彭曉俊,曾麗珠,伍長(zhǎng)春,梁偉華

(1.新會(huì)出入境檢驗(yàn)檢疫局,廣東 江門 529100;2.陽(yáng)江出入境檢驗(yàn)檢疫局,廣東 陽(yáng)江 529500)

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基于QuEChERS法提取液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定新會(huì)陳皮中的9 種真菌毒素和農(nóng)藥殘留

彭曉俊1*,曾麗珠2,伍長(zhǎng)春1,梁偉華1

(1.新會(huì)出入境檢驗(yàn)檢疫局,廣東 江門 529100;2.陽(yáng)江出入境檢驗(yàn)檢疫局,廣東 陽(yáng)江 529500)

建立了QuEChERS-改性多壁碳納米管提取凈化結(jié)合液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)新會(huì)陳皮中6 種真菌毒素和3 種農(nóng)藥殘留的分析方法，并對(duì)影響提取、凈化、檢測(cè)效率的因素進(jìn)行了優(yōu)化。以乙腈-水(80∶20)提取樣品，適量改性多壁碳納米管凈化后，凈化液直接用HPLC-MS/MS進(jìn)行測(cè)定，選擇多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量。在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下，9 種目標(biāo)化合物在各自線性范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.983 8～0.998 2，檢出限(S/N=3)為0.18～10 μg/kg。在低、中、高3個(gè)加標(biāo)水平的平均回收率為72.4%～106%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2%～7.4%。該法準(zhǔn)確、靈敏度高﹑操作簡(jiǎn)單﹑快速，可滿足新會(huì)陳皮中上述9 種化合物同時(shí)測(cè)定的要求，應(yīng)用于真菌毒素和農(nóng)藥殘留的快速篩查和確證，結(jié)果滿意。

QuEChERS；改性多壁碳納米管；液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)；真菌毒素；農(nóng)藥殘留；新會(huì)陳皮

陳皮為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，新會(huì)是陳皮的道地產(chǎn)區(qū)，新會(huì)陳皮為廣東十大地道中藥材之一，是“廣東三寶”(陳皮、老姜、禾稈草)的第一寶和清廷貢品，而經(jīng)年陳藏的新會(huì)陳皮更是珍品。2016 年新會(huì)陳皮種植面積共6.5 萬(wàn)畝，陳皮總產(chǎn)量預(yù)計(jì)達(dá)7 000 噸，行業(yè)產(chǎn)值近30 億元，但新會(huì)陳皮面臨的食品安全風(fēng)險(xiǎn)十分嚴(yán)峻。陳皮在加工儲(chǔ)存過(guò)程中，由于受溫度濕度等影響，容易霉變而產(chǎn)生真菌，真菌代謝產(chǎn)生有毒的真菌毒素，真菌毒素能損壞人的肝腎功能、致癌、致畸并誘發(fā)免疫抑制性疾病[1]。在這些代謝物中，黃曲霉毒素類、赭曲霉毒素類、玉米赤霉烯酮對(duì)人體健康危害尤為巨大。農(nóng)作物種植過(guò)程中引入的農(nóng)藥殘留，通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體，進(jìn)而危害人類健康，同樣是導(dǎo)致食品安全突發(fā)事件頻發(fā)的主要原因。2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)是應(yīng)用最為廣泛的除草劑，滅多威是一種廣譜性氨基甲酸酯類殺蟲劑，毒死蜱則是最常用的殺蟲劑，這3 種農(nóng)藥高效、廣譜，具有擊倒速度快、作用范圍廣等特點(diǎn)，在我國(guó)使用廣泛[2]。因此，由真菌毒素、農(nóng)藥殘留產(chǎn)生的健康風(fēng)險(xiǎn)問(wèn)題日益受到人們的關(guān)注。

