向成玉

(西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科； 四川 瀘州 646000)

A項BacT/ALERT 3D與B項BACTEC FX的血培養(yǎng)系統(tǒng)比對及性能評價

向成玉

(西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科； 四川 瀘州 646000)

目的 對兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)進行性能驗證，探討快速準(zhǔn)確地做出病原學(xué)診斷的方法。方法 兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)分成需氧瓶組、厭氧瓶組和兒童瓶組，將配置好的不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)菌懸液按要求分別注入血培養(yǎng)瓶內(nèi)，按要求放入自動化儀器內(nèi)進行培養(yǎng)，然后記錄兩個儀器每個瓶子的報陽時間，實驗結(jié)束后對不同系統(tǒng)學(xué)培養(yǎng)瓶檢出時間進行比較。結(jié)果 在需氧瓶中，白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌和B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105及10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間早于BacT/ALERT 3D；在厭氧瓶中，肺炎克雷伯菌、糞腸球菌和B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105及103CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間早于BacT/ALERT 3D；在兒童瓶中，白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌和B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105、103及10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間均早于BacT/ALERT 3D(P< 0.05)。結(jié)論 兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)均能有效監(jiān)測由細(xì)菌或者真菌引起的血液感染，BACTEC FX血培養(yǎng)瓶檢出時間多數(shù)早于BacT/ALERT 3D血培養(yǎng)瓶。

血培養(yǎng)；檢出時間；菌血癥

血培養(yǎng)是確立敗血癥診斷的重要依據(jù)，可以快速診斷嚴(yán)重威脅患者生命安全的菌血癥、敗血癥，為臨床上及時準(zhǔn)確治療提供支持。近年來，隨著微生物學(xué)及檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展，自動化、智能化的自動血培養(yǎng)儀運用越來越廣泛[1]。最近幾十年抗生素的廣泛使用，大量的耐藥菌開始出現(xiàn)，給治療造成很大的困難[2]，而血培養(yǎng)通過診斷敗血癥患者血液中的病原菌種類，達(dá)到針對性治療抗菌，從而有效地提高患者的治愈率，降低死亡率[3]。因此越來越多的高效率、高準(zhǔn)確率的自動血培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)運而生[4]。本研究采用目前自動血培養(yǎng)儀器中最常見的法國梅里埃公司BacT/ALERT 3D與美國BD公司BACTEC FX血培養(yǎng)系統(tǒng)，比較兩種系統(tǒng)的檢出能力，評價兩種儀器各自的特點差異。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 法國梅里埃公司的BacT/ALERT 3D全自動培養(yǎng)系統(tǒng)及其配套的需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶，美國BD公司的BACTEC FX全自動培養(yǎng)系統(tǒng)及其配套的需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶。

1.2 標(biāo)本來源 檢驗科微生物室用于質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)菌株，為ATCC菌株。

1.3 菌液配置 將實驗菌株配置成0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙?，按需要用無菌生理鹽水稀釋成107、105、103及10 CFU/ml的濃度。然后將10 CFU/ml菌懸液接種培養(yǎng)瓶之前，取10 UL菌液接種于血平板來驗證菌液濃度是否合格。

1.4 檢測方法 將白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞場球菌、B群鏈球菌，分別配制成上面4個濃度梯度，分別將每個菌的每個濃度的菌懸液分別按要求打入BacT/ALERT的需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶和美國BD公司的需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶，然后按要求放入BacT/ALERT 3D和BACTEC FXBACTEC FX自動培養(yǎng)儀器中，讀取各機器每個瓶子的報陽時間并記錄整理。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 需氧瓶中不同細(xì)菌在不同濃度的檢出時間比較 白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌和B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105及10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間均早于BacT/ALERT 3D(P< 0.05)；細(xì)菌濃度為103CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間與BacT/ALERT 3D比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05)，見表1。

表1 需氧瓶中不同種類細(xì)菌在不同濃度檢出時間比較 (h)

