邵明奇
(內(nèi)蒙古通遼市扎魯特旗農(nóng)牧業(yè)局聯(lián)合屯獸醫(yī)站,內(nèi)蒙古通遼 029100)
豬微生物學(xué)診斷材料的采集方法及其注意事項
邵明奇
(內(nèi)蒙古通遼市扎魯特旗農(nóng)牧業(yè)局聯(lián)合屯獸醫(yī)站,內(nèi)蒙古通遼 029100)
近年來豬只發(fā)生疫病時,單純感染的病例逐漸減少,而混合感染和繼發(fā)感染的病例愈來愈多。不同疫病的癥狀和病理變化交織在一起,給疫病的診斷帶來許多困難,即使經(jīng)驗豐富的獸醫(yī),也常需要靠微生物學(xué)診斷和血清學(xué)檢查來進行判斷。微生物學(xué)診斷和血清學(xué)檢查能否獲得明確結(jié)果,關(guān)鍵在于是否能夠正確地采集病料。因此,動物科技工作者必須親自采集供檢查用的各種材料。
有價值的試驗結(jié)果在很大程度上取決于材料的采集和處理方法是否適當(dāng)合理。因此正確地采集材料,及時運送和處理,是極其重要的。選擇典型病例,當(dāng)發(fā)現(xiàn)在一個養(yǎng)豬場多頭豬同時發(fā)病時,應(yīng)選擇臨床癥狀典型有代表性,尚未進行過治療的病例。因為使用過抗菌藥物治療過的病豬,在血液和組織中常難以查出病原體,應(yīng)給予注意。及時取材,病料的取材應(yīng)在病豬死前或死后隨即完成。死后時間過長,則組織細胞變性、腐敗,影響檢查結(jié)果。因此,在病豬死后取材,炎熱季節(jié)最遲不得遲于死后2 h;寒冷季節(jié)也應(yīng)在死后5 h內(nèi)完成。正確取材,采取病料時應(yīng)根據(jù)臨床診斷、流行病學(xué)材料分析所示疾病的種類和病原體的嗜組織性,來決定采取哪些組織和器官。若懷疑豬瘟?xí)r,應(yīng)采取淋巴結(jié)和脾臟;若懷疑偽狂犬病時,可取腦和脊髓??傊?,采取病料應(yīng)采集病原體含量高,且病變明顯的組織和器官。這樣不但可以省去許多不必要的檢查手續(xù),而且可以為疾病防治贏得寶貴時間。
應(yīng)排除炭疽可疑,對突然死亡的病豬,如見有皮下水腫、天然孔出血、尸僵不全者,應(yīng)首先從頸靜脈或耳靜脈采血,涂制血液涂片數(shù)張,立即進行固定、染色、顯微鏡檢查,排除炭疽后方可進行剖檢和取材。
防止雜菌污染,解剖病豬尸體的所用器械,如刀、剪、玻璃器皿等均應(yīng)消毒。采取組織、器官時,應(yīng)以棉簽浸上95%酒精在臟器表面進行燒灼消毒,迅速以手術(shù)刀切一小口,用白金耳伸入切口深處取材接種于培養(yǎng)基上;如要進行病毒分離,燒灼消毒后,可用手術(shù)刀切取一塊組織(重約5~10 g),在酒精燈上燒灼一下,立即放入消毒過的平皿內(nèi),送入實驗室進行病毒分離。
2.1 血液、腹、胸水的采集
病豬生前可從耳靜脈采血,剖開后可以心臟采血。用5 mL或10 mL注射器,吸取抗凝劑(3.8%檸檬酸鈉或1% EDTA二鈉)1.0 mL,從耳靜脈或心臟采血4.0 mL,混合均勻后送實驗室檢查。如要送往外地實驗室檢查,可向血液中加入10%福爾馬林液2.0 mL以起到防腐的效果。病豬尸體剖開后,應(yīng)立即用注射器分別抽取腹水或胸水,抽得的腹水或胸水應(yīng)立即送實驗室檢查。
2.2 乳汁、膿汁等的采集
用消毒液清洗和消毒泌乳母豬乳房,將最初擠出乳汁棄去,然后采集乳汁10~20 mL于試管中,加塞送實驗室檢查。膿汁、水泡液、水腫液、滲出液等都應(yīng)以注射器抽取,抽取后立即送實驗室檢查。
2.3 鼻液、糞便的采集
采集鼻液時,可用滅菌棉拭取,放入試管中,加蓋后立即送實驗室檢查。在以上材料送達實驗室后,應(yīng)立即制作各種液體材料的涂片,進行固定、染色、顯微鏡檢查。病豬生前,可用消毒棉拭子從直腸中掏??;剖開病豬尸體后,可選取適宜的腸段5~10 cm,兩端結(jié)扎后,剪斷取出放入平皿中送實驗室檢查。
2.4 膽汁、內(nèi)臟器官的采集
可將豬膽囊整個取出,放入平皿中送實驗室檢查。淋巴結(jié)可連同周圍的脂肪整個采??;肝、脾、肺、腎臟、腦和脊髓,可選取病變明顯部位切?。╨ cm×1 cm)一塊,分別放入盛有PBS生理鹽水的平皿內(nèi),立即送實驗室檢查。
不同的病原微生物具有不同的嗜組織性。侵入機體后大多集中分布于所嗜組織內(nèi)。因此,采取病料時根據(jù)臨床診斷、流行病學(xué)材料分析所示疾病的種類和病原體的嗜組織性,來決定采取哪些組織和器官?,F(xiàn)將不同傳染病應(yīng)采集的病料歸納如下:對于惡性水腫,生前取患部水腫液,死后取肝臟及患部水腫液;對于巴氏桿菌病,生前取血液,死后取心血、肝、脾、肺、淋巴結(jié);對于大腸桿菌病,死后取前段小腸內(nèi)容物及腸粘膜;對于仔豬副傷寒,生前急性采集血液、糞便,慢性取關(guān)節(jié)液、膿汁;流產(chǎn)母豬采胎衣、胎兒,死后取血液、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、膽汁;對于慢性萎縮性鼻炎,生前取深部鼻黏液,死后取豬頭上頜、深部鼻粘膜。
懷疑有以下病癥時,在采取病料時應(yīng)注意防護和防止細菌散布。對于炭疽,生前取末梢血和炭疽癰的分泌物或滲出液,死后取血液、脾、炭疽癰組織、耳朵;對于結(jié)核病,生前取乳汁、糞便、尿、精液、陰道分泌物、膿汁,死后取有病變的肺臟和其他器官組織;對于豬丹毒,生前急性采血液,亞急性采皮疹滲出液,慢性采關(guān)節(jié)液,死后取血液、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、膽汁,尸體腐敗取長骨。
S828
B
1001-0084(2017)03-0063-01
2017-02-17
邵明奇(1973-),男,內(nèi)蒙古扎魯特旗人,獸醫(yī)師,主要從事動物檢疫,疫情監(jiān)測工作。