羅祖強，莊志泉，董為松，張 凱

男性乳腺癌組織中p57kip2、ER、PR的表達及其意義

羅祖強1，莊志泉2，董為松1，張 凱1

目的 探討p57kip2、ER、PR在男性乳腺癌(male breast cancer, MBC)中的表達及意義。方法 采用免疫組化EliVision法檢測50例MBC、20例男性乳腺導(dǎo)管內(nèi)原位癌(ductal carcinoma in situ, DCIS)和20例男性乳腺發(fā)育(gynecomastia, GYM)組織中p57kip2、ER、PR蛋白的表達。結(jié)果 p57kip2蛋白在GYM中的表達最高，在MBC中的表達最低；MBC與DCIS、GYM中的表達相比，差異有顯著性(P<0.05)；p57kip2蛋白表達在DCIS與GYM中相比，差異有顯著性(P<0.05)。ER、PR蛋白在GYM中的表達最高，在MBC中的表達最低；ER、PR蛋白表達在MBC與GYM中相比，差異有顯著性(P<0.05)。在MBC中，三者表達均與臨床分期、組織學(xué)分級有關(guān)(P<0.05)，p57kip2蛋白表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；p57kip2與ER呈負相關(guān)(P<0.05)，p57kip2與PR、ER與PR均呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 男性乳腺組織從良性增生到惡性轉(zhuǎn)化中p57kip2、ER、PR蛋白表達逐漸降低，甚至完全喪失；聯(lián)合檢測p57kip2、ER、PR有助于MBC的診斷及預(yù)后判斷。

乳腺腫瘤；男性；p57kip2；ER；PR；免疫組織化學(xué)

細胞周期是由CDK-Cyclin-CKI蛋白構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，其中周期蛋白依賴性激酶抑制因子發(fā)揮負向調(diào)控細胞周期的作用，p57kip2是其成員之一。研究顯示，腫瘤中存在p57kip2對細胞周期調(diào)控的異常[1]。男性乳腺癌(male breast cancer, MBC)是一種臨床較少見的惡性腫瘤，約占乳腺癌的1%，但近年來發(fā)病率逐年上升，其發(fā)病機制至今尚不明確[2]。探討MBC的發(fā)病機制，尋找有價值的診斷指標，對MBC的早期預(yù)防、診斷及治療顯得尤為重要。文獻報道[3]MBC分為激素依賴型、激素非依賴型，ER、PR是雌、孕激素發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。目前，關(guān)于p57kip2、ER、PR在MBC發(fā)生、發(fā)展中的作用尚未見相關(guān)報道。本實驗采用免疫組化檢測p57kip2、ER、PR蛋白在MBC、男性乳腺導(dǎo)管內(nèi)原位癌(ductal carcinoma in situ, DCIS)和男性乳腺發(fā)育(gynecomastia, GYM)組織中的表達，探討p57kip2、ER、PR蛋白在MBC發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科2005年1月～2015年12月確診的MBC標本50例，選取的MBC組織學(xué)類型為浸潤性導(dǎo)管癌。TNM分期：Ⅰ期13例，Ⅱ期20例，Ⅲ+Ⅳ期17例；組織學(xué)分級：Ⅰ級12例，Ⅱ級24例，Ⅲ級14例；中位年齡51歲。收集DCIS和GYM各20例，作為實驗對照組。患者術(shù)前均未作放、化療等治療。

1.2 試劑 p57kip2、ER、PR抗體、EliVision試劑盒及其他試劑，均購自福州邁新公司。

1.3 方法 所有石蠟標本，4 μm厚連續(xù)切片，免疫組化EliVision法染色。用福州邁新公司提供的陽性切片作陽性對照，以PBS代替一抗作空白對照。

1.4 結(jié)果判斷 p57kip2、ER、PR蛋白陽性定位于細胞核，呈棕褐色或棕黃色。按陽性細胞百分比分為5級：無陽性細胞為0分，≤25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。按著色強度：無陽性著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將著色強度積分與數(shù)量積分相加：0～1分為(-)，2分為(+)，3～4分為()，>5分為()；其中(+)～()為陽性，(-)為陰性[4]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，采用行×列表χ2檢驗、配對四格表χ2檢驗及Spearman相關(guān)分析進行統(tǒng)計學(xué)處理，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 p57kip2在MBC、DCIS及GYM中的表達 在MBC、DCIS、GYM中，p57kip2蛋白陽性率分別為28.00% (14/ 50)、55.00%(11/20)、90.00%(18/20)(表1，圖1～3)。

2.2 ER在MBC、DCIS及GYM中的表達 在MBC、DCIS、GYM中，ER蛋白陽性率分別為74.00%(37/50)、80.00%(16/20)、100%(20/20)(表1)。

2.3 PR在MBC、DCIS及GYM中的表達 在MBC、DCIS、GYM中，PR蛋白陽性率分別為64.00%(32/50)、85.00%(17/20)、100%(20/20)(表1)。

2.4 p57kip2、ER、PR蛋白表達與MBC臨床病理特征的關(guān)系 在MBC中，p57kip2、ER、PR蛋白表達隨著臨床分期、組織學(xué)分級的增高而逐漸降低(P<0.05)。p57kip2蛋白表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，ER、PR蛋白表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)。p57kip2、ER、PR蛋白表達與腫塊大小、年齡無關(guān)(P>0.05，表2)。