目前，真菌毒素的檢測(cè)方法主要有酶聯(lián)免疫法(ELISA)[3-5]、薄層色譜法[6]、液相色譜法[7-9]和液質(zhì)聯(lián)用法[10-14]等，但前3種方法的選擇性較差，只能檢測(cè)單一種類的真菌毒素。農(nóng)藥的定量檢測(cè)一般采用氣相色譜法[15-16]、氣質(zhì)聯(lián)用法[17-18]。現(xiàn)有的真菌毒素、農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法相對(duì)較為獨(dú)立，真菌毒素和農(nóng)藥殘留不能同時(shí)檢測(cè)，無(wú)法滿足食品安全突發(fā)事件檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)目標(biāo)組分多的快速處置要求。近年來(lái)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS/MS)在檢測(cè)方面的優(yōu)勢(shì)逐漸顯現(xiàn)，采用選擇離子監(jiān)測(cè)技術(shù)，可大大提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，已被越來(lái)越多地應(yīng)用于高通量分析，但常規(guī)前處理方法步驟繁瑣、有機(jī)試劑消耗量大，對(duì)操作人員技能要求高。新會(huì)陳皮含有揮發(fā)油、黃酮化合物、有機(jī)酸等化學(xué)成分，還有大量色素、脂肪、糖等生化成分，用傳統(tǒng)的液液萃取、索氏抽提、固相萃取等前處理方法，普遍存在基質(zhì)干擾嚴(yán)重、步驟繁瑣、重現(xiàn)性差且有機(jī)溶劑消耗量大等缺點(diǎn)。2003年，Anastassiades等[19]建立了QuEChERS(Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，Safe)新型樣品前處理方法，QuEChERS可以根據(jù)樣品基質(zhì)和待測(cè)物的特性，選擇合適的有機(jī)提取溶劑和凈化填料，具有快捷、簡(jiǎn)便、高效、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。QuEChERS前處理方法結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定陳皮中真菌毒素、農(nóng)藥殘留的方法尚未見報(bào)道。1991 年，日本電鏡專家Iijima[20]發(fā)現(xiàn)了多壁碳納米管(MWNTs)，但未處理的MWNTs表面缺少官能基團(tuán)，疏水性強(qiáng)、不溶不熔、易纏結(jié)團(tuán)聚，影響了其作為吸附劑應(yīng)用。本文通過(guò)對(duì)MWNTs進(jìn)行衍生化化學(xué)修飾，用強(qiáng)氧化性酸對(duì)MWNTs進(jìn)行酸處理，使其表面產(chǎn)生一定量的羥基、羧基等含氧活性官能基團(tuán)，有效提高了改性MWNTs在溶液介質(zhì)中的分散性能和對(duì)有機(jī)化合物的吸附性能，加之改性MWNTs準(zhǔn)一維的中空管結(jié)構(gòu)和高的比表面積，因此在吸附方面具有優(yōu)異的性能。本研究利用改性MWNTs在吸附方面具有的優(yōu)異性能去除樣品中的干擾，采用QuEChERS提取、改性MWNTs凈化、液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定，建立了新會(huì)陳皮中6 種真菌毒素和3 種農(nóng)藥殘留的快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便分析方法。相關(guān)研究能夠?yàn)闃悠返目焖俸Y查提供可靠的技術(shù)支持，將其應(yīng)用于新會(huì)陳皮食品安全突發(fā)事件的快速應(yīng)急處置工作，可整體提升應(yīng)急處置工作效率。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

LC-20AT 高效液相色譜儀(日本Shimadzu公司)；API 3200質(zhì)譜儀(美國(guó)ABsciex公司)；H-800-1 型透射電子顯微鏡(日本日立公司)；Nexus 670 型傅立葉變換紅外光譜掃描儀(美國(guó)Thermo公司)；2-16 型通用臺(tái)式高速離心機(jī)(德國(guó)Sigma公司)；DZF-6050 型真空干燥機(jī)(上海精密儀表公司)；KQ 2200DB 型超聲振蕩器(昆山超聲儀器有限公司)；LAB DANCER 渦旋混合器(德國(guó)IKA公司)；DN-12W 氮吹儀(上海比郎公司)；Milli-Q 超純水系統(tǒng)(美國(guó)Millipore公司)；50 mm×0.22 μm聚四氟乙烯微孔濾膜(美國(guó)Millipore公司)。

