王明川+于濤

摘要 [目的]研究不同培養(yǎng)代料對(duì)黑木耳中3種抗氧化物質(zhì)含量的影響，比較3個(gè)品種總酚、總黃酮及黑色素含量的差異。[方法]測(cè)定樣品的總酚、總黃酮和粗黑色素等抗氧化物質(zhì)含量，測(cè)定方法分別為福林酚法、比色法及黑色素堿提法。[結(jié)果]相比傳統(tǒng)椴木代料培養(yǎng)，混合木屑代料種植3種黑木耳的總黃酮含量有顯著的增加，粗黑色素的產(chǎn)量有所減少，而對(duì)黑木耳中的總酚含量影響不大。[結(jié)論]椴木、樺木、柞木等雜木屑培養(yǎng)代料較傳統(tǒng)椴木代料培養(yǎng)在保持對(duì)黑木耳中總酚、粗黑色素產(chǎn)量影響相同的條件下，可獲得更多含量的總黃酮。

關(guān)鍵詞 黑木耳；總黃酮；粗黑色素；抗氧化；總酚

中圖分類號(hào) S646.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）09-0081-02

Abstract [Objective]To study the effects of different culture media on the contents of 3 kinds of antioxidants in Auricularia auricula，and compare the content of total phenolics，total flavonoids and melanin in the 3 varieties.[Method] The content of total phenolic antioxidants，determination of total flavonoids and the crude melanin，determination method were Folin phenol，colorimetry and alkali extraction of melanin.[Results] Compared with the traditional material basswood culture，significantly increased the content of total flavonoids of mixed sawdust substitute planting 3 kinds of Auricularia auricula，crude melanin production decreased，but little effect on the total phenolic content of black fungus.[Conclusion] Basswood，birch，oak and other wood sawdust cultivation material than the traditional culture while maintaining the basswood material total phenolic，Auricularia auricula crude melanin yield under the same conditions，it can get more content of total flavonoids.

Key words Auricularia auricula；total flavonoids；crude melanin；antioxidation；total phenolics

黑木耳（Auricolaria auricula）是木耳科木耳屬可食用的高等膠體真菌，別名木耳、黑木耳、細(xì)木耳，是一種食藥兼用菌，也是我國的傳統(tǒng)食品和出口貿(mào)易食品，具有藥食兩用價(jià)值，具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、扶正固本之功效[1-2]。黑木耳作為子實(shí)體，是一種黑褐色可食用的大型真菌，其含有豐富的黑色素，是中國越來越流行的的“黑色食品”之一。目前，有許多關(guān)于黑色素的分離和特性研究的報(bào)道，并且黑色素被認(rèn)為是黑色素食品中最為重要的功能成分之一，且具有一定的抗氧化性[3-4]，此外黑木耳中還含有黃酮類等抗氧化物質(zhì)[5]。本文針對(duì)不同代料培養(yǎng)對(duì)黑木耳中總酚、總黃酮、黑色素含量等抗氧化成分的影響進(jìn)行研究，其結(jié)果可為提升黑木耳中抗氧化物質(zhì)含量具有一定參考意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

用于試驗(yàn)的3個(gè)品種，即林耳2號(hào)、林耳5號(hào)及對(duì)二筋，均取自牡丹江市林口縣江山嬌木耳基地。對(duì)供試樣品進(jìn)行形態(tài)及感官性狀的初步觀察，結(jié)果如表1所示。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 總酚測(cè)定?？偡雍繙y(cè)定使用福林酚試劑法[6]，選取沒食子酸作標(biāo)液建立標(biāo)曲。稱取0.1 g不同黑木耳干粉作為一個(gè)樣品，每個(gè)樣品加入2 mL甲醇提取液。混合后樣品放置于100 kHz、功率120 W、溫度45 ℃的條件下超聲1 h，過夜靜置。離心10 min，取上清液轉(zhuǎn)移至離心管中，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45 ℃旋蒸至干燥，然后向管內(nèi)加入1 mL甲醇∶水（1∶1）溶液進(jìn)行溶解，離心30 min，上清轉(zhuǎn)入新管中備用。吸取50 μL樣品加入5 mL離心管中，加入450 μL 50%甲醇溶液、0.5 mL福林酚試劑混勻，隨后加入1.5 mL 10%碳酸鈉溶液。將上述混合液放入75 ℃水浴中反應(yīng)10 min，760 nm處測(cè)定吸光光度值?？偡雍恳詍g GAE/g DW表示。

