趙妮妮彭浩

（1南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳醫(yī)院口腔科廣東 深圳 518101；2遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)手術(shù)學(xué)實(shí)驗(yàn)室廣東 珠海 519000）

橙皮苷抑制人舌癌Tca8113細(xì)胞體外增殖的實(shí)驗(yàn)觀察

趙妮妮1彭浩2

（1南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳醫(yī)院口腔科廣東 深圳 518101；2遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)手術(shù)學(xué)實(shí)驗(yàn)室廣東 珠海 519000）

橙皮苷；舌癌細(xì)胞；體外增殖

橙皮苷（Hesperidin）是由蕓香糖和橙皮素組成的糖苷，屬于二氫黃酮衍生物，被證實(shí)有一定的惡性腫瘤細(xì)胞殺滅作用，而未見嚴(yán)重的不良反應(yīng)。張冬松等[1]報(bào)道，橙皮苷能抑制多種體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞如乳腺癌、肺癌等的生長和增殖。故本項(xiàng)目將橙皮苷引入南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳醫(yī)院口腔科抗舌癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究，旨在為臨床用藥提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料舌癌細(xì)胞株Tca-8113由西安第四軍醫(yī)大學(xué)細(xì)胞中心提供；胎牛血清購自青島生物制藥有限公司；橙皮苷由南方醫(yī)科大學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室提純。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法稀釋處于對(duì)數(shù)生長期的Tca8113細(xì)胞濃度至5.0×103/L并依次接種在96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔180 μl，培養(yǎng)1 d讓細(xì)胞貼壁生長后，分別加入20 μl終濃度為10、20、40、80、100 μmol/L的橙皮苷。每組各設(shè)5個(gè)平行復(fù)孔，放入培養(yǎng)箱中孵育3 d。再分別采用MTT法測(cè)定各孔吸光度值（A）。細(xì)胞的生長抑制率（IR）=（1－用藥組A值/對(duì)照組A值）×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Excel軟件進(jìn)行原始數(shù)據(jù)錄入，用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行一般描述和方差分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

采用作圖法得出半數(shù)抑制濃度IC50為84.42 μmol/L。線性相關(guān)分析表明隨著橙皮苷的濃度的升高，對(duì)Tca8113細(xì)胞的抑制率也越高（r=0.904，P＜0.05）。見表1。

表1 各濃度橙皮苷對(duì)舌癌Tca-8113細(xì)胞抑制率比較（±s）

表1 各濃度橙皮苷對(duì)舌癌Tca-8113細(xì)胞抑制率比較（±s）

不同濃度橙皮苷IR（%）10 μmol/L 20 μmol/L 40 μmol/L 80 μmol/L 100 μmol/L 11.24±1.25 20.78±3.56 34.11±2.60 44.93±2.91 71.72±3.33

3 討論

據(jù)WTO統(tǒng)計(jì)，2015年全球有大于60萬的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌患者被明確診斷，85%以上為舌鱗狀細(xì)胞癌，并且近10年以來舌癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。新輔助化療目前已經(jīng)成為各類惡性腫瘤綜合治療方案中的重要組成部分。絕大多數(shù)化療藥物都有很強(qiáng)的毒副作用，年幼或高齡患者往往難以耐受，中途不得不中斷化療。而從植物中提取出的有效抗癌成分由于具有毒副作用小、價(jià)格親民而得到越來越多的重視。橙皮苷是從蕓香科、蝶形花科、白樺、豆科、唇形花科、柑橘屬植物體中提取而來，來源廣泛。Kamaraj等[2]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，橙皮苷對(duì)人乳腺癌、肝癌、直腸癌、腎癌、肺癌等腫瘤細(xì)胞均存在較為顯著的抑制生長并誘導(dǎo)凋亡的效果。除此之外，Ohashi等[3]指出，橙皮苷還能拮抗環(huán)磷酰胺、噻替哌、呋喃氟尿嘧啶等常用化療藥物的致突變副作用，而且還可以減輕環(huán)磷酰胺所致的雄性小鼠生殖細(xì)胞損傷程度（P＜0.05），提純技術(shù)也已較為成熟，適合商業(yè)化生產(chǎn)，是一種非常具有發(fā)展前景的抗腫瘤中藥提取物。

本研究結(jié)果顯示，橙皮苷對(duì)舌癌細(xì)胞具有明顯的抑制效應(yīng)（P＜0.05），且呈濃度依賴性，提示臨床應(yīng)用時(shí)在保證毒副作用能夠耐受的前提下盡量提高應(yīng)用濃度。另外有國外學(xué)者在文獻(xiàn)中指出，橙皮苷可以有效降低舌癌Tca8113細(xì)胞的克隆形成率，提示未來橙皮苷具有降低患者舌癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率應(yīng)用潛力，藥物價(jià)值包括控制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、縮小外科切除范圍、提高患者術(shù)后生存質(zhì)量以及緩解手術(shù)、放化療等帶來的外觀殘缺、功能喪失所造成的負(fù)性情緒等。然而本項(xiàng)目屬于體外實(shí)驗(yàn)，在人體內(nèi)是否具有類似效果，有待下一步深入研究。

[1]張冬松,高慧嬡,吳立軍.橙皮苷的藥理活性研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代中藥,2006,8(7):25-27

[2]Kamaraj S,Anandakumar P,Jagan S,et a1.Modulatory effect of hesperidinonbenzo(a)pyreneinducedexperimentallung carcinogenesis with reference to COX-2,MMP-2 and MMP-9[J].Eur J Pharmacol,2010,649(1-3):320-327

[3]Ohashi T,Ohnishi M,Tanahashi S,et a1.Efficacy and toxicity of concurrent chemoradiotherapy with nedaplatin and S-1 for head and neck cancer[J].Jpn J Clin Oncol,2011,41(3):348-352

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10.13638/j.issn.1671-4040.2017.03.102

2017-01-09）