轉(zhuǎn)基因棉花中選擇性標(biāo)記基因nptⅡ?qū)ν寥牢⑸锏挠绊?/h1>

2017-05-19 05:34:30常曉蕾王金斌鄭曙峰唐雪明

上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)訂閱 2017年2期 收藏

關(guān)鍵詞：抗蟲(chóng)棉抗性轉(zhuǎn)基因

劉 華，常曉蕾，2，蔣 瑋，王金斌，白 藍(lán)，吳 蔚，鄭曙峰，唐雪明

（1上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所，上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201106；2上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海 201306；3上海佑隆生物科技有限公司，上海 201114；4國(guó)家棉花改良中心安慶分中心，安慶 246003）

轉(zhuǎn)基因棉花中選擇性標(biāo)記基因nptⅡ?qū)ν寥牢⑸锏挠绊?/p>

劉 華1，常曉蕾1，2，蔣 瑋1，王金斌1，白 藍(lán)1，吳 蔚3，鄭曙峰4，唐雪明1

（1上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所，上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201106；2上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海 201306；3上海佑隆生物科技有限公司，上海 201114；4國(guó)家棉花改良中心安慶分中心，安慶 246003）

選取華東地區(qū)種棉大省共計(jì)14個(gè)布控點(diǎn)，在長(zhǎng)期種植轉(zhuǎn)基因棉花的農(nóng)業(yè)地塊于花鈴期和收獲期進(jìn)行土壤樣品采集，并根據(jù)npt II基因設(shè)計(jì)4對(duì)引物，對(duì)土壤微生物DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測(cè)選擇性標(biāo)記基因npt II對(duì)土壤中微生物的影響。結(jié)果表明：210個(gè)土壤樣品中均無(wú)目的條帶出現(xiàn)。

轉(zhuǎn)基因棉花；基因漂移；npt II；土壤微生物

轉(zhuǎn)基因商業(yè)化已經(jīng)近20年，轉(zhuǎn)基因作物種植面積持續(xù)增加，2014年全球已達(dá)1.815億hm2，年增長(zhǎng)率為3%—4%［1］。就我國(guó)的基本國(guó)情而言，轉(zhuǎn)基因植物的商品化應(yīng)用在我國(guó)前景廣闊。作為轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的種植大國(guó)，從1986年抗蟲(chóng)和抗除草劑的轉(zhuǎn)基因棉花首次進(jìn)入田間實(shí)驗(yàn)以來(lái)，轉(zhuǎn)基因棉花的總種植面積已達(dá)到420萬(wàn)hm2，受益于轉(zhuǎn)基因Bt棉花的中國(guó)農(nóng)民已超過(guò)710萬(wàn)［1］。目前，我國(guó)轉(zhuǎn)基因植物生物安全和生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)方面的研究較少，對(duì)棉花主產(chǎn)區(qū)的土壤微生物的研究落后于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展［2］。

轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因除了目的基因還有一類選擇性標(biāo)記基因。選擇性標(biāo)記基因是指幫助轉(zhuǎn)基因生物工程體進(jìn)行篩選和鑒定的一類外源基因，包括選擇標(biāo)記基因和報(bào)告基因［3］。常用的選擇標(biāo)記基因有兩大類，一類是編碼抗生素抗性的基因，如新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶（neomycin phosphotransferase）基因Ⅱ（npt II）；另一類是編碼除草劑抗性的基因，如草丁膦乙酰轉(zhuǎn)移酶（phosphinothricin acetyltransferase）基因（bar）［4］。卡那霉素抗性基因（kanr）即新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因（npt II）是轉(zhuǎn)基因植物研究中應(yīng)用最廣泛的選擇標(biāo)記抗性基因［5-6］。新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因（npt II）所編碼的產(chǎn)物可使該類抗生素失活，故常以npt II基因作為轉(zhuǎn)基因植物的選擇標(biāo)記以篩選轉(zhuǎn)基因植株。npt II基因被歸類為對(duì)人類和動(dòng)物都至關(guān)重要的一類抗生素基因［7］。轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的選育也以npt II作為標(biāo)記基因。當(dāng)轉(zhuǎn)化完成后，標(biāo)記基因就會(huì)失去其使用價(jià)值，隨之而來(lái)的就是它的安全性問(wèn)題［8］?；蚱剖侵富蛲ㄟ^(guò)花粉授精雜交等途徑在種群之間擴(kuò)散的過(guò)程，同時(shí)也是轉(zhuǎn)基因植物生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和管理的關(guān)鍵問(wèn)題和研究熱點(diǎn)［9］?；蚱剖菑V泛存在于大自然的一種現(xiàn)象，引起的風(fēng)險(xiǎn)主要有兩類：一是基因轉(zhuǎn)移到其他植物體內(nèi)而造成的環(huán)境危害，包括導(dǎo)致產(chǎn)生超級(jí)雜草和對(duì)自然基因庫(kù)的影響；二是轉(zhuǎn)基因植物自身及其后代對(duì)環(huán)境造成危害，包括對(duì)自然生態(tài)系統(tǒng)的影響和對(duì)生物多樣性的影響［9-10］。Wilcks等［11］研究發(fā)現(xiàn)，抗性基因在轉(zhuǎn)基因植物與土壤細(xì)菌之間可以發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移。轉(zhuǎn)基因煙草中葉綠體上的抗性基因組可與土壤中的優(yōu)勢(shì)菌（不動(dòng)桿菌）發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移［12］。

轉(zhuǎn)基因植物的殘枝落葉掉落到土壤中，經(jīng)過(guò)土壤微生物的分解，有可能導(dǎo)致外源標(biāo)記基因逃逸，對(duì)土壤微生物產(chǎn)生影響。同時(shí)，轉(zhuǎn)基因植物的根際分泌物中有可能含有重組蛋白，可能對(duì)土壤微生物產(chǎn)生影響［13］。本研究根據(jù)棉花生長(zhǎng)周期選擇采集樣品的時(shí)間段，并對(duì)長(zhǎng)期種植轉(zhuǎn)基因棉花的土地進(jìn)行不間斷土壤樣品采集，根據(jù)插入棉花中的npt II基因設(shè)計(jì)4對(duì)不同的引物，對(duì)土壤微生物DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以此判斷選擇性標(biāo)記基因npt II對(duì)土壤微生物的影響。

1 材料與方法

1.1 采樣地點(diǎn)與時(shí)間

土壤樣品采集于華東地區(qū)棉花主產(chǎn)區(qū)安徽、江蘇、山東三省共14個(gè)轉(zhuǎn)Bt基因棉花種植地，具體位置及編號(hào)見(jiàn)表1。采集時(shí)間為棉花的花鈴期（2013年7月、2014年7月）和收獲期（2012年11月、2013年11月、2014年11月）。

表1 土壤樣品采集地點(diǎn)及編號(hào)Table 1 Collection location and number of soil sam p les

1.2 樣品采集

土壤樣品采集方法為正方形五點(diǎn)隨機(jī)取樣法。在目的地處分別垂直收集淺層（0—10 cm）、中層（10—20 cm）、深層（20—30 cm）的土壤置于無(wú)菌密封袋中密封，帶回實(shí)驗(yàn)室－20℃保存待用。

1.3 土樣處理

將每個(gè)采集地點(diǎn)的3個(gè)層次的土壤樣品進(jìn)行等量混勻處理，置于無(wú)菌密封袋中，－20℃保存，用于后期提取微生物總DNA。

1.4 土壤微生物總DNA提取

土壤中微生物總DNA采用MP FastDNA Spin Kit for Soil試劑盒進(jìn)行提取，具體操作過(guò)程見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。所有的DNA樣品用1%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。

1.5 PCR擴(kuò)增

PCR引物根據(jù)npt II基因設(shè)計(jì)，共4對(duì)（表2）。

表2 用于擴(kuò)增npt II基因的引物序列Table 2 Primer sequences for am plification of npt IIgene

