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        炮制與超微粉碎對水蛭藥效影響的實驗研究

        2017-06-19 19:37:58張中華劉效栓王紅麗
        中醫(yī)研究 2017年3期
        關(guān)鍵詞:小鼠

        張中華,劉效栓,王紅麗

        (甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050)

        ·實驗研究·

        炮制與超微粉碎對水蛭藥效影響的實驗研究

        張中華,劉效栓,王紅麗

        (甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050)

        目的:探討炮制與超微粉碎技術(shù)對水蛭藥效的影響。方法:①采用BT-1500型離心沉降式粒度分布儀測定生、制水蛭超微散粒度。②將50只小鼠隨機分為正常對照組、生水蛭水煎劑組、生水蛭普通散組、生水蛭超微散組、制水蛭超微散組5組,每組10只;生水蛭水煎劑組以0.4 mg/g體質(zhì)量灌胃;3個散劑組臨時配成13 g/L混懸液,以0.2 mg/g體質(zhì)量灌胃;正常對照組以13 g/L生理鹽水灌胃,均1 d 3次,連續(xù)3 d。第4天灌胃1 h后,自小鼠眼內(nèi)眥球后靜脈叢取血,采用毛細(xì)管法測定小鼠的凝血時間,另采用剪尾法測定小鼠剪尾5 mm出血時間。結(jié)果:制水蛭超微散藥效最強,其次為生水蛭超微散,后依次為生水蛭散、水煎劑。結(jié)論:超微粉碎水蛭,特別是采用新法炮制后再行超微粉碎操作,可使藥物口感、氣味明顯改善,藥效提高。

        炮制;超微粉碎;水蛭/藥效學(xué);凝血時間;出血時間;動物;小鼠

        水蛭是一種臨床常用的破血逐瘀中藥[1],按新方法制成的制水蛭在使原藥氣味改善的同時,內(nèi)在成分也得到較好保存,且改善微循環(huán)、抗凝血、降低血小板聚集率等均較傳統(tǒng)燙制水蛭占優(yōu)勢,部分指標(biāo)具保質(zhì)增效趨勢,也優(yōu)于生水蛭[2];但水蛭入湯劑易反胃敗胃,味劣難服,臨床中也有裝膠囊吞服或研末吞服效優(yōu)的報道[3]。隨著現(xiàn)階段超微粉碎技術(shù)研究的進(jìn)步,藥物粒度有所減小,氣味和服用口感得到明顯改善。鑒于超微粉碎和炮制水蛭藥效優(yōu)勢對比報道尚少,本實驗采用BT-1500型離心沉降式粒度分布儀測定生、制水蛭超微散粒度,并觀察其對小鼠抗血栓、抗凝血作用的影響,探討炮制與超微粉碎對水蛭藥效的影響。

        1 材 料

        1.1 動 物

        SPF級健康雄性昆明種小鼠,體質(zhì)量平均(28±3) g,由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供,實驗許可證號:SCXK(甘)2011-0002。

        1.2 儀 器

        BT-1500型離心沉降式粒度分布儀,北京中儀科信科技有限公司產(chǎn)品;BFM-6型倍力微粉機,濟(jì)南倍力粉技術(shù)工程有限公司產(chǎn)品。

        1.3 藥品的制備

        水蛭為寬體金線蛭,由甘肅省中醫(yī)院藥劑科提供。

        1.3.1 水蛭絲的制備

        將混雜在原藥材中的雜質(zhì)細(xì)致挑除,擦凈,取濕紗布予以覆蓋,稍潤后切絲(寬度為2~3 mm)。在切制過程中發(fā)現(xiàn)部分藥材有白色結(jié)晶性粉末于藥材中間填充,無咸、澀味,初步認(rèn)定為石膏。待水蛭切絲晾干后過篩處理,石膏可大部分脫落。將水蛭絲置于紫外線燈下照射45 min,裝瓶密閉待用。

        1.3.2 生水蛭水煎液的制備

        取2.6 g水蛭絲,加入10倍量水,浸泡30 min,輕微煮沸30 min,過濾;取8倍量水加入藥渣,輕微煮沸30 min,過濾;將兩次所得濾液合并,并按100 mL 定容,質(zhì)量分?jǐn)?shù)設(shè)置為26 g/L。

        1.3.3 生水蛭普通散的制備

        粉碎研磨凈水蛭絲,過100目篩。

        1.3.4 生水蛭超微散的制備

        采用BFM-6型倍力微粉機將凈水蛭絲粉碎,設(shè)置出料溫度為35~40 ℃。

        1.3.5 制水蛭超微散的制備

        采用酒潤麩制對凈水蛭絲炮制,采用BFM-6型倍力微粉機粉碎,設(shè)置出料溫度為35~40 ℃。

        分別將上述生水蛭普通散、生水蛭超微散、制水蛭超微散薄層平鋪,放置于紫外線燈下,照射45 min,保存待用。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 統(tǒng)計學(xué)方法

        2.2 水蛭超微散粒度的測定

        參考《中國藥典》[4]相關(guān)規(guī)定。水蛭普通散的粒度平均為(150±6)μm。經(jīng)BT-1500型離心沉降式粒度分布儀對生、制水蛭超微散粒度測定,結(jié)果顯示:經(jīng)BFM-6型倍力微粉機粉碎,生水蛭粒徑可達(dá)10.24 μm,制水蛭粒徑可達(dá)7.97 μm;生、制水蛭的最大粒徑依次是72 μm和24.81 μm,兩者的50%粒度依次是<10 μm、< 8 μm,兩者的90%粒度依次是<50 μm、<23 μm,可達(dá)超微成效。經(jīng)新法行炮制操作后,可為粉碎創(chuàng)造條件,較生水蛭,其粒度呈較小顯示。

