曾海勇

(深圳市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科，廣東 深圳 518035)

甲狀腺乳頭狀癌屬于臨床上較常見的甲狀腺惡性腫瘤，其發(fā)病比率也較大。目前比較標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法是通過HE染色進(jìn)行病理學(xué)上的檢查[1]，雖然此方法并無困難之處，但是若標(biāo)準(zhǔn)的制片不夠理想，就會對形態(tài)學(xué)的診斷帶來一定程度的風(fēng)險，往往造成病情的延誤和漏診。同時，很多的慢性炎癥容易導(dǎo)致惡性腫瘤的進(jìn)一步發(fā)生和發(fā)展，臨床上存在嚴(yán)重的橋本甲狀腺炎合并甲狀腺乳頭狀癌的現(xiàn)象，且該現(xiàn)象有逐年升高的趨勢[2]。我們運(yùn)用免疫組織化學(xué)檢測的方式研究HBME-1、VEGF和Galectin-3等三種甲狀腺腫瘤標(biāo)記物在良性乳頭狀增生及甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)，探討該標(biāo)記物在橋本甲狀腺炎及甲狀腺乳頭狀癌中的臨床應(yīng)用意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選擇我院病理科于2015-03—2016-01間收治的進(jìn)行手術(shù)治療的患者的甲狀腺腫瘤標(biāo)本82例，其中女性患者有53例，男性患者29例，年齡在17～71歲，平均年齡為39.8歲。將標(biāo)本分為2組，其中甲狀腺乳頭狀癌組有42例；良性乳頭狀增生組有40例。病理診斷標(biāo)準(zhǔn)參考WHO甲狀腺腫瘤的分類標(biāo)準(zhǔn)。先將標(biāo)本用10%的中性福爾馬林溶液進(jìn)行固定，然后取材通過脫水處理，用石蠟包埋，進(jìn)行切片，厚度5 μm。

1.2 方法

對HBME-1、VEGF和Galectin-3等三種腫瘤標(biāo)記物進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，其中HBME-1和Galectin-3用酸值6.0的檸檬酸修復(fù)液進(jìn)行修復(fù)，VEGF用酸值9.0的EDTA修復(fù)液進(jìn)行修復(fù)。用已知的陽性制片作陽性對照，用一抗作陰性對照。

1.3 判定的標(biāo)準(zhǔn)

若在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜上看到有棕黃色的顆粒分布，則判定結(jié)果為陽性。細(xì)胞的陽性判斷通過半定量法：無黃色顆粒分布則為陰性，著色細(xì)胞數(shù)量<30%則為“+”，著色細(xì)胞數(shù)量為30%～60%則為“++”，著色細(xì)胞數(shù)量>60%則為“+++”。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

各種單項標(biāo)記物在甲狀腺乳頭狀癌和橋本甲狀腺炎中的表達(dá)的狀況，見表1。

2.1 HBME-1的免疫組化染色的陽性表達(dá)率

通過觀察可知，HBME-1的免疫組化染色在甲狀腺乳頭狀癌中大多為中度以上的強(qiáng)陽性表達(dá)，其陽性率為95.24%；在良性乳頭狀增生中，HBME-1的免疫組化染色大多為陰性。HBME-1的免疫組化染色的陽性率在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 VEGF的免疫組化染色的陽性表達(dá)率

VEGF的免疫組化染色在甲狀腺乳頭狀癌中陽性表達(dá)率為90.48%；在良性乳頭狀增生中陽性表達(dá)率則為10.00%，沒有1例為強(qiáng)陽性的表達(dá)。VEGF的免疫組化染色的陽性率在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.3 Galectin-3的免疫組化染色的陽性表達(dá)率

Galectin-3的免疫組化染色在甲狀腺乳頭狀癌中陽性例數(shù)為35例，表達(dá)率為83.33%；在良性乳頭狀增生中陽性的表達(dá)率則為17.50%，大多為中等或者弱陽性。Galectin-3的免疫組化染色的陽性率在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 HBME-1、VEGF和Galectin-3等在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生中的表達(dá)情況

2.4 HBME-1、VEGF和Galectin-3等三種腫瘤標(biāo)記物聯(lián)合檢測

將三種腫瘤標(biāo)記物不同組合后進(jìn)行檢測分析發(fā)現(xiàn)，在40例良性乳頭狀增生切片中，有27例(67.50%)三種標(biāo)記物同時有陰性表達(dá)，只有5例(12.50%)出現(xiàn)了兩種標(biāo)記物的同時表達(dá)，沒有1例出現(xiàn)三種標(biāo)記物的同時表達(dá)；在42例甲狀腺乳頭狀癌切片中，兩種標(biāo)記物同時表達(dá)的出現(xiàn)例數(shù)為41例，概率為97.62%，且標(biāo)記物呈中度以上的強(qiáng)陽性表達(dá)；有32例(76.19%)三種標(biāo)記物同時陽性表達(dá)。三種不同的標(biāo)記物在聯(lián)合檢測后，其陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為99.9%和80.2%。見表2。