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、滅多威(Methomyl)、毒死蜱(Chlorpyrifos)、黃曲霉毒素G2(AFG2)、黃曲霉毒素G1(AFG1)、黃曲霉毒素B2(AFB2)、黃曲霉毒素B1(AFB1)、赭曲霉毒素A(OTA)和玉米赤霉烯酮(ZEN)標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；甲醇、乙腈(色譜純，德國(guó)默克公司)；甲酸、乙酸銨(優(yōu)級(jí)純，上海安譜公司)；MWNTs填料(純度>95%，直徑10～20 nm，長(zhǎng)度300～800 nm，深圳納米港有限公司)；Florisil填料(80～100 目，上海博勢(shì)公司)；PSA填料(平均粒度45 μm，孔體積0.8 m3/g，山東奧秘公司)；硅膠(60～100目，青島海洋化工)；實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

1.2 儀器工作條件

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Shimadzu C18(150 mm×2.1 mm×3.5 μm)；流速：0.20 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；流動(dòng)相：A為5 mmol/L 乙酸銨水溶液(含1%甲酸)，B 為乙腈；梯度洗脫程序：0～2 min，10%B；2～20 min，10%～80%B；20～26 min，10%B。

1.2.2 質(zhì)譜分析條件 離子源：電噴霧離子源(ESI)；掃描方式：正離子掃描；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；噴霧電壓：5 500 V；離子源溫度：550 ℃；碰撞氣壓力：60 kPa；氣簾氣壓力：250 kPa；霧化氣壓力：550 kPa；加熱輔助氣壓力：550 kPa；MRM參數(shù)見表1。

表1 9種化合物的串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)

*quantitative ion

1.3 MWNTs改性

稱取50 g MWNTs置于500 mL燒瓶中，加入50 mL濃硫酸，超聲30 min，再向燒瓶中加入30 mL濃硝酸，超聲30 min，靜置，用吸管吸除上層混酸清液，然后加入1 000 mL水稀釋，稀釋液過(guò)0.22 μm的聚四氟乙烯微孔濾膜，水洗至濾液pH值為7.0，所得黑色固體經(jīng)真空烘箱50 ℃干燥即得被氧化的改性MWNTs。

1.4 樣品處理

稱取粉碎的新會(huì)陳皮2.00 g于50 mL具塞離心管中，加入10 mL乙腈-水(80∶20，體積比，下同)，振蕩1 min，再加入0.6 g改性MWNTs，振蕩1 min，超聲10 min，5 000 r/min離心5 min，吸取上層清液過(guò)0.22 μm有機(jī)相濾膜，供上機(jī)測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 MWNTs表面改性

MWNTs獨(dú)特的中空管結(jié)構(gòu)以及高比表面積使之具有作為凈化吸附劑的優(yōu)異性能。但未改性的MWNTs由于表面缺少活性官能基團(tuán)，限制了其在吸附領(lǐng)域的應(yīng)用，因此須對(duì)MWNTs表面進(jìn)行氧化改性，使其表面產(chǎn)生一定量的羧基、羥基等活性官能基團(tuán)。本研究中氧化改性前后的透射電鏡照片(TEM)見圖1。由圖1可見，氧化改性后所得MWNTs分散均勻，有一定的長(zhǎng)徑比，長(zhǎng)度分布均勻，說(shuō)明本研究所采用的氧化改性方法效果好。氧化前后MWNTs的紅外光譜見圖2，可觀察到氧化后的MWNTs在3 414 cm-1處出現(xiàn)較寬的吸收峰，該吸收峰由羥基伸縮振動(dòng)所引起，在1 704 cm-1處的吸收峰羧基中的羰基伸縮振動(dòng)所引起，這些結(jié)果可以說(shuō)明強(qiáng)酸氧化后MWNTs的表面產(chǎn)生了羥基和羧基官能基團(tuán)。

圖1 未經(jīng)氧化(A)及混酸氧化后(B)所得MWNTs的TEM照片

Fig.1 TEM images of MWNTs of raw untreated(A) and treated(B) with a mixture acid by oxidation

圖2 未經(jīng)氧化(a)及混酸氧化后(b)所得紅外光譜圖Fig.2 Infrared spectra of MWNTs of raw untreated(a) and treated(b) with a mixture acid by oxidation

