王 朋，劉 佳，倪梓元，張二偉,桑 翠，費 瑜*

(1．長春市中心醫(yī)院 ICU科,吉林 長春130051；2．吉林大學第二醫(yī)院 心內科；3．吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎內科)

*通訊作者

慢性房顫患者心房組織中SOCS-1和IL-23水平的動態(tài)變化與房顫的關系

王 朋1，劉 佳2，倪梓元3，張二偉2,桑 翠2，費 瑜2*

(1．長春市中心醫(yī)院 ICU科,吉林 長春130051；2．吉林大學第二醫(yī)院 心內科；3．吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎內科)

近年來，有關炎癥與炎癥因子在房顫(AF)發(fā)病過程中的作用越來越引起人們重視。白細胞介素-23(IL-23)主要是由活化的單核巨噬細胞及樹突狀細胞分泌的炎癥細胞因子，與許多炎癥疾病有關,有學者發(fā)現(xiàn)它參與了AF的病理過程[1]。細胞因子信號轉導負調控因子-1(SOCS-1)是由炎癥因子激活JAK/STAT通路產生的一種炎癥因子，它反過來通過抑制該通路對炎癥反應有負調控作用，本文對慢性AF患者心房組織中SOCS-1和IL-23水平進行檢測，探討炎癥因子與AF的關系。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 依據(jù)《赫爾辛基宣言》精神選擇20例行心外科手術患者。房顫(AF)組10例，男5例，女5例，年齡52.1±10.05歲，AF持續(xù)時間在6個月以上。竇性節(jié)律(SR)組10例，男4例，女6例，年齡41.2±18.75歲。兩組無其它心律失常病史。所有病例均行常規(guī)檢查(心電圖、胸片、心彩及相關實驗室檢查)，并排除糖尿病、近期感染性疾病、嚴重的肝腎功能不全、免疫結締組織性疾病、腫瘤。術前停用至少5個半衰期以上藥物(如阿司匹林、波立維、降脂)。兩組在心功能和疾病種類有可比性。

1.2 實驗材料 SOCS-1上游引物：5′-CACGCACTTCCGCACATTCC-3′，下游引物:5′-TCCAGCAGCTCGAAGAGGCA-3′，擴增片段大小為280 bp；GAPDH上游引物：5′-CTGCACCACCAACTGCTTAG-3′，下游引物：5′-TGAAG TCAGAG GAGAC CACC-3′，擴增片段長度為407 bp，由生工生物工程(上海)有限公司合成。人IL-23 ELISA試劑盒(北京邦定泰克生物技術有限公司)。SOCS-1 antibody和羊抗兔二抗 (宜百康生物科技有限公司)。

1.3 實驗方法 在心臟停跳前取100mg右心耳組織，去除血液及脂肪組織，一部分用Masson染色法觀察形態(tài)變化，在每張切片中選取5個不同的視野，用圖像處理系統(tǒng)拍照，并經圖像分析軟件處理，將得出數(shù)據(jù)取平均值，膠原容積積分(CVF)計算公式為：每個視野中間質纖維化的總面積/(總的結締組織面積+心肌組織面積)。其余部分組織通過液氮瓶轉入-70℃冰箱凍存?zhèn)溆?。IL-23的水平用ELISA法測定，SOCS-1蛋白及mRNA的表達用Western-blotting及RT-PCR法檢測。

2 結果

2.1 慢性AF患者心房組織形態(tài)學變化

SR組患者有排列整齊心肌細胞，心肌間質有少量膠原纖維。AF組膠原結締組織增生明顯，正常心肌細胞排列被打亂，心肌肌束被增生組織分隔。見圖1、2。

圖1 SR組心房組織形態(tài)學變化(100×1) 圖2 AF組心房組織形態(tài)學變化(100×1)

2.2 兩組心房組織中IL-23 水平和CVF的變化

AF組心房組織中IL-23水平〔(24.03±4.38)pg/L〕明顯高于SR組〔(17.21±3.03)pg/L〕(P<0.05)；AF組CVF〔17.90±2.98)%〕明顯高于SR組〔(14.19±2.54)%〕(P<0.05)；AF患者心房組織中IL-23的水平與CVF呈正相關(r=0.68,P<0.05)。

2.3 兩組心房組織中SOCS-1蛋白及mRNA的表達

由表1、圖3可見，AF組心房組織中SOCS-1蛋白及基因表達明顯升高(P<0.05)。

表1 兩組心房組織中SOCS-1蛋白及mRNA的表達

與SR組比較，*<0.05。

圖3 兩組心房組織中SOCS-1蛋白及SOCS-1mRNA的表達

3 討論

一般來說，IL-23與其效應細胞上的IL-23R結合，通過激活JAK/STAT信號轉導途徑，產生多種生物活性物質，這些生物活性物質一方面可使炎癥反應擴大，另一方面還可促進MCP-1和MMPs等分泌，結果導致纖維結締組織增生。SOCS是炎癥因子激活JAK/STAT通路的產物，它的產生不僅對已被激活的JAK/STAT途徑有抑制作用，進而抑制炎癥反應[2-5]，而且還可減少MMPs、TIMPs和粘附分子的表達，抑制纖維化的形成[6,7]。本實驗在證明AF組膠原結締組織增生明顯，正常心肌細胞排列被打亂，心肌肌束被增生組織分隔；AF患者心房組織中IL-23水平明顯升高的同時[1,8,9]，還發(fā)現(xiàn)IL-23水平與CVF呈正相關性；AF患者SOCS-1的蛋白表達與mRNA的含量明顯高于對照組，提示IL-23水平在促成AF患者的心房結構重構過程中受到SOCS-1對抗，它們相互影響，相互作用使得AF得以維持。當然目前有關兩者相互作用導致AF更確切機制還不十分清楚，有待于進一步研究。

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2016-04-25)