1.2.2 總黃酮測(cè)定?？傸S酮含量測(cè)定采用硝酸鋁比色法[6]，選取蘆丁作為標(biāo)品進(jìn)行標(biāo)曲的測(cè)定。吸取125 μL的樣品（同1.2.1）加入到5 mL離心管中，然后加入5%亞硝酸鈉溶液搖勻，放置6 min；加入10%硝酸鈉鋁溶液125 μL，放置6 min；加入4%氫氧化鈉溶液1.0 mL，然后再加入1.125 mL乙醇定容到2.5 mL。待測(cè)樣品在510 nm處測(cè)定吸光光度值，總黃酮含量以mg GAE/g DW表示。

1.2.3 粗黑色素測(cè)定。粗黑色素含量測(cè)定方法選用堿提法[7]。取2 g待測(cè)品種黑木耳粉末，按料液比1∶30（g∶mL）加入1 mol/L氫氧化鈉溶液按10 000 r/min離心15 min取上清液調(diào)pH值至1.5，80 ℃水浴12 h，酸沉，離心（10 000 r/min，15 min），取沉淀用去離子水洗4次后冷凍干燥獲得黑色素粗品，稱重并記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)代料對(duì)黑木耳抗氧化物質(zhì)含量的影響

由表2可知，同一黑木耳品種，在椴木及雜木2種培養(yǎng)代料中培養(yǎng)其總酚、總黃酮及粗黑色素含量上均有差異。林耳2號(hào)品種中雜木代料培養(yǎng)條件下，總黃酮含量明顯增多，達(dá)到6.86 mg/g，而粗黑色素的含量相比與椴木代料培養(yǎng)有所減少；林耳5號(hào)品種中雜木代料培養(yǎng)，對(duì)總酚、總黃酮含量的影響較小，但可增加粗黑色素含量；相比較于前2個(gè)菌株，對(duì)二筋品種在雜木培養(yǎng)條件下，總黃酮含量明顯減少，這可能與該菌種有關(guān)。

2.2 不同品種在相同代料培養(yǎng)下的抗氧化物質(zhì)含量變化

由表2可知，同一代料下培養(yǎng)，上述3種黑木耳中總酚、總黃酮、粗黑色素的含量上均有差異，其中對(duì)二筋中粗黑色素含量最高，達(dá)到0.63 mg/g。椴木代料培養(yǎng)的林二和對(duì)二筋較林五有更高的總酚含量。雜木代料培養(yǎng)條件下，可獲得較高的總黃酮含量。

2.3 品種與培養(yǎng)代料間交互作用對(duì)黑木耳抗氧化物質(zhì)含量的影響

方差分析結(jié)果（表3）表明，品種及培養(yǎng)代料與品種的交互作用對(duì)木耳黑色素、總酚和總黃酮含量的影響均極為顯著，而培養(yǎng)代料對(duì)黑色素和總黃酮含量的影響顯著，而對(duì)總酚含量的影響不顯著。

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，黑木耳中總酚含量很低，1 g干粉中最多含有0.03 mg。然而相比較酚類含量而言，黑木耳中總黃酮含量較高，可達(dá)6.86 mg/g。雜木混合代料較傳統(tǒng)的椴木培養(yǎng)代料在木耳培養(yǎng)上能有效提高黑木耳中總黃酮的含量。而對(duì)黑木耳黑色素的影響相對(duì)較小。值得指出的是，雜木對(duì)二筋中的總黃酮含量較少，這可能與該菌種有關(guān)。

綜上所述，雜木混合代料在木耳培養(yǎng)中可獲得較高的總黃酮含量，而對(duì)黑木耳中的總酚含量無明顯影響，對(duì)二筋品種較林耳2號(hào)、林耳5號(hào)能產(chǎn)生更多的粗黑色素。雜木屑代料培養(yǎng)可有效節(jié)約成本并提高黑木耳的品質(zhì)，獲取更多的總黃酮和黑色素。

4 參考文獻(xiàn)

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