李曉瑩

摘要：目的 建立高效液相色譜法測定食品中胭脂蟲紅的方法。方法 采用提取的溶液為：鹽酸和甲醇，檢測儀器為：高效液相色譜和二極管陣列，提取和檢測時(shí)保留時(shí)間定性，定量采用外標(biāo)法。結(jié)果 在100 mg/L時(shí)線性關(guān)系良好，當(dāng)線性相關(guān)系數(shù)>0.999，方法檢出限為0.0004g/kg，方法定量限為0.001g/kg，加標(biāo)回收率是92.3%～105.6%，0.7%～6.5%是相對標(biāo)準(zhǔn)偏差數(shù)值。結(jié)論 采用本文方法的特點(diǎn)是簡單實(shí)用，該方法適合各類食品中胭脂蟲紅的檢測。

關(guān)鍵詞：食品；胭脂蟲紅；高效液；相色；譜測定法

胭脂蟲紅，英文名是：carmine cochineal，中南美洲、墨西哥等地的蒽醌類天然紅色素是胭脂蟲紅的原產(chǎn)地，胭脂紅酸，英文名：camlinicacid，胭脂紅酸屬于活性成分，胭脂紅酸應(yīng)用于食品、化妝產(chǎn)品品、藥類產(chǎn)品、紡織產(chǎn)品，應(yīng)用廣泛，胭脂蟲紅是安全和天然的色素。之一而用于眼部化妝品中。提取胭脂蟲紅色素的原料是寄生在仙人掌類植物上的雌性胭脂蟲。在各類食品中的使用量方面，我國已做出了具體規(guī)定，但是還沒有建立胭脂蟲紅國家檢驗(yàn)，還沒有建立胭脂蟲紅行業(yè)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，對于胭脂蟲紅的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢驗(yàn)方法也沒有做出具體規(guī)定。所以，對于對食品中胭脂蟲紅的含量檢測中，應(yīng)當(dāng)建立穩(wěn)定可靠的方法，為其在食品中的含量檢測提供科學(xué)的指導(dǎo)。根據(jù)我國的具體狀況，我們所采用的檢測方法的特點(diǎn)是實(shí)用簡單，這種方法就是胭脂蟲紅的高效液相色譜測定法。

1資料與方法

1.1儀管與試劑 島津高效液相色譜儀，規(guī)格為LC-20AD，二極管陣列檢測器、恒溫水浴鍋、均質(zhì)機(jī)、粉碎機(jī)、電子天平、離心機(jī)、0.22 μm尼龍膜作為輔助儀器；胭脂蟲紅標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，純度≥98%，用胭脂紅酸來計(jì)算，德國Dr.EhrenstorferGmb H為其采購地；甲醇，就是色譜純，乙腈，指色譜純；鹽酸溶液2 mol/L：準(zhǔn)確量取鹽酸，容量為20鹽酸，注入水中，水量為100 ml，將其混勻；甲酸溶液：準(zhǔn)確吸取甲酸，容量為9 ml甲酸，將其倒置容量瓶中，體積為1000 ml，用水定容，之后將其混勻[1]。

1.2方法

1.2.1色譜條件 ①迪馬 Diamonsil C18；②反相色譜柱，值為：250 mm×4.6 mm，5 μm；流動相：乙腈∶甲酸溶液；脫洗流速為0.8 ml/min；柱溫為35℃；進(jìn)樣量為10 μl；495 nm為檢測波長。

1.2.2樣品前處理

1.2.2.1配制酒和飲料 準(zhǔn)確稱取約2 g試樣于具塞比色管中，其容量為50 ml，加入鹽酸溶液，容量為10 ml，以甲醇定容，混勻至數(shù)值為25 ml，封緊蓋子應(yīng)用封口膜，80 ℃水浴30 min。水浴后，把試樣溫度冷切與室溫相同，并靜置，時(shí)間為30 min，吸取上清液，過0.22 μm尼龍膜上機(jī)測定。

1.2.2.2冰激凌 把試樣放置在室內(nèi)，等其融化成液體，將試樣攪勻，按方法制備，方法為1.2.2.1。將其水浴，后將其冷卻和室溫相同，其次以12000 r/min，5 min為離心值，放入冰箱，溫度為 4 ℃；取出靜置，待和室溫相同后，吸取上清液過0.22 μm尼龍膜上機(jī)測定。

1.2.2.3糖果 將糖果試樣粉碎，粉碎儀器為粉碎機(jī)，按方法制備，方法為1.2.2.1。水浴后，待冷切和室溫相同后，以12000 r/min，5 min為離心值，吸取上清液過 0.22 μm尼龍膜上機(jī)測定。

1.2.2.4熟肉和膨化食品 將糖果試樣粉碎，按方法制備，方法為1.2.2.1。將其水浴，后將其冷卻和室溫相同，其次以12 000 r/min，5 min為離心值，放入冰箱，溫度為 4 ℃；取出靜置，待和室溫相同后，吸取上清液過0.22 μm尼龍膜上機(jī)測定[2]。

