蒙順武

（廣西省來賓市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 來賓 546100）

來賓地區(qū)地中海貧血基因攜帶及其紅細(xì)胞參數(shù)特點(diǎn)研究

蒙順武

（廣西省來賓市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 來賓 546100）

目的探究來賓地區(qū)地中海貧血基因攜帶情況以及紅細(xì)胞參數(shù)的特點(diǎn)，為來賓地區(qū)地中海貧血的臨床診斷與治療提供參考。方法采用回顧性分析的方法，收集來賓地區(qū)地中海貧血基因診斷標(biāo)本，共收集到2 000例，其中成人診斷標(biāo)本為1 500例，兒童診斷標(biāo)本為500例，用擴(kuò)增法對(duì)常見的來賓地區(qū)地中海貧血基因進(jìn)行檢驗(yàn)，對(duì)突變型β地中海貧血基因、缺失型α地中海貧血基因以及CD41-42雜合子進(jìn)行相應(yīng)的分析。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的方法探究紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞平均體積等指標(biāo)之間的差異。結(jié)果調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，含CD41-42基因型為142例，其低頻攜帶率達(dá)到了7.1%，CD41-42雜合子為108例，占5.4%；CD41-42復(fù)合α地中海貧血為27例，占1.35%，CD41-42復(fù)合β地中海貧血為12例，占0.06%。且CD41-42復(fù)合α地中海貧血成人的基因攜帶與兒童的基因攜帶狀況無明顯區(qū)別，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而CD41-42復(fù)合β地中海貧血基因成人與兒童之間的基因攜帶率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論來賓地區(qū)CD41-42β地中海貧血中CD41-42雜合子較為常見。且CD41-42雜合子能夠與其他地貧突變合并存在，使紅細(xì)胞參數(shù)出現(xiàn)明顯的差異。且人們的性別、年齡與CD41-42基因攜帶有一定的關(guān)系。

來賓；地中海；貧血基因攜帶；紅細(xì)胞參數(shù)；特點(diǎn)

地中海貧血在我國(guó)的華南地區(qū)出現(xiàn)較多，尤其以廣東、廣西一帶出現(xiàn)最為繁多，嚴(yán)重威脅著人們的生命安全。單基因常染色體遺傳作為其中發(fā)病率最高的一種遺傳路徑，其表現(xiàn)形式多種多樣[1]。人體的紅細(xì)胞參數(shù)受到極大的影響，成為臨床醫(yī)學(xué)篩選的一大指標(biāo)。在廣西省的來賓地區(qū)，β地貧基因攜帶率已經(jīng)達(dá)到4.63%，尤其以CD41-42最為常見，成為地貧基因突變高發(fā)地區(qū)。為了探究來賓地區(qū)地中海貧血基因攜帶情況及紅細(xì)胞參數(shù)的特點(diǎn)，特收集2 000例地貧診斷標(biāo)本，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本研究收集的標(biāo)本皆是來自廣西省來賓市人民醫(yī)院2013年3月～2015年9月行婚前、孕前、兒科門診等檢查的外周血。所有的標(biāo)本皆符合統(tǒng)計(jì)指標(biāo)，排除由其它因素引起的貧血、感染等情況，另外由于藥物服用導(dǎo)致紅細(xì)胞參數(shù)變化的患者不在本次標(biāo)本收集范圍內(nèi)，年齡未滿1歲的幼兒血細(xì)胞指標(biāo)不穩(wěn)定，也不在統(tǒng)計(jì)范圍。共收集標(biāo)本2000例，其中成人為1500例，兒童為500例，所有患者受檢時(shí)，均未輸過血或距離上次輸血時(shí)間超過1個(gè)月。