2 結(jié)果與分析

2.1 土壤微生物總DNA提取結(jié)果

對(duì)三省14個(gè)棉花種植地進(jìn)行土壤樣品采集及處理，共210個(gè)樣品，并提取其微生物總DNA，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。由圖1可知，所有微生物DNA基因組大小均為15 kb左右，條帶清晰。經(jīng)吸光度檢測(cè)，所有樣品DNA的OD260/OD280值均在1.6—1.8，表明DNA純度較高，可用于PCR擴(kuò)增等后續(xù)試驗(yàn)。

圖1 土壤樣品微生物總DNA提取結(jié)果Fig.1 The extraction results ofm icrobial total DNA of soil sam ples

2.2 土壤樣品PCR結(jié)果

用npt II685、npt II215、npt II183、npt II173四對(duì)引物對(duì)安徽（圖2）、江蘇（圖3）、山東（圖4）3省14個(gè)地點(diǎn)的土壤樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，每個(gè)樣品3次重復(fù)。結(jié)果表明，所有土壤樣品在上述4對(duì)引物的PCR擴(kuò)增下，無(wú)相應(yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物；陽(yáng)性對(duì)照均有目的條帶，陰性對(duì)照和空白對(duì)照中沒(méi)有出現(xiàn)，證明在擴(kuò)增條件良好的狀態(tài)下，所有土壤樣品中均不含有npt II基因所對(duì)應(yīng)的4種片段。這4對(duì)引物對(duì)npt II基因序列的涵蓋性良好，且小片段包含較多，均未擴(kuò)增出目的條帶，可以認(rèn)為轉(zhuǎn)基因棉花中的標(biāo)記基因npt II并未水平轉(zhuǎn)移到土壤微生物中，沒(méi)有對(duì)土壤微生物產(chǎn)生影響。由于擴(kuò)增片段的大小及退火溫度的不同，某些樣品中出現(xiàn)了非特異性擴(kuò)增，屬于正?，F(xiàn)象，但并非目的條帶。

圖2 安徽省土壤樣品PCR結(jié)果Fig.2 PCR results of soil sam p les of Anhui Province

圖3 江蘇省土壤樣品PCR結(jié)果Fig.3 PCR results of soil sam p les of Jiangsu Province

圖4 山東省土壤樣品PCR結(jié)果Fig.4 PCR results of soil sam p les of Shandong Province

3 結(jié)論與討論

人類一直對(duì)選擇性標(biāo)記基因的漂移可能給人類和環(huán)境帶來(lái)危害的狀況感到擔(dān)憂。轉(zhuǎn)基因植物基因（包括轉(zhuǎn)基因）漂移的途徑大致有兩個(gè)：一是通過(guò)轉(zhuǎn)基因植物的種子或組織擴(kuò)散到新的生境中，并生存下來(lái)；二是通過(guò)花粉向同種或近緣種非轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)移?？赡艽嬖诘牡谌龡l漂移途徑是非同種生物間，如植物與微生物（細(xì)菌、真菌、病毒等）間在自然界中發(fā)生基因轉(zhuǎn)移，但這條途徑至今尚未得到證實(shí)［14］。一般認(rèn)為含有選擇標(biāo)記基因的植物要表現(xiàn)出選擇優(yōu)勢(shì)，環(huán)境中必須具有相當(dāng)高的選擇介質(zhì)。對(duì)于抗生素類和其他化學(xué)試劑類標(biāo)記基因來(lái)說(shuō)，在環(huán)境中有如此高的選擇介質(zhì)實(shí)際上是不可能的［15］。本研究可為科學(xué)評(píng)估轉(zhuǎn)基因植物的環(huán)境生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)提供科學(xué)基礎(chǔ)和技術(shù)支持，為轉(zhuǎn)基因植物的環(huán)境安全評(píng)價(jià)和管理水平提供參考依據(jù)。