2.5 p57kip2、ER、PR蛋白在MBC組織中表達的相關(guān)性 在MBC中，p57kip2與ER呈負相關(guān)(χ2=31.855，r=-0.647，P<0.05)；p57kip2與PR(χ2=7.028，r=0.351，P<0.05)、ER與PR呈正相關(guān)(χ2=6.584，r=0.380，P<0.05)。

3 討論

細胞周期調(diào)控是近年生命科學(xué)研究的熱點之一。Matsuoka等[5]于1995年克隆出p57kip2基因，位于染色體11pl5.5上。p57kip2參與調(diào)控細胞的分化、增殖，被認為是腫瘤抑制基因[6]。Yang等[7]研究顯示，p57kip2蛋白在女性乳腺癌組織中低表達，p57kip2蛋白表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及ER、PR蛋白表達有關(guān)，p57kip2能抑制癌細胞的生長。本實驗結(jié)果顯示，p57kip2蛋白在GYM中的表達最高，在MBC中的表達最低，在MBC與DCIS、GYM中相比，差異有顯著性(P<0.05)；在DCIS與GYM中相比，差異有顯著性(P<0.05)。在MBC中，p57kip2蛋白表達隨臨床分期、組織學(xué)分級的增高而逐漸降低(P<0.05)；p57kip2蛋白表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，但與患者年齡、腫塊大小無關(guān)(P>0.05)，與在女性乳腺癌中的研究相似[7]。提示在正常男性乳腺組織中p57kip2蛋白高表達，阻滯細胞周期，一旦致癌因子使p57kip2蛋白低表達時，p57kip2便喪失抑制細胞增殖的作用，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。因此，p57kip2蛋白可以作為判斷男性乳腺組織惡變的重要生物學(xué)標記。

研究表明，在正常女性乳腺組織中，ER、PR蛋白表達隨著雌、孕激素水平的波動而變化，ER、PR蛋白表達與女性乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；雌激素與ER蛋白結(jié)合后，可促進乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展[8]。孕激素與PR蛋白結(jié)合后，可抑制乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展[9]。MBC的發(fā)生可能與雌激素過多有關(guān)，如肥胖、睪丸病變等[10]。國外研究顯示，MBC中ER、PR蛋白表達均高于女性乳腺癌，與組織學(xué)分級、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)[3,11]。韓碩等[12]報道，ER、PR蛋白在MBC中表達較良性病變低。本實驗結(jié)果顯示，ER、PR蛋白在GYM中的表達最高，在MBC中的表達最低。在MBC中，ER、PR蛋白表達隨臨床分期、組織學(xué)分級的增高而逐漸降低(P<0.05)，ER與PR呈正相關(guān)(P<0.05)，與文獻報道[11-12]相似。提示ER、PR的協(xié)調(diào)表達是男性乳腺細胞保持合適的分裂活性所必須的前提條件，如異常低表達則可促進MBC的發(fā)生、發(fā)展。ER、PR可作為評估男性乳腺組織發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變的生物學(xué)指標，是內(nèi)分泌治療效果的預(yù)測因子。

表1 p57kip2、ER、PR蛋白在MBC、DCIS及GYM中的表達

3種組織表達總的比較，★P<0.05；與MBC比較，▲P<0.05；與DCIS比較，●P<0.05

表2 p57kip2、ER、PR蛋白在MBC組織中表達與臨床病理特征的關(guān)系

3個臨床分期總的比較，☆P<0.05；與臨床Ⅰ期比較，△P<0.05；與臨床Ⅲ+Ⅳ期比較，○P<0.05；3個組織學(xué)分級總的比較，◇P<0.05；與組織學(xué)Ⅰ級比較，▽P<0.05；與組織學(xué)Ⅲ級比較，#P<0.05；3個淋巴結(jié)分組總的比較，□P<0.05；與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比較，※P<0.05

細胞周期調(diào)控異常是腫瘤細胞增殖異常的重要原因。本實驗結(jié)果顯示，p57kip2蛋白在GYM中的表達最高，在MBC中的表達最低；ER、PR蛋白在GYM中的表達最高，在MBC中的表達最低；p57kip2與ER呈負相關(guān)(P<0.05)，p57kip2與PR、ER與PR呈正相關(guān)(P<0.05)。提示ER可能抑制p57kip2的表達，促進細胞增殖；或可能PR表達下降，致協(xié)同因子p57kip2的表達也下降，促進細胞增殖，導(dǎo)致MBC的發(fā)生、發(fā)展。

綜上所述，男性乳腺組織從良性增生到惡性轉(zhuǎn)化中p57kip2、ER、PR蛋白表達逐漸降低，甚至完全喪失；聯(lián)合檢測p57kip2、ER、PR有助于MBC的診斷及預(yù)后判斷。

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時間：2017-3-16 14:23

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170316.1423.021.html

1溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科，溫州 3250002溫州醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)影像學(xué)系，溫州 325000

羅祖強，男，碩士，醫(yī)師。Tel:(0577)55579792，E-mail: luozuqiang86@163.com

R 737.9

B

1001-7399(2017)03-0320-03

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.03.021

接受日期：2017-01-13