1.2 檢測(cè)儀器 本次檢測(cè)用到的儀器有血細(xì)胞分析儀（XT-4000i），希森美康醫(yī)用電子（上海）有限公司生產(chǎn)，另外還有廣州中山達(dá)安公司生產(chǎn)的HEMA-9600PCR擴(kuò)增儀，檢驗(yàn)試劑為廠家的配套試劑[2]。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 地貧基因攜帶分析 采用枸鹽酸抗凝管抽取適量的靜脈血，然后用廠家配送的DNA提取試劑將靜脈血中的DNA提取出來，進(jìn)而用PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增。再用PCR-膜反向點(diǎn)雜交技術(shù)對(duì)人群基因組DNA中β珠蛋白基因突變的8個(gè)常見位點(diǎn)以及9個(gè)少見位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)中國(guó)人中常出現(xiàn)的3種缺失型α地貧基因用跨斷裂位點(diǎn)法進(jìn)行檢測(cè)[3]。

1.3.2 血細(xì)胞參數(shù)分析 采用EDTA抗凝管抽取適量靜脈血，將其直接放置血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)、血紅蛋白以及MCH等進(jìn)行分析判斷[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究數(shù)據(jù)均用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[5]。

2 結(jié)果

2.1 地貧基因攜帶情況以及分布 通過對(duì)2 000例標(biāo)本的監(jiān)測(cè)分析，CD41-42基因型為142例，攜帶率達(dá)到了7.1%，CD41-42雜合子為108例，占5.4%，CD41-42復(fù)合α地中海貧血為27例，占1.35%，復(fù)合β地中海貧血為12例，占0.06%。CD41-42雜合子攜帶率、CD41-42復(fù)合α地貧基因攜帶率兒童與成人之間差異不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，CD41-42復(fù)合β地中海貧血基因成人與兒童的攜帶率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。且成人中僅發(fā)現(xiàn)CD41-42雜合子復(fù)合βEM一種雙重雜合子。見表1。

表1 地貧基因攜帶情況以及分布Table 1 Thalassemia carrier status and distribution

2.2 CD41-42基因組合紅細(xì)胞參數(shù)特點(diǎn) CD41-42雜合子和CD41-42復(fù)合α地貧基因攜帶者的紅細(xì)胞參數(shù)表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性輕度貧血，其中Hb、Htc、MCV、MCH參數(shù)組間沒有明顯差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，MCV、MCH組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。CD41-42復(fù)合β地貧表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性中度貧血，Hb、Hct參數(shù)與其他兩組基因相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），MCV、MCH與CD41-42雜合子相比，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與CD41-42復(fù)合α地貧相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 CD41-42基因組合紅細(xì)胞參數(shù)特點(diǎn)（±s）Table 2 CD41-42 combination of genes characteristic of red blood cell parameters（±s）

表2 CD41-42基因組合紅細(xì)胞參數(shù)特點(diǎn)（±s）Table 2 CD41-42 combination of genes characteristic of red blood cell parameters（±s）

項(xiàng)目CD41-42雜合子Hb（g/L）Hct（%）MCV（fL）MCH（pg）124.4±24.2 0.4±0.5 65.5±12.1 23.4±2.43 CD41-42復(fù)合α地貧126.3±26.6 0.38±0.7 68.4±23.1 25.5±6.6 CD41-42復(fù)合β地貧72.3±35.7 0.21±0.1 75.4±12.6 27.5±4.9

3 討論

3.1 地中海貧血的分布與分型 作為世界上極為常見的單基因遺傳病之一，地中海貧血對(duì)人們的身心健康有著重要的影響，在我國(guó)的云南、海南、臺(tái)灣等地區(qū)都有不同程度的發(fā)生，且我國(guó)的α地貧主要包括-α3.7、-α4.2、--SEA三種不同的類型，β地貧基因則主要分為β0地貧以及β+地貧，前者主要表現(xiàn)為β鏈完全缺失，后者則表現(xiàn)為β鏈合成減少[6]。目前，臨床醫(yī)學(xué)中對(duì)地中海貧血進(jìn)行了深入的研究，并取得了一定的研究成果。以往對(duì)地中海貧血的篩查主要通過血常規(guī)測(cè)定、紅細(xì)胞脆性檢驗(yàn)等方法，這些方式盡管操作簡(jiǎn)便，成本較低，但是準(zhǔn)確率不高，成為目前臨床面臨的一大難題[7]。