*與BacT/ALERT 3D比較，P< 0.05

2.2 厭氧瓶中不同細(xì)菌在不同濃度的檢出時間比較 肺炎克雷伯菌、糞腸球菌和B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105及103CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間均早于BacT/ALERT 3D(P< 0.05)；細(xì)菌濃度為10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間與BacT/ALERT 3D比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05)，見表2。

表2 厭氧瓶中不同種類細(xì)菌在不同濃度檢出時間比較 (h)

*與BacT/ALERT 3D比較，P< 0.05

2.3 兒童瓶中不同細(xì)菌在不同濃度的檢出時間比較 白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌和B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105、103及10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間均早于BacT/ALERT 3D(P< 0.05)，見表3。

表3 兒童瓶中不同種類細(xì)菌在不同濃度檢出時間比較 (h)

3 討論

Bact/Alert 3D全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)和Bactec FX血培養(yǎng)系統(tǒng)已經(jīng)廣泛用于臨床實驗室細(xì)菌檢測，它們均將培養(yǎng)、監(jiān)測結(jié)合，排除人工干預(yù)，從而降低了污染概率，通過實時匯報陽性結(jié)果來提高血培養(yǎng)檢測的陽性率，然而單獨存在的血培養(yǎng)系統(tǒng)并不能滿足臨床要求[7]。研究發(fā)現(xiàn)，血培養(yǎng)在檢測陽性率上仍有很多缺點，包括患者的抽血時間、抽血量、血液中細(xì)菌種類、含菌量、抗菌藥物的使用以及培養(yǎng)基的成分均影響檢測結(jié)果[8]。為了改變這種狀況，國際上普遍采用雙側(cè)雙瓶兩種培養(yǎng)方案，這樣可以進一步增加檢測結(jié)果的陽性率，降低污染概率[9]。王穎等[10]通過比較Bactec FX以及Bact/Alert 3D兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)檢測菌血癥的能力和特點發(fā)現(xiàn)：臨床分離的322株細(xì)菌當(dāng)中，Bactec FX的檢出時間要好于Bact/Alert 3D系統(tǒng)，特別是在非發(fā)酵菌的檢測中尤為明顯。此次試驗研究我們采用兩種不同原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)加上需氧培養(yǎng)瓶、兒童瓶和厭氧瓶進行細(xì)菌培養(yǎng)，通過綜合不同培養(yǎng)瓶的優(yōu)勢，增加檢測范圍，提高檢出陽性率。我們分別對比在需氧瓶、厭氧瓶和兒童瓶情況下兩種儀器對不同細(xì)菌在不同濃度情況下的檢出能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在需氧瓶中，白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌、B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105及10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間早于BacT/ALERT 3D，說明在以上三種濃度情況下BACTEC FX檢出性能比BacT/ALERT 3D高。在厭氧瓶中，肺炎克雷伯菌、糞腸球菌、B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105及103CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間早于BacT/ALERT 3D，說明在以上三種濃度情況下BACTEC FX檢出性能比BacT/ALERT 3D高。在兒童瓶中，白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌、B群鏈球菌在細(xì)菌濃度為107、105、103及10 CFU/ml時，BACTEC FX檢出時間均早于BacT/ALERT 3D，可以說明在以上濃度情況下BACTEC FX檢出性能比BacT/ALERT 3D高。由此可以發(fā)現(xiàn)BACTEC FX血培養(yǎng)瓶檢出時間多數(shù)短于BacT/ALERT 3D血培養(yǎng)瓶，BACTEC FX血培養(yǎng)系統(tǒng)能為臨床更快的提供檢查結(jié)果，便于臨床的診斷，治療用藥，這與既往報道一致[11]。

綜上所述，兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)均能有效檢測出由真菌或者細(xì)菌引起的血液感染，BACTEC FX血培養(yǎng)瓶檢出時間多數(shù)短于BacT/ALERT 3D血培養(yǎng)瓶。

[1] 程彥國，張軍民，趙莉莉，等.全自動培養(yǎng)儀的臨床應(yīng)用及評價[J].中華醫(yī)學(xué)檢臉雜志，1999，22(1)：74.

[2] 王樞群，張邦與.醫(yī)院感染學(xué)[M].重慶：科學(xué)技術(shù)出版社重慶分社，1990：300.