2.2 提取溶液的選擇

將目標(biāo)化合物從樣品中有效提取是多殘留分析必須解決的首要問(wèn)題，樣品提取一般采用有機(jī)溶劑加水作為提取溶液，提取液含水可以濕潤(rùn)基質(zhì)，增強(qiáng)有機(jī)溶劑的滲透能力，便于有機(jī)溶劑的滲入和萃取，從而提高對(duì)目標(biāo)化合物的提取效率。本研究的目標(biāo)化合物為脂溶性物質(zhì)，溶于乙腈、乙醚和氯仿等有機(jī)溶劑，但乙醚、氯仿等有機(jī)試劑毒性大，而乙腈能有效沉淀蛋白質(zhì)和脂肪，適用性廣，因此真菌毒素、農(nóng)藥檢測(cè)一般選擇乙腈-水作為提取溶液。本研究以2,4-D、滅多威、AFB1和ZEN作為考察物，以回收率作為考察指標(biāo)，在新會(huì)陳皮空白樣品中添加25 μg/kg混標(biāo)，考察了乙腈-水體積比分別為100∶0，90∶10，80∶20，70∶30時(shí)的回收率。結(jié)果顯示，當(dāng)乙腈-水比例為80∶20時(shí)提取效果最好。因此，實(shí)驗(yàn)選用乙腈-水(80∶20)作為提取溶液。

2.3 凈化吸附劑的選擇

新會(huì)陳皮基質(zhì)復(fù)雜，為了消除雜質(zhì)干擾，本研究對(duì)改性MWNTs，F(xiàn)lorisil，PSA，硅膠4種吸附劑的凈化作用進(jìn)行了比較。在空白新會(huì)陳皮中添加一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別采用改性MWNTs，F(xiàn)lorisil，PSA和硅膠吸附劑進(jìn)行凈化，以2,4-D、滅多威、AFB1和ZEN的回收率作為考察指標(biāo)。結(jié)果表明，F(xiàn)lorisil能有效地吸附極性化合物，但凈化液呈淺黃色，PSA能有效去除提取液中的有機(jī)酸、脂肪酸、糖類，但去除生物堿、色素、維生素、黃酮化合物等的效果不佳，用Florisil和PSA作凈化吸附劑，雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)化合物有干擾；硅膠對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪、維生素等雜質(zhì)有較高的吸附量，但也能牢固吸附目標(biāo)化合物，4種化合物的回收率低。改性MWNTs可有效除去樣品中的水溶性和脂溶性雜質(zhì)，凈化液無(wú)色，雜質(zhì)背景對(duì)目標(biāo)化合物檢測(cè)無(wú)影響且回收率最高。此外，改性MWNTs能在廣泛的pH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定，保證了凈化效果及方法的通用性，因此本研究采用改性MWNTs作為凈化吸附劑。

考察了改性MWNTs吸附劑用量分別為0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 g時(shí)對(duì)目標(biāo)化合物回收率的影響。結(jié)果顯示，隨著吸附劑用量增加，目標(biāo)化合物的回收率增大，這是由于真菌毒素和農(nóng)藥含π電子少，雜質(zhì)與吸附劑能形成更強(qiáng)的π-π吸附而減少了對(duì)目標(biāo)化合物的干擾。當(dāng)吸附劑用量為0.6 g時(shí)回收率最高，繼續(xù)增加吸附劑用量，目標(biāo)化合物的回收率無(wú)明顯變化，因此，選擇吸附劑的最佳用量為0.6 g。

2.4 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

配制9 種真菌毒素、農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蠕動(dòng)泵以10 μL/min的流速連續(xù)注射，在正離子模式下進(jìn)行一級(jí)母離子全掃描，得到目標(biāo)化合物的分子離子峰，優(yōu)化去簇電壓、霧化氣、氣簾氣等參數(shù)。根據(jù)歐盟2002/657/EC《質(zhì)譜分析方法鑒定點(diǎn)數(shù)》指令要求，在確定母離子的基礎(chǔ)上選擇兩個(gè)以上的子離子，打碎目標(biāo)分子離子峰進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描(子離子掃描)，采集全掃描的二級(jí)質(zhì)譜圖，得到碎片離子信息，對(duì)碰撞能、碰撞室出口電壓等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，最終每種目標(biāo)化合物分別選擇1 個(gè)定量離子外標(biāo)法定量，2 個(gè)定性離子和豐度比為定性依據(jù)，質(zhì)譜參數(shù)見表1。