3.2 地中海貧血基因攜帶及其紅細(xì)胞參數(shù)特點(diǎn)目前采用gap-PCR技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)，具有一定的科學(xué)性與有效性，不僅方便、快捷，而且能夠?qū)θ笔?、重排進(jìn)行檢測(cè)，是當(dāng)前檢測(cè)缺失型地貧最常用的一種檢測(cè)方法，具有極大的優(yōu)越性[8]。通過對(duì)以上2000例標(biāo)本的檢測(cè)分析，顯示來賓地區(qū)CD41-42基因型攜帶率在這個(gè)基因攜帶中占據(jù)較高的水平。在復(fù)合型的地貧基因組合中，CD41-42復(fù)合α地貧基因較為常見，復(fù)合β地貧基因則以兒童為主，嚴(yán)重的貧血癥狀威脅到人們的生存，一般情況下，需要輸血來維持患者的生命安全。在對(duì)標(biāo)本的血細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)CD41-42雜合子的RBC、Hct受性別的影響較大，男性明顯高于女性。CD41-42復(fù)合β地貧基因組中，成人的攜帶率明顯低于兒童的原因，也正是CD41-42復(fù)合α地貧基因攜帶率高于CD41-42復(fù)合β地貧基因攜帶率的原因。對(duì)于CD41-42復(fù)合α地貧基因攜帶者來說，他們的β珠蛋白生成障礙過程中同時(shí)也造成了α珠蛋白的生成障礙，這在一定程度上使α/β鏈的不平衡現(xiàn)象得到了環(huán)節(jié)，在血液學(xué)表型改變中并不突出，臨床表現(xiàn)也比較輕，這也使兒童與成人之間的攜帶率沒有明顯的差異[9-10]。在對(duì)不同人群?jiǎn)渭僀D41-42雜合子的紅細(xì)胞參數(shù)研究中，可以發(fā)現(xiàn)CD41-42雜合子的Hb、Hct有性別差異，且男性明顯高于女性，與臨床醫(yī)學(xué)的檢驗(yàn)結(jié)果是基本一致的[11-12]。本文通過對(duì)來賓地區(qū)地貧基因攜帶情況以及紅細(xì)胞參數(shù)特點(diǎn)的分析與探討，發(fā)現(xiàn)兒童與成人在MCV以及MCH指標(biāo)方面有著明顯地差異，在進(jìn)行地貧RBC指標(biāo)篩選時(shí)，要充分將年齡、性別作為考慮因素，以防出現(xiàn)漏診。

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Thalassemia guest area carrying red blood cell parameters and characteristics study

Meng Shun-wu
(Guangxi Laibin People's Hospital，Laibin,Guangxi,546100,China)

Objective To explore the area carry thalassemia gene guests as well as the characteristics of red blood cell parameters,Provide a reference for clinical diagnosis and treatment of thalassemia in the guest area.MethodsA retrospective analysis of the collected specimens thalassemia gene diagnosis guest area were collected to 2 000 cases,including 1 500 adult diagnostic specimens,and children for diagnostic specimens of 500 patients with amplification of the common guest area thalassemia gene tested for β-thalassemia mutant gene deletion α-thalassemia gene and heterozygotes CD41-42 corresponding analysis.Explore the red blood cell count,hemoglobin concentration difference,mean corpuscular volume and other indicators between.ResultsThe survey datashow that 142 cases containing CD41-42 genotype,which carries a low frequency rate reached 7.1%,CD41-42 heterozygotes of 108 cases,accounting for 5.4%;CD41-42 composite α-thalassemia was 27 cases,1.35%,CD41-42 composite β thalassemia 12 cases,accounting for 0.06%.And CD41-42 composite α-thalassemia gene carrying adults and children carrying the gene Condition No visible difference was not statistically significant.The gene adults and children between CD41-42 composite β thalassemia carrier rate significantly different,statistically significant(P＜0.05).ConclusionsGuest area CD41-42β thalassemia heterozygotes CD41-42 more common.And to work with other CD41-42 heterozygous thalassemia mutations in combination,make red blood cell parameters significant differences.And people's gender,age and CD41-42 gene carries a certain relationship.

Guest;Mediterranean;Anemia gene carries;Red blood cell parameters;Features

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.02.003