本研究根據(jù)基因漂移的主要途徑選擇每年采集樣品的時(shí)間為棉花生長(zhǎng)周期中的花鈴期（7月）和收獲期（11月），探究在最易發(fā)生基因漂移的兩個(gè)時(shí)期，土壤微生物是否受選擇性標(biāo)記基因npt II的影響。結(jié)果表明，所有采集樣品（共計(jì)210個(gè)點(diǎn)）中，轉(zhuǎn)基因棉花的選擇性標(biāo)記基因npt II均未漂移到土壤微生物中。有文獻(xiàn)認(rèn)為轉(zhuǎn)基因棉花的根際分泌蛋白可能會(huì)對(duì)土壤微生物產(chǎn)生影響，如李剛等［16］在檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉花重組DNA在土壤中分布的研究中指出，同一生長(zhǎng)時(shí)期不同根區(qū)土壤中35S-Cry1A和35S-npt II片段拷貝數(shù)變化情況均為根表土＞根際土＞非根際土。另外研究表明，轉(zhuǎn)基因作物釋放的面積也可能會(huì)影響到轉(zhuǎn)基因花粉的傳播距離［10］。Kjellson等［14］認(rèn)為，現(xiàn)今轉(zhuǎn)基因棉花釋放面積非常大，50 m或100 m的隔離距離不足以控制轉(zhuǎn)基因花粉的擴(kuò)散。同時(shí)，有研究指出，在0—6 m陸地棉品種間顯示較高頻率的基因漂移，Bt基因漂移距離最大可達(dá)36 m［17］。本研究采用五點(diǎn)隨機(jī)取樣法，并將每個(gè)采樣點(diǎn)三層土壤混勻進(jìn)行試驗(yàn)，在檢測(cè)了水平空間的廣度和垂直空間的深度同時(shí)，也會(huì)降低檢測(cè)的精準(zhǔn)性。本試驗(yàn)因涉及地域較廣，樣品采集方面存在一定局限性，仍需對(duì)棉產(chǎn)地進(jìn)行進(jìn)一步觀察及監(jiān)測(cè)。在總DNA提取方面，本試驗(yàn)將土壤樣品采集后帶回實(shí)驗(yàn)室凍存，部分微生物種群的DNA在采集后很短時(shí)間內(nèi)即被分解，而且現(xiàn)有的提取技術(shù)仍存在一定局限性，盡管多數(shù)微生物DNA都能被提取出，但仍有少量微生物DNA被忽略的可能，同樣也會(huì)存在掉落在土壤中的植物殘?jiān)腄NA被提出的可能性而干擾試驗(yàn)的精準(zhǔn)性，從而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生一定誤差。另外，鄧欣等［18］在檢測(cè)卡那霉素抗性標(biāo)記基因能否向葉圍細(xì)菌漂移的研究中，發(fā)現(xiàn)了與npt II基因序列同源性100%的陽(yáng)性片段，從而認(rèn)為轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉中的npt II能夠向葉圍細(xì)菌漂移。但鄧欣等［18］開(kāi)展研究的土壤樣本來(lái)自長(zhǎng)期種植轉(zhuǎn)基因棉花的試驗(yàn)田，屬于可控區(qū)域。而本試驗(yàn)采集的土壤樣品均是種植轉(zhuǎn)基因棉花年限高于7年的大型農(nóng)業(yè)地塊，環(huán)境的不可控性和不確定性等因素均比試驗(yàn)田更復(fù)雜，目前并未發(fā)現(xiàn)基因漂移現(xiàn)象，可能仍需繼續(xù)采集樣品，對(duì)轉(zhuǎn)基因棉花種植地土壤進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的檢測(cè)，以便更系統(tǒng)地檢測(cè)標(biāo)記基因是否有影響土壤微生物的群落結(jié)構(gòu)及生物多樣性。其次，從PCR擴(kuò)增結(jié)果來(lái)看，有一些非特異性擴(kuò)增條帶值得深究，有可能是非特異性擴(kuò)增，也有可能是更小的片段被轉(zhuǎn)移至土壤的微生物中。為此，在轉(zhuǎn)基因植物選擇基因向土壤微生物轉(zhuǎn)移的研究方面還需要更嚴(yán)格更精細(xì)，在更大的時(shí)空尺度上進(jìn)行，以準(zhǔn)確估計(jì)抗性標(biāo)記基因向土壤微生物轉(zhuǎn)移的頻率。

［1］CLIVE J.2014年全球生物技術(shù)/轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢(shì)［J］.中國(guó)生物工程雜志，2015，35（1）：1-14.