圖3 9 種化合物的基質(zhì)效應(yīng)Fig.3 Matrix effects of nine compounds

2.5 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)指樣品中被分析物以外的組分對(duì)分析過(guò)程及結(jié)果準(zhǔn)確性的影響和干擾。不同真菌毒素、農(nóng)藥在同一基質(zhì)中具有不同的基質(zhì)效應(yīng)，同一真菌毒素、農(nóng)藥在不同基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)也不同，同時(shí)基質(zhì)效應(yīng)還與濃度具有一定的關(guān)系，隨著濃度增加，基質(zhì)效應(yīng)逐漸減弱。本實(shí)驗(yàn)對(duì)新會(huì)陳皮的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行了研究，樣品基質(zhì)效應(yīng)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定法，即配制2 組標(biāo)準(zhǔn)曲線，第1 組、第2 組分別用純有機(jī)溶劑、基質(zhì)空白提取液配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別繪制有機(jī)溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率和有機(jī)溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率之比(K)來(lái)評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)：若K值介于0.9～1.1之間，基質(zhì)效應(yīng)不明顯，K大于1.1時(shí)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，小于0.9則是基質(zhì)抑制效應(yīng)。結(jié)果顯示：以新會(huì)陳皮作為基質(zhì)時(shí)，AFG2，AFG1，AFB2和AFB1為基質(zhì)減弱效應(yīng)，2,4-D和ZEN表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，其他3 種化合物無(wú)明顯的基質(zhì)效應(yīng)(見圖3)。為提高定量的準(zhǔn)確性，本實(shí)驗(yàn)采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液(即以空白的新會(huì)陳皮凈化液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液制作校正曲線)校正方法進(jìn)行定量分析和計(jì)算，對(duì)基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行補(bǔ)償。

2.6 線性范圍與檢出限

以空白新會(huì)陳皮基質(zhì)提取液為溶液，根據(jù)9種化合物的響應(yīng)強(qiáng)弱，配制不同質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在優(yōu)化的色譜-質(zhì)譜條件下進(jìn)行測(cè)定，以定量離子的儀器響應(yīng)峰面積(y)對(duì)各目標(biāo)化合物的濃度(x)進(jìn)行線性回歸，9 種目標(biāo)化合物的線性范圍、相關(guān)系數(shù)和檢出限見表2。由表可見目標(biāo)化合物在各自線性范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.983 8～0.998 2，以3 倍信噪比(S/N=3)計(jì)算方法檢出限(LOD)為0.18～10 μg/kg，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流圖見圖4。

圖4 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(A)、新會(huì)陳皮(B)與新會(huì)陳皮添加標(biāo)準(zhǔn)品(C)的總離子流圖

Fig.4 TIC chromatograms of mixed standard solution(A),a xinhui dried orange peel(B) and a xinhui dried orange peel spiked with standards(C) the peak numbers(1-9) denoted were as the same as those in Table 1

2.7 回收率與精密度

為了評(píng)價(jià)方法的適用性，在上述最優(yōu)條件下，取新會(huì)陳皮空白樣品，按低、中、高3個(gè)濃度水平分別添加混合標(biāo)準(zhǔn)液，每個(gè)濃度水平重復(fù)6 次考察方法精密度，結(jié)果見表2。各目標(biāo)化合物的加標(biāo)回收率為72.4%～106%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.2%～7.4%。方法的準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好，可滿足痕量分析的要求。

表2 方法的線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限、平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)

(續(xù)表2)