1.2.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，重量為10.0 mg，溶解采用甲醇溶，容切值至50 ml時(shí)，此溶液濃度為200 mg/L，在溫度為4℃中它可儲存2個月的時(shí)間。

1.2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 依次準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液，吸至具塞比色管中，具塞比色管體積為于50 ml，加入鹽酸溶液同該試樣處理，處理方法是1.2.2.1，鹽酸溶液容量為10 ml，之后上機(jī)測定。縱坐標(biāo)是胭脂蟲紅峰面積，橫坐標(biāo)是胭脂蟲紅濃度，單位為mg/L。

1.2.5結(jié)果 試樣中胭脂蟲紅含量的計(jì)算公式為：試樣中胭脂蟲紅含量為X-，（g/kg）為胭脂紅酸計(jì)，為試樣溶液中胭脂蟲紅濃度，一定容體積為V，單位為ml，取樣量為m，單位為g。

1.2.6回收率和精密度試驗(yàn) 選取GB 2760-2014 中所列胭脂蟲紅限量值，添加4個濃度：低、中、高和與檢出限靠近，在6 種試樣中進(jìn)行加標(biāo)回收，應(yīng)用精密度試驗(yàn)于6組試樣中。對樣品進(jìn)行分組，每種樣分為4個組次，7份樣品在每組中稱取。第一組量為0.001/kg，第二組是0.25/kg，第三組是0.50/kg，第四組是1.0 g/kg，加入胭脂蟲紅標(biāo)準(zhǔn)溶液到這4組樣品中，0.001 g/kg數(shù)值為靠近檢出限濃度，處理和測定方法與此前一樣。

1.2.7方法檢出限 使用標(biāo)準(zhǔn)曲線最低點(diǎn)峰高，計(jì)算方法檢出限根據(jù)3倍噪聲計(jì)算方法業(yè)計(jì)算，定量限根據(jù) 10 倍噪聲計(jì)算方法計(jì)算，核對用空白樣品加標(biāo)[3]。

2結(jié)果

2.1線性范圍和回歸方程、檢出限和定量限 范圍是4.0～100 mg/L時(shí)胭脂蟲紅線性關(guān)系良好，線性相關(guān)系全部>0.999，方法檢出限是0.0004g/kg，方法定量限的數(shù)值為0.001 g/kg。

2.2回收率和精密度 樣品回收率范圍數(shù)值是 92.3%～105.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍數(shù)值為0.7%～6.5%。

3討論

3.1代表性樣品的選擇 允許使用胭脂蟲紅的具有代表性的試樣，在進(jìn)行測驗(yàn)過程中按照限量值來測驗(yàn)。

3.2方法適用范圍 本文測定方法適合飲料、糖果、膨化食品等各類食品。

3.3前處理方法的確定 胭脂蟲紅在不同pH值下，胭脂蟲紅所呈現(xiàn)的顏色也不相同同，指在高效液相色譜儀檢測器上的最大吸收峰不同，因此采用向樣品提取液中，向其加入一定量的鹽酸，把酸堿性質(zhì)相異的試樣整體調(diào)至呈酸性，使試樣提取液穩(wěn)定為最大吸收峰，峰值為495 nm，最終建立的測定方法具有穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。

3.4干擾 研究結(jié)果證明苯甲酸和對羥基苯甲酸乙酯以及對羥基苯甲酸丙酯在類似條件下不存在干擾，此外在類似條件不存在干擾還有對羥基苯甲酸丁酯、糖精鈉、安賽蜜等 18 中常見食品添加劑；證明姜黃素、辣椒紅素等天然色素與胭脂蟲紅混用不存在干擾。

參考文獻(xiàn)：

[1]顧正健，黃雅佩，沈陽，等. 高效液相色譜法同時(shí)測定冷飲中禁限用色素胭脂蟲紅酸、喹啉黃和堿性藍(lán)26[J].化學(xué)試劑，2014，04：325-328，342.

[2]付忠源.高效液相色譜法測定豬肉脯中胭脂蟲紅的含量[J]. 理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊），2014，03：368-370.

[3]趙艦，甘源，肖義夫，等.反相高效液相色譜法測定食品中的蘇丹紅1號[A].重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會.重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會2006年學(xué)術(shù)交流會論文集[C].重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會，2006：5.

[4]虞成華， 陸志蕓， 朱偉，等.反相高效液相色譜法測定食品中胭脂蟲紅色素[J].理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊，2012，48（8）：991-992.

[5]郭蒙京，李堃，趙丹瑩.食品中胭脂蟲紅的高效液相色譜測定法[J].職業(yè)與健康，2016，32（18）：2508-2510.

編輯/高章利