［2］盧寶榮，夏輝.轉(zhuǎn)基因植物的環(huán)境生物安全：轉(zhuǎn)基因逃逸及其潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)的研究和評(píng)價(jià)［J］.生物科學(xué)，2011，23（2）：186-194.

［3］王振，鄧欣，趙廷昌，等.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉根際卡那霉素抗性細(xì)菌種群動(dòng)態(tài)及npt II基因漂移檢測(cè)［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，43（21）：4401-4408.

［4］王永飛，馬三梅，亦如瀚.轉(zhuǎn)基因植物選擇標(biāo)記基因及其安全性問(wèn)題［J］.植物生理學(xué)通訊，2004，40（5）：604-610.

［5］王關(guān)林，方宏筠.植物基因工程［M］.2版.北京：科學(xué)出版社，2002：527-528.

［6］王紫萱，易自力.卡那霉素在植物轉(zhuǎn)基因中的應(yīng)用及其抗性基因的生物安全性評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)生物工程雜志，2003，23（6）：9-131.

［7］WOEGERBAUER M，ZEINZINGER J，GOTTSBERGER R A，et al.Antibiotic resistance marker genes as environmental pollutants in GMO-pristine agricultural soils in Austria［J］.Environmental Pollution，2015，206：342-351.

［8］DARBANIB，EIMANIFAR A，STEWART CN，et al.Methods to producemarker-free transgenic plants［J］.Biotechnology Journal，2007，2（1）：83-90.

［9］樊龍江，周雪平，胡秉民，等.轉(zhuǎn)基因植物的基因漂流風(fēng)險(xiǎn)［J］.應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2001，12（4）：630-632.

［10］KJELLSON G，SIMONSEN V，AMMANN K.Methods for risk assessment of transgenic plantsⅡ.Pollination，gene-transfer and population impacts［M］.Basel：Birkhauser Verlag，1997.

［11］WILCKSA，VAN H M，JOOSTEN R G，et al.Persistence of DNA studied in Different ex vivo and in vivo RatModels Simulating the Human Gut Situation［J］.Food Chem.Toxicol，2004，42（3）：493-502.

［12］KAY E，VOGEL TM，BERTOLLA F，et al.In Situ Transfer of Antibiotic Resistance Genes from Transgenic（Transplastomic）Tobacco Plants to Bacteria［J］.Appl Environ.Microbiol，2002，68（7）：3345-3351.

［13］SAXENA D，F(xiàn)LORESS，STOTZKY G.Bt toxin is released in root exudates from 12 transgenic corn hybrids representing three transformation events［J］.Soil Biology and Biochemistry，2002，34（1）：133-137.

［14］KJELLSSON G，SIMONSEN V.Methods for Risk Assessment of Transgenic PlantsⅠ.Competition，Establishment and Ecosystem Effects［M］.Basel：Birkhauser，1994.

［15］肖志新，周冀衡，楊虹琦，等.轉(zhuǎn)基因植物選擇性標(biāo)記基因［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2004，6（5）：19-21.

［16］李剛，修偉明，趙建寧，等.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉花重組DNA在土壤中分布的實(shí)時(shí)定量PCR分析［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2012，31（10）：1933-1940.

［17］沈法富，張學(xué)坤，于元杰，等.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的Bt基因流［J］.遺傳學(xué)報(bào)，2001，28（6）：562-56.

［18］鄧欣，趙廷昌，高必達(dá).轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉葉圍卡那霉素抗性細(xì)菌種群動(dòng)態(tài)及npt II基因漂移研究［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，40（11）：2488-2494.