        2.3 各組小鼠凝血時間對比

        將50只小鼠隨機分為正常對照組、生水蛭水煎劑組、生水蛭普通散組、生水蛭超微散組、制水蛭超微散組5組,每組10只。生水蛭水煎劑組以0.4 mg/g 體質(zhì)量灌胃;3個散劑組臨時配成13 g/L混懸液,以0.2 mg/g體質(zhì)量灌胃;正常對照組以13 g/L 生理鹽水灌胃。均1 d 3次,連續(xù)3 d。第4天灌胃1 h后,自小鼠眼內(nèi)眥球后靜脈叢取血,采用毛細(xì)管法測定各組小鼠的凝血時間。結(jié)果見表1。水蛭粉碎抗凝效果優(yōu)于水煎劑,超微散抗凝效果優(yōu)于普通散,制水蛭超微散抗凝效果優(yōu)于生水蛭,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果表明:水蛭以超微粉碎和新法炮制后,抗凝活性增強。

        組 別劑量/(mg·g-1)凝血時間/min正常對照組0.42.97±1.42生水蛭水煎劑組0.44.94±2.33*▲△★生水蛭普通散組0.26.24±2.72*#△★生水蛭超微散組0.28.35±2.61*#▲★制水蛭超微散組0.210.37±2.18*#▲△

        注:與正常對照組對比,*P<0.05;與生水蛭水煎劑組對比,#P<0.05;與生水蛭普通散組對比,▲P<0.05;與生水蛭超微散組對比,△P<0.05;與制水蛭超微散組對比,★P<0.05。

        2.4 各組小鼠出血時間對比

        動物分組、給藥劑量同2.3。灌胃3 d,1 d 2次。第4天灌胃1 h后,采用剪尾法,測定各組小鼠剪尾5 mm出血時間,結(jié)果見表2。水蛭粉碎出血時間長于水煎劑,超微散出血時間長于優(yōu)于普通散,制水蛭超微散出血時間長于優(yōu)于生水蛭,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果表明:水蛭以超微粉碎和新法炮制后,可延長出血時間。

        組 別劑量/(mg·g-1)出血時間/min正常對照組0.47.93±2.57生水蛭水煎劑組0.410.29±3.20*▲△★生水蛭普通散組0.212.31±4.09*#△★生水蛭超微散組0.215.41±5.08*#▲★制水蛭超微散組0.217.44±4.56*#▲△

        注:與正常對照組對比,*P<0.05;與生水蛭水煎劑組對比,#P<0.05;與生水蛭普通散組對比,▲P<0.05;與生水蛭超微散組對比,△P<0.05;與制水蛭超微散組對比,★P<0.05。

        3 討 論

        水蛭絲入藥,除方便煎出藥物成分外,還有利于去除水蛭體內(nèi)人為摻入的雜質(zhì),較《中國藥典》切段入藥效果更佳。超微粉碎生水蛭,50%的粒度為1/15普通散,90%的粒度為1/4普通散,且質(zhì)地細(xì)膩,腥味減弱,色變淺,便于吞服[5]。應(yīng)用1/2煎劑劑量,相較水煎劑,有更佳的抗凝血效果,表明超微技術(shù)明顯增強了水蛭藥效[6]。

        采用新法對水蛭炮制后,為其氣味矯正創(chuàng)造了條件,超微粉碎后其粒度較生水蛭小得多,最大粒徑僅24 μm,為生水蛭超微粉的1/3[7]。在3種散劑中,制水蛭超微散組藥效指標(biāo)最優(yōu),有較高的推廣、應(yīng)用價值。雖藥物粒度減小,為溶解吸入、氣味口感改善創(chuàng)造了條件,但也會使穩(wěn)定性和表面能發(fā)生變化;因此制水蛭超微粉的最佳粒度范圍及穩(wěn)定性等問題,還需深入研究[8]。

        [1]呂文海,邱福軍,王作明.炮制與超微粉碎對水蛭藥效影響的初步實驗研究[J].中國中藥雜志,2001,26(4):241-243.

        [2]李冰寧.中藥水蛭鮮品、生品與炮制品的化學(xué)成分及藥理活性的差異性研究[D].北京:北京林業(yè)大學(xué),2010.

        [3]單宇,張伽妹,丁月珠,等.水提取法和仿生提取法研究水蛭不同炮制品的體外抗凝活性[J].中國中藥雜志,2016,41(10):1843-1848.

        [4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[M]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:77

        [5]耿亞.中藥水蛭的藥理藥效及臨床藥用價值研究[J]. 中國醫(yī)藥指南,2013,9(16):685-686.

        [6]王雨林,王實強,劉玉琴,等.不同炮制方法對水蛭中氨基酸及抗凝血酶活性的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2013,33(11):42-45.

        [7]朱華明,付廷明,郭立瑋,等.水蛭的濕法超微粉碎提取及其工藝優(yōu)化[J].中草藥,2013,44(15):2079-2084.

        [8]張玉娟,李兆明,田景振. 注射用水蛭低肽凍干粉針劑藥效學(xué)研究[J].藥學(xué)研究,2013,32(2):77-79.

        (編輯 陶 珠)

        1001-6910(2017)03-0073-03

        R283

        B

        10.3969/j.issn.1001-6910.2017.03.33

        2016-09-22;

        2017-02-06

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