No．CompoundLinearrange(μg/L)rLOD(μg/kg)Spiked(μg/kg)RecoveryR/%RSDsr/%3Chlorpyrifos1 0～1000 99822 55 0，10，5096 4，101，1025 8，6 3，2 24AFG20 10～200 99630 180 50，1 0，5 0101，96 3，1067 4，5 8，3 95AFG10 10～200 99410 240 50，1 0，5 072 4，91 2，92 63 9，6 6，4 56AFB20 10～200 99240 200 50，1 0，5 085 6，92 4，93 45 6，6 2，6 07AFB10 10～200 99120 210 50，1 0，5 092 7，88 3，89 56 2，7 1，5 68OTA5 0～5000 99631025，50，25083 8，89 7，96 16 2，6 2，5 89ZEN5 0～5000 99249 725，50，25092 4，99 5，1034 2，5 3，7 2

2.8 實(shí)際樣品的分析

采用本文建立的方法對(duì)300余份日常送檢的新會(huì)陳皮進(jìn)行檢測(cè)，以實(shí)驗(yàn)室空白、平行樣和樣品加標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制，其中6 份樣本檢出2,4-D(8.9～12 μg/kg)，3 份樣本檢出OTA(26.8～95.5 μg/kg)，其余樣品未檢出真菌毒素和農(nóng)藥。

3 結(jié) 論

研究結(jié)果表明，以改性MWNTs作為凈化劑，將QuEChERS凈化法與HPLC-MS/MS結(jié)合可用于新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。方法的加標(biāo)回收率為72.4%～106%，RSD為2.2%～7.4%，檢出限為0.18～10 μg/kg，方法前處理步驟簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確，檢出限滿足國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)的限量要求。此外，該方法能同時(shí)完成真菌毒素和農(nóng)藥殘留2 類不同組分的檢測(cè)，為食品安全提供了技術(shù)保障，具有一定的推廣價(jià)值。

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Determination of Nine Mycotoxins and Pesticide Residues in Xinhui Dried Orange Peel by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry with QuEChERS Clean-up

PENG Xiao-jun1*,ZENG Li-zhu2,WU Chang-chun1,LIANG Wei-hua1

(1.Xinhui Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Jiangmen 529100,China;2.Yangjiang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Yangjiang 529500,China)

An analytical method based on QuEChERS with modified multiwalled carbon nanotubes(MWNTs) as adsorbent was developed.The determination of 6 mycotoxins and 3 pesticides residues,including 2,4-D,methomyl,chlorpyrifos,AFG2,AFG1,AFB2,AFB1,OTA and ZEN in xinhui dried orange peel was carried out by liquid chromatography-tandem mass spectrometry(LC-MS/MS).The factors affecting the extraction，purification and detection efficiency were optimized，and the optimal conditions were as the following：the samples were extracted with acetonitrile-water(80∶20) mixed solution，and purified by QuEChERS method with modified MWNTs as adsorbent.The separation was performed on a Shimadzu C18(150 mm×2.1 mm×3.5 μm) column,then determined by LC-MS/MS under multiple reaction monitoring(MRM) mode and quantified by external standard method with the matrix-matched standards solution.Under the optimized conditions,the calibration curves of 9 compounds were linear in the respective concentration ranges with correlation coefficients of 0.983 8-0.998 2.The detection limits(S/N=3) were in the range of 0.18-10 μg/kg.The recoveries at low,medium and high spiked levels ranged from 72.4% to 106%,with relative standard deviations of 2.2%-7.4%.With the advantages of accuracy,high sensitivity，easy operation and rapidness,the method was suitable for the simultaneous determination of mycotoxins and pesticide in xinhui dried orange peel,and was applied in the rapid screening of toxic and harmful substances in foods with satisfactory results.

QuEChERS；modified multiwalled carbon nanotubes；liquid chromatography-tandem mass spectrometry(HPLC-MS/MS)；mycotoxins；pesticide residue；xinhui dried orange peel

2017-01-09；

2017-02-13

國(guó)家質(zhì)檢總局科技項(xiàng)目(2016IK066 );江門市科技項(xiàng)目(20161408 )

10.3969/j.issn.1004-4957.2017.06.006

O657.63；S852.44

A

1004-4957(2017)06-0738-06

*通訊作者：彭曉俊,碩士,高級(jí)工程師,研究方向:食品安全,Tel:0750-6312076,E-mail:pxj2129@163.com