（責(zé)任編輯：閆其濤）

Effect of selective marker gene npt II on soilm icroorganism in transgenic cotton

LIU Hua1，CHANG Xiao-lei1，2，JIANGWei1，WANG Jin-bin1，BAILan1，WUWei3，ZHENG Shu-feng4，TANG Xue-ming1
（1Biotech Research Institute，Shanghai Academy of Agricultural Sciences，Key Laboratory of Agricultural Genetics and Breeding，Shanghai201106，China；2College of Food Science and Technology，Shanghai Ocean University，Shanghai201306，China；3Shanghai Youlong Biotech.Co.，Ltd，Shanghai201114，China；4National Cotton Improvement Center Anqing Branch，Anqing 246003，China）

A total of 14 points in cotton province in East China were selected and the soil samples in the agricultural plots for long-term planting of transgenic cotton at flowering and harvest period were collected.According to the npt IIgene，4 pairs of primerswere designed to amplify the soilmicrobial DNA by PCR，and to detect the effect of selective marker gene npt II on soil microorganisms.The results showed that there were no target bands in 210 soil samples.

Geneticallymodified cotton；Gene flow；npt II；Soilmicroorganism

S154.3；S188

：A

1000-3924（2017）02-007-06

10.15955j.issn1000-3924.2017.02.02

2015-10-16

上海市科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目［滬農(nóng)科攻字（2015）第4-3號(hào)］

劉華（1983—），女，碩士，助理研究員，主要從事微生物多樣性檢測(cè)及食品安全與檢測(cè)技術(shù)的研究。Tel：021-62208750，E-mail：liuhua0212＠foxmail.com

共同第一作者

唐雪明（1970—），男，博士，研究員，主要從事轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)研究。Tel：021-62208750，E-mail：xueming70＠foxmail.com

猜你喜歡

抗蟲(chóng)棉抗性轉(zhuǎn)基因

探秘轉(zhuǎn)基因

學(xué)與玩(2022年10期)2022-11-23 08:32:00

基因工程方法讓天敵昆蟲(chóng)保護(hù)有了依據(jù)

今日農(nóng)業(yè)(2022年8期)2022-07-05 00:05:26

抗蟲(chóng)棉的故事

少兒科學(xué)周刊·兒童版(2022年10期)2022-06-27 14:08:45

轉(zhuǎn)基因，你吃了嗎?

今日農(nóng)業(yè)(2022年3期)2022-06-05 07:12:08

一個(gè)控制超強(qiáng)電離輻射抗性開(kāi)關(guān)基因的研究進(jìn)展

空間科學(xué)學(xué)報(bào)(2021年1期)2021-05-22 01:36:34

甲基對(duì)硫磷抗性菌的篩選及特性研究

環(huán)境保護(hù)與循環(huán)經(jīng)濟(jì)(2017年5期)2018-01-22 02:56:44

甜玉米常見(jiàn)病害的抗性鑒定及防治

中國(guó)果菜(2016年9期)2016-03-01 01:28:44

天然的轉(zhuǎn)基因天然的轉(zhuǎn)基因“工程師”及其對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的意蘊(yùn)

創(chuàng)新科技(2015年1期)2015-12-24 06:23:21

用于黃瓜白粉病抗性鑒定的InDel標(biāo)記

中國(guó)蔬菜(2015年9期)2015-12-21 13:04:40

正確看待抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)性

鄉(xiāng)村科技(2014年23期)2014-03-08 06:37:27

上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)2017年2期

上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)的其它文章

我國(guó)食用菌標(biāo)準(zhǔn)體系現(xiàn)狀解析及對(duì)策

農(nóng)產(chǎn)品中食源性致病菌風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)與評(píng)估的研究現(xiàn)狀

中國(guó)農(nóng)村居民收入來(lái)源與消費(fèi)支出結(jié)構(gòu)的相關(guān)性研究

普惠金融視角下甘肅省農(nóng)村金融服務(wù)水平的區(qū)域差異及影響因素分析

基于SWOT分析上海浦東新區(qū)種源農(nóng)業(yè)的發(fā)展

上海市農(nóng)產(chǎn)品加工的瓶頸問(wèn)題與發(fā)展思路研究