)的，具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的農(nóng)藥[1].該結(jié)構(gòu)先導至今未見其他文獻報道，目前已獲得中國發(fā)明專ZL00130735.5[2]，并申報了PCT國際發(fā)明專利[3]，結(jié)構(gòu)具有國際原創(chuàng)性.主要用于芽前處理防治棉花田中的馬唐、牛筋草、反枝莧和馬齒莧等雜草，具有防效好、持效期長等性能優(yōu)點[4-9]，因而在我國將有良好的應用前景.

農(nóng)藥殘留分析檢測技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成熟，尤其是不同儀器技術(shù)的應用，取得了很大的進步，向快速、簡便、靈敏和可靠的方向發(fā)展.當前最為常用的農(nóng)藥檢測技術(shù)為氣相色譜法、液相色譜法、質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)以及超臨界流體色譜技術(shù)[10-11].目前關(guān)于氯胺嘧草醚質(zhì)量濃度的液相色譜分析方法已有報道，但是其在土壤中的殘留分析方法在國內(nèi)外均未見公開報道.因此為了更好的研究其使用后的環(huán)境行為及殘留規(guī)律，建立了土壤中氯胺嘧草醚的殘留分析方法[12].

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

儀器：Ultimate 3000高效液相色譜(HPLC)(美國Thermo Scientific)；SHZ-A水浴恒溫振蕩器(上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠)；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀.

試劑：氯胺嘧草醚標準品(質(zhì)量分數(shù)≥99%,浙江省化工研究院自制)；乙腈為色譜純，其余石油醚、乙酸乙酯和氯化鈉均為分析純；氯胺嘧草醚標準溶液：用分析天平準確稱量氯胺嘧草醚標準品0.010 3 g，用乙腈溶解并定容至100 mL，配成標準溶液，置于冰箱低溫保存?zhèn)溆?

1.2 樣品的前處理

1.2.1 樣品的提取

稱取干重為20 g的土壤樣品和10 mL蒸餾水于250 mL三角燒瓶中，振搖0.5 min，再加入50 mL提取溶劑(乙腈，甲醇，二氯甲烷，乙酸乙酯)，在轉(zhuǎn)速100 r/min，恒溫25 ℃的條件下，振蕩一定時間(30，60，90 min).然后用布氏漏斗抽濾，濾液轉(zhuǎn)移至100 mL具塞量筒中，再加入10 g氯化鈉，劇烈振搖1 min，靜置20 min使其分層.取上層清液25 mL于平底燒瓶中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(40 ℃條件下)濃縮干，加入5.0 mL石油醚，待凈化.

1.2.2 樣品的凈化

凈化(Florisil小柱，質(zhì)量濃度為1 000/6 mg/mL):5 mL石油醚活化小柱，5 mL石油醚上樣，5 mL石油醚淋洗，10 mL石油醚與乙酸乙酯(體積比為9∶1)的混合液洗脫，收集洗脫液到平底燒中，在40 ℃條件下濃縮干，用2.0 mL乙腈溶解，過濾膜(0.45 μm)，待進樣.

1.3 色譜分析條件

液相色譜柱為4.6 mm×150 mm ZORBAX SB-C18柱(美國Agilent公司)，流動相為乙腈和水(體積比為80︰20)，檢測器為DAD，流速1.0 mL/min；檢測波長245 nm；進樣量為10 μL；柱溫25 ℃，在上述條件下氯胺嘧草醚的保留時間為7.85 min.典型圖譜見圖1.

圖1 氯胺嘧草醚標樣色譜圖Fig.1 The HPLC spectrum of ZJ1835

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

本研究比較了4種溶劑(甲醇、乙腈、二氯甲烷和乙酸乙酯)的提取回收率(表1)，回收率試驗結(jié)果表明，二氯甲烷和乙腈的提取回收率較高，均能滿足回收率試驗要求，兩者相比較而言，乙腈的回收率最好.因此選擇乙腈為土壤中氯胺嘧草醚的提取溶劑.

表1 不同提取溶劑對回收率的影響

2.2 振蕩時間的選擇

添加氯胺嘧草醚標樣到土壤樣品中，加入乙腈溶劑50 mL，分別振蕩30，60，90 min進行比較，根據(jù)1.2步驟前處理，再計算添加回收率.見表2，結(jié)果表明：90 min的回收率偏高，可能提出了更多的雜質(zhì)干擾標樣；30 min回收率偏低，時間太短，不能完全提取出氯胺嘧草醚在土壤中的殘留；60 min的回收率較穩(wěn)定，提取效果較好.所以選擇振蕩60 min進行提取.

表2 不同振蕩時間對回收率的影響

2.3 線性相關(guān)性的測定

從氯胺嘧草醚100 mg/L標準乙腈儲備液中吸取5 mL，用乙腈稀釋至50 mL標準溶液，并逐級稀釋，配成由0.1，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0 mg/L組成標準作曲線.見圖2，以質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，得到氯胺嘧草醚的線性回歸方,A=0.381 2C+0.132 4，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 8.這表明氯胺嘧草醚在0.1～10.0 mg/L范圍內(nèi)的儀器響應值與質(zhì)量濃度呈良好線性.