表2 HBME-1、VEGF和Galectin-3等不同組合在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生中的表達(dá)情況

3 討論

醫(yī)生在進(jìn)行甲狀腺病變的診斷時，常會發(fā)現(xiàn)某些不典型的病例[3]，如甲狀腺腺瘤等形成的伴乳狀增生，會干擾研究者的視線，形成混淆。多數(shù)醫(yī)學(xué)生提出采用免疫組化方法對甲狀腺乳頭狀癌及橋本甲狀腺炎的診斷會起到輔助作用[4]，該方法已取得成效。但是對于使用何種標(biāo)記物以及是否聯(lián)合使用標(biāo)記物，一直眾說紛紜[5]。本研究通過用HBME-1、VEGF和Galectin-3等三種腫瘤標(biāo)記物的檢測，探討其在甲狀腺乳頭狀癌和橋本甲狀腺炎的診斷和鑒別中的臨床價值。

Galectin-3屬于植物血凝素家族的β半乳糖的結(jié)合蛋白，有利于血管的生成，促進(jìn)各種免疫調(diào)節(jié)，炎癥的反應(yīng)，并能夠阻止腫瘤細(xì)胞的凋亡。在本次研究中，Galectin-3的免疫組化染色在甲狀腺乳頭狀癌中陽性的例數(shù)為35例，表達(dá)率為83.33%；在良性乳頭狀增生中陽性表達(dá)率則為17.50%，大多為中等或者弱陽性。Galectin-3的免疫組化染色的陽性率在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生的差異有統(tǒng)計學(xué)意義。這表明Galectin-3的表達(dá)情況可以給甲狀腺乳頭狀癌及橋本甲狀腺炎的診斷提供良好的參考價值。

HBME-1即人的骨髓內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物，屬于間皮瘤的相關(guān)抗體，在其間多呈強(qiáng)陽性表達(dá)。HBME-1參與腫瘤血管的形成、血管的生長和轉(zhuǎn)移等過程。通過觀察可知，HBME-1的免疫組化染色在甲狀腺乳頭狀癌中大多為中度以上的強(qiáng)陽性表達(dá)，其陽性率為95.24%；良性乳頭狀增生中，HBME-1的免疫組化染色大多為陰性。HBME-1的免疫組化染色的陽性率在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生的差異有統(tǒng)計學(xué)意義。這提示HBME-1的檢測有利于鑒別甲狀腺的良性以及惡性的乳頭狀增生性病變。所以，當(dāng)甲狀腺結(jié)節(jié)的診斷面臨困境時就可以提出將其作為一個重要的參考指標(biāo)，若HBME-1在細(xì)胞膜上表達(dá)呈強(qiáng)陽性，則應(yīng)該細(xì)致閱片從而排除惡變的可能性。

VEGF是具有高度特異性的有絲分裂素，可以有力地加強(qiáng)血管生成，屬于血管生成因子[6]。目前臨床認(rèn)為VEGF參與了甲狀腺癌的生長和轉(zhuǎn)移，在甲狀腺癌的發(fā)展中具有極其重要的作用[7]。本研究中，VEGF的免疫組化染色在甲狀腺乳頭狀癌中陽性表達(dá)率為90.48%；在良性乳頭狀增生中陽性表達(dá)率則為10.00%，沒有1例為強(qiáng)陽性的表達(dá)。VEGF的免疫組化染色的陽性率在甲狀腺乳頭狀癌和良性乳頭狀增生之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義?？梢?，VEGF的高表達(dá)是一種疾病活躍的典型標(biāo)志，其表達(dá)的水平越高，惡性程度也就越高。VEGF可以作為甲狀腺良性病變和惡性病變的鑒別診斷手段之一。將三種腫瘤標(biāo)記物不同組合后進(jìn)行檢測分析發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合應(yīng)用三種腫瘤標(biāo)記物具有相較于兩種聯(lián)用或者單個應(yīng)用更高的特異性。

綜上所述，采用三種腫瘤標(biāo)記物同時表達(dá)作為惡性標(biāo)準(zhǔn)，其準(zhǔn)確度最高，對于橋本甲狀腺炎和甲狀腺乳頭狀癌的臨床診治具有更高的應(yīng)用價值。

[1] 孫輝，劉曉莉.甲狀腺癌規(guī)范化診治理念更新及其意義[J].中國實(shí)用外科雜志，2015，1(2):72-75.

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[3] 羅勝蘭，俞敏，龔巍巍.甲狀腺癌的流行現(xiàn)況及其危險因素[J].中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2013，4(5):317-322.

[4] 阿勒哈，孟慶彬，于健春，等.甲狀腺癌分子發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，2013，4(8):382-385.

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[6] 李京佳，林相國，許濤，等.VEGF家族及其在腫瘤生長中作用的研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，4(7):777-779，701.

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