[3] 蔣燕群，衛(wèi)國，倪語星.應(yīng)用全自動血培養(yǎng)儀提高血液無菌體液培養(yǎng)陽性率[J].中華醫(yī)學(xué)檢臉雜志，1999，22(1)：71.

[4] Jekarl DW，Lee SY，Lee S，et al.Comparison of the Bactec Fx Plus，Mycosis IC/F，Mycosis/F Lytic blood culture media and the BacT/Alert 3D FA media for detection of Candida species in seeded blood culture specimens containing therapeutic peak levels of fluconazole[J].Journal of clinical laboratory analysis，2012，26(6)：412-419.

[5] 孫景勇，周敏，倪語星.延遲放瓶對兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)BacT/AlERT3D與BACTEC9120陽性檢出率的影響[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009，19(16)：2210-2212.

[6] 麥珍，朱雄，陳海，等.BACTEC FX 全自動血培養(yǎng)儀陽性結(jié)果分析及應(yīng)用評價[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24(18)：4674-4676.

[7] Miyake N，Chong Y，Nishida R，et al.A dramatic increase in the positive blood culture rates of Helicobacter cinaedi：the evidence of differential detection abilities between the Bactec and BacT/Alert systems[J].Diagnostic microbiology and infectious disease，2015，83(3)：232-233.

[8] 黃春紅，王云英.BacT/Alert3D型全自動血培養(yǎng)儀性能評價[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(19)：2421-2422.

[9] Roh KH，Kim JY，Kim HN，et al.Evaluation of BACTEC Plus aerobic and anaerobic blood culture bottles and BacT/Alert FAN aerobic and anaerobic blood culture bottles for the detection of bacteremia in ICU patients[J].Diagnostic microbiology and infectious disease，2012，73(3)：239-242.

[10]王穎，史利寧，范明，等.Bactec FX和Bact/Alert 3D兩種血培養(yǎng)系統(tǒng)對菌血癥的檢出性能分析[J].臨床檢驗雜志，2012，30(1)：13-15.

[11]尤濤，康煒，Bact/ALER和伯泰血培養(yǎng)瓶對模擬菌血癥標(biāo)本檢測能力對比分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2010，25(1)：107-108.

Comparison of performance between two blood culture systems：BacT/ALERT 3D B and BACTEC FX A

XIANG Cheng-yu

(Department of Clinical Laboratory，Affiliated Hospital，Southwest Medical University，Luzhou 646000，China)

Objective To compare the performance evaluation of two blood culture systems and explore the methods of fast accurate etiologic diagnosis.Methods The both blood culture systems were divided into aerobic，anaerobic and children groups.The liquid of standard bacteria were diluted to different concentrations and cultivated according to requirements of the automation instruments.Then，the bacteria detection time of each bottle was recorded.The bacteria detection time was compared between the two systems.Results In the aerobic group，the bacteria detection time of Candida albicans，Klebsiella pneumonia，Enterococcus faecalis and group B streptococci at the concentrations of 107CFU/ml，105CFU/ml and 10 CFU/ml in the BACTEC FX system was earlier than that in the BacT/ALERT 3D system.In the anaerobic group，the bacteria detection time of Klebsiella pneumonia，Enterococcus faecalis and group B streptococci at the concentrations of 107CFU/ml，105CFU/ml and 103CFU/ml in the BACTEC FX system was earlier than that of BacT/ALERT 3D system.In the children group，the bacteria detection time of Candida albicans，Klebsiella pneumonia，Enterococcus faecalis and group B streptococci at the concentrations of 107CFU/ml，105CFU/ml，103CFU/ml and 10 CFU/ml in the BACTEC FX system was earlier than that in the BacT/ALERT 3D system.All the differences were statistically significant(P< 0.05).Conclusion The both blood culture systems can effectively detect the blood stream infections by the bacteria and fungi.The BACTEC FX system needs less time in detecting the pathogens than BacT/ALERT 3D system does.

Blood culture； Detection time； Bacteremia

R446.11+2

A

1672-6170(2017)01-0097-03

2016-01-09；

2016-06-24)