圖2 氯胺嘧草醚的標準曲線圖Fig.2 The standard curve of ZJ1835

2.4 方法的準確性和精確度

稱取5份空白土壤(干重為20 g)，分別向土壤中添加一定體積的氯胺嘧草醚溶液，使其質(zhì)量濃度分別為0.1，1.0，5.0 mg/L，采用優(yōu)化后建立的提取條件，重復5次，測定方法回收率，如表3所示.表3的結(jié)果表明：氯胺嘧草醚在土壤中的回收率分別為96.7%，99.5%，96.9%，變異系數(shù)分別為4.0%，2.4%，4.6%.回收率以及相變異系數(shù)均在農(nóng)藥殘留試驗準則允許范圍內(nèi)[13]，方法的重復性好[14-15].表明該方法的準確度和精確度滿足農(nóng)藥殘留測定的要求.

表3 土壤中氯胺嘧草醚的添加回收率

2.5 方法的最小檢出量和最低檢出限

氯胺嘧草醚標準品最小檢出量為1.0×10-12g，本方法對土壤中氯胺嘧草醚殘留的最低檢出限為0.002 mg/kg.

3 結(jié) 論

本實驗建立土壤中氯胺嘧草醚的殘留分析方法.比較了不同提取溶劑和振蕩時間對土壤中氯胺嘧草醚回收率的影響.發(fā)現(xiàn)以乙腈作為提取溶劑，振蕩60 min，獲得最佳的回收率.結(jié)果表明：用液相色譜法測定氯胺嘧草醚在土壤中的殘留量，具有操作簡單、快速、分離完全以及準確度和精確度高等特點，適用于氯胺嘧草醚在土壤中殘留的分析測定.目前，尚未有文獻報道氯胺嘧草醚在土壤中的殘留分析方法，本研究為氯胺嘧草醚在土壤中的安全性評價提供檢測依據(jù)，為該農(nóng)藥在其他農(nóng)作物中殘留檢測方法提供一定的參考價值.

[1] 徐小燕,陳杰,董德臻，等.新型除草劑ZJ1835和二甲戊樂靈混用配方篩選[J].農(nóng)藥,2011,50(4):301-304.

[2] 呂龍,吳軍,陳杰，等.2-嘧啶氧基芐基取代苯基胺類衍生物：CN 00130735.5[P].2003-11-12.

[3] Lü Long, CHEN Jie, WU Jun, et al. New 2-pyrimidinyloxy-n-aryl-benzylamine derivatives, their processes and uses:US 6,800,590B2[P].2004-05-10.

[4] 徐小燕,臺文俊,董德臻，等.N-苯基-2-(4,6-二甲氧基-2-嘧啶氧基)-6-氯芐胺(ZJ1835)的除草活性研究[J].農(nóng)藥學學報,2011,13(4):427-430.

[5] 徐小燕,唐偉,姚燕飛，等.土壤環(huán)境因子對氯胺嘧草醚除草活性的影響[J].農(nóng)藥學學報,2015,17(3):357-361.

[6] 江森明,龔啟孫,姚巍，等.嘧啶氧芐胺類除草劑的合成研究[J].浙江化工，2005,36(10):11-12

[7] 陳杰,袁軍,劉繼東，等.新型除草劑丙酯草醚的作用機理[J].植物保護學報，2005,32(1):48-52.

[8] 劉繼東.嘧啶芐胺類化合物除草作用機制的研究[D].杭州：浙江大學，2003.

[9] 徐小燕,姚燕飛,唐偉，等.土壤環(huán)境因子對氯胺嘧草醚除草活性的影響[J].農(nóng)藥學學報2015，17(3)：357-361

[10] CONAWAY J E.New trends in analytical technology and methods for pesticide residue analysis[J]. Journal association of official analytical chemists，1991，74(5)：715-717.

[11] OPPONG F, SAGAR G. Degradation of triasulfuron in soil under laboratory conditions[J]. Weed research，1992，32：167-173.

[12] 付馨慰.人參、菊花、元胡中百余種農(nóng)藥殘留檢測方法的研究[D].杭州：浙江工業(yè)大學，2015.

[13] 劉光學,喬雄悟,陶傳江，等.農(nóng)藥殘留試驗準則：NY/T 788—2004[S].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[14] 張安平,呂立,孫建強,等.溫室中有機氯農(nóng)藥殘留及其對映體選擇性研究[J].浙江工業(yè)大學學報，2016,44(6)：640-643.

[15] 何華麗.果蔬中農(nóng)藥多組分殘留的檢測方法研究[D].杭州：浙江工業(yè)大學，2014.

(責任編輯：陳石平)

Residue analysis of ZJ1835 in soil

TAN Chengxia1, DAI Dandan1, WEI Youchang2, HU Dongsong2, TAN Yue2

(1.College of Chemical engineering, Zhejiang University of technology, Hangzhou 310014, China;2.Zhejiang Branch of National Pesticide R&D South Center, Zhejiang Chemical Industry Research Institute, Hangzhou 310023, China)

A method was established for the determination of ZJ1835 residues in soil. Residues were extracted with acetonitrile, purified by SPE cartridge, and determined with HPLC equipped by DAD detector. The results showed that the good linear relationship for ZJ1835 was obtained between 0.1 mg/L and 10.0 mg/L. The minimum detectable concentration in soil was 0.002 mg/kg and the minimum detectable amount of ZJ1835 standard was 1.0×10-12g. The average of recoveries and coefficient of variations of ZJ1835 of the method were 96.7%-99.5%，2.4%-4.6% for soil samples, The results show that the method meets the requirements of pesticide residue analysis.

ZJ1835;soil; residue; analysis method

2016-11-24

譚成俠(1972—)，男，陜西大荔人，教授，博士，主要從事新農(nóng)藥開發(fā)研究工作，E-mail：tanchengxia@zjut.edu.cn.

X53

A

1006-4303(2017)04-0391-03