肖翠娥+彭鵬++胡時均

摘 要：為分析A、B、C 3個廠家O型口蹄疫合成肽苗的免疫效果，將80頭蘇太雜交仔豬隨機分成4組，I組為空白對照，II～IV組按廠家推薦劑量分別肌肉注射3種不同的O型口蹄疫合成肽苗，每組編號為1～10的供試豬45日齡免疫一次，編號為11～20的供試豬45日齡和73日齡分別免疫一次。結(jié)果表明，3個廠家合成肽苗免疫副反應(yīng)均較??；3種合成肽苗抗體合格率二免較一免均無顯著差異（P>0.05），但B、C廠家合成肽苗可使機體在短時間內(nèi)獲得較高水平的抗體滴度，且維持時間較長。

關(guān)鍵詞：豬；O型口蹄疫；合成肽苗；抗體

中圖分類號 S858.28 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）10-0133-02

豬口蹄疫是目前危害養(yǎng)豬業(yè)較為嚴重的一種烈性傳染病。近年來，我國口蹄疫推行強制免疫制度，但由于免疫效果并不理想，應(yīng)激反應(yīng)大，導(dǎo)致重復(fù)加強免疫，工作量大，養(yǎng)殖戶積極性不高，使得推行口蹄疫免疫遇到了一定困難。為此，本研究對當?shù)仞B(yǎng)殖戶常用的O型口蹄疫合成肽苗進行免疫效果評估，以期從中篩選出一種或多種免疫副反應(yīng)小、免疫抗體效價高的疫苗，為O型口蹄疫防控提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料 A廠家豬O型口蹄疫合成肽苗、B廠家豬O型口蹄疫合成肽苗、C廠家豬O型口蹄疫合成肽苗。VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測試劑盒（上海優(yōu)耐特，批號：201604001）、口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體檢測試劑盒（蘭州獸醫(yī)研究所，批號：2016012031）。注射器、保定繩索、采血管、離心機、酶標儀、單多道移液器、80頭蘇太雜交仔豬。

1.2 方法

1.2.1 供試豬分組 80頭仔豬隨機分成4組，每組20頭，組編號分別為I、II、III、IV。所有供試豬統(tǒng)一飼養(yǎng)管理，禁用免疫抑制和免疫增強類藥物。

1.2.2 供試豬免疫 為減少免疫抑制對實驗的干擾，所有供試豬28日齡免疫高致病性豬藍耳病疫苗，35日齡免疫豬圓環(huán)病毒疫苗。I組為空白對照，II～IV組按廠家推薦劑量分別肌肉注射3種不同的O型口蹄疫合成肽苗，每組編號為1～10的供試豬免疫1次（45日齡免疫一次，簡稱一免），編號為11～20的供試豬免疫2次（45日齡首免，73日齡再次免疫，簡稱二免）。

1.2.3 供試豬的抗體效價檢測 45日齡、73日齡、101日齡、129日齡、157日齡分別采血。先用口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試劑盒對血樣進行檢測，如口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測呈陽性，則說明該供試豬已感染口蹄疫，該血樣予以排除，然后用相應(yīng)試劑盒檢測陰性血樣的抗體效價。供試豬免疫O型口蹄疫合成肽苗后7d內(nèi)連續(xù)觀察豬只出現(xiàn)的不良反應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同廠家O型口蹄疫合成肽苗免疫副反應(yīng)情況 由表1可知，B廠家合成肽苗對豬只未產(chǎn)生副反應(yīng)，A、C廠家合成肽苗雖對豬只產(chǎn)生副反應(yīng)（10.00%、13.33%），但與B廠家合成肽苗無顯著差異（P>0.05）。從一免和二免來看，C廠家合成肽苗二免較一免的副反應(yīng)率顯著升高（P<0.05），其他廠家合成肽苗一免和二免的副反應(yīng)率無顯著（表1）。

2.2 不同廠家O型口蹄疫合成肽苗免疫抗體檢測情況 45日齡抗體檢測結(jié)果顯示，供試豬均存在一定滴度的母源抗體，除B廠家合成肽苗二免實驗組的母源抗體平均滴度略高于陽性臨界值，其他各組均低于陽性臨界值。從一免來看，A、B、C三廠家合成肽苗抗體平均滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢，并于157日齡達到峰值（表2）。B、C兩廠家合成肽苗一免后各階段抗體合率均維持在80%以上，A廠家合成肽苗一免后抗體滴度雖呈增長趨勢，但73日齡抗體合格率僅50%，直到101日齡抗體合格率才達到 90%，那么45～101日齡期間可能存在免疫保護率不高的問題。從二免來看，A、B、C三廠家合成肽苗抗體平均滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢，并于157日齡達到峰值。3種合成肽苗二免較一免抗體平均滴度均有所升高，其中A、B兩廠家合成肽苗二免較一免抗體平均滴度顯著升高（P<0.05），但3種合成肽苗抗體合格率二免較一免均無顯著差異（P>0.05）。

3 討論

試驗過程中，A、C兩廠家合成肽苗對少數(shù)供試豬產(chǎn)生了諸如短時間發(fā)熱和減料等輕微副反應(yīng)[1]，但副反應(yīng)均在短時間內(nèi)消除，且三廠家合成肽苗副反應(yīng)率無顯著差異，這說明3種合成肽苗用于豬口蹄疫預(yù)防免疫是相對安全、穩(wěn)定的。

三廠家合成肽苗在一免或二免后，抗體滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢，B、C兩廠家合成肽苗一免和二免兩種免疫程序均能達到較為理想的免疫效果，但從經(jīng)濟和勞動強度角度出發(fā)，進行一免即可。A廠家合成肽苗雖101日齡以后能達到較高的抗體滴度和抗體合格率，但前期抗體平均滴度和抗體合格率均不高，存在感染O型口蹄疫病毒的風(fēng)險。

試驗過程中，筆者發(fā)現(xiàn)無論是一免或二免后，抗體滴度隨供試豬日齡呈緩慢增長，直至整個試驗結(jié)束，這似乎不符合抗體動態(tài)變化的規(guī)律[2]，可能原因，一是母源抗體的影響，但許多研究已表明，母源抗體的半衰期為20d左右，而本實驗45日齡開始接種，同時檢測結(jié)果也表明供試豬45日齡的母源抗體水平都不是很高；另一個原因可能是供試豬患有免疫抑制性疫病，影響了機體的免疫應(yīng)答，個別疫苗的效果不佳可能與此有關(guān)。

參考文獻

[1]朱玉華，陳亮.生豬注射口蹄疫滅火苗引起免疫應(yīng)激的防治[J].安徽農(nóng)學(xué)通報，2007，13（18）：223.

[2]司興奎，羅汝灶，戴宜發(fā)，等.豬O型合成肽與油乳滅活疫苗免疫后抗體水平的比較[J].中國獸醫(yī)雜志，2010，46（5）：6-9.

（責(zé)編：張宏民）