柴姣

摘 要：目的：探討Rb和PCNA基因在宮頸癌發(fā)生中的作用。方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測Rb和PCNA基因在20例早期宮頸癌和20例正常黏膜中的表達。結(jié)果：Rb在早期癌中的表達低于正常黏膜（P<0.05），PCNA在早期癌中的表達高于正常黏膜（P<0.05）。結(jié)論：Rb和PCNA與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)，他們的變化是宮頸癌發(fā)生中的早期事件。

關(guān)鍵詞：Rb；PCNA；早期宮頸癌；免疫組織化學(xué)

中圖分類號：R737 文獻標識碼：A 文章編號：1671-2064（2017）05-0194-01

宮頸癌是一種很常見的婦科惡性腫瘤，在我國居于婦科惡性腫瘤的第一位。宮頸癌早期癥狀一般不明顯，大部分患者發(fā)現(xiàn)癥狀去就診時已處于中晚期，治療效果很差。如果能做到宮頸癌的早期診斷，經(jīng)過以手術(shù)為主的綜合治療，早期宮頸癌患者的5年生存率可達90%以上。所以，提高早期宮頸癌診斷率非常有助于提高宮頸癌的治療效果。

我們擬通過對早期宮頸癌組織中Rb和PCNA表達的檢測，探討二者在宮頸癌發(fā)生中的作用及其相互關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料

20例早期宮頸癌和20例正常宮頸黏膜標本均為安陽市第三人民醫(yī)院手術(shù)標本。組織學(xué)類型：早期癌均為鱗癌。所有標本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋切片；抗體及免疫組化試劑盒均購自北京中杉公司。

1.2 方法

免疫組織化學(xué)S-P法：切片常規(guī)脫蠟水化，高壓抗原熱修復(fù)，其余步驟按試劑說明書上進行。Rb和PCNA的抗體稀釋度為均為1：100，用已知陽性切片作為陽性對照，用PBS代替一抗做陰性對照。

1.3 結(jié)果判定

細胞核內(nèi)見均勻一致的棕黃色顆粒為陽性，根據(jù)陽性細胞的數(shù)量進行結(jié)果判定：陽性細胞數(shù)低于5%為陰性（-），陽性細胞數(shù)大于等于5%為陽性（+）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用Fishers精確概率檢驗，以α=0.05作為檢驗水準。

2 結(jié)果

Rb在早期癌和正常黏膜中的陽性率分別為65%（13/20）和100%（20/20），Rb在早期癌中與正常黏膜相比表達降低（P<0.05），見表1；PCNA在早期癌和正常黏膜中的陽性率分別為85%（11/20）和20%（20/20），PCNA在早期癌中與正常黏膜相比表達增高（P<0.05），見表2。經(jīng)Spearman等級相關(guān)檢驗，Rb和PCNA的表達存在負相關(guān)關(guān)系。

3 討論

Rb基因（視網(wǎng)膜母細胞瘤易感基因）長約180kb，基因定位于13q14.2-q14.3，它在人類所有組織中均廣泛表達，編碼的蛋白產(chǎn)物為110kD的核磷酸蛋白，其蛋白產(chǎn)物能抑制細胞生長，因此缺乏這種正常的活性產(chǎn)物，將導(dǎo)致細胞增殖失控。Rb基因是第一個被廣泛研究和確定的抑癌基因，人體許多腫瘤，包括食管癌[1]，肺癌[2]，肝癌等，都已發(fā)現(xiàn)Rb基因的點突變，重排和丟失的改變，Rb基因的表達降低。增殖細胞核抗原，簡稱PCNA，由Miyachi等于1978年首次發(fā)現(xiàn)并命名。腫瘤細胞具有旺盛的增殖活性，而PCNA可作為評價細胞增殖狀態(tài)的指標。因此，國內(nèi)外在許多腫瘤中進行了PCNA的研究，發(fā)現(xiàn)PCNA在很多腫瘤中存在表達增高的情況，比如食管癌，肺癌，乳腺癌等。

本實驗結(jié)果顯示，Rb在早期癌中與正常黏膜相比呈表達降低（P<0.05）， PCNA在早期癌中與正常黏膜相比表達增高（P<0.05）。這些提示Rb和PCNA的異常在宮頸癌的早期發(fā)生中可能起重要作用，是宮頸癌發(fā)生中的早期事件。兩者的表達呈負相關(guān)關(guān)系，提示Rb的表達降低和PCNA的表達增高可能共同參與了宮頸癌的發(fā)生。兩者在宮頸癌中具體的作用機制，還有待于進一步深入研究。

參考文獻

[1]Characterization of tumor suppressive function of cornulin in esophageal squamous cell carcinoma.Chen K， Li Y， Dai Y，et al.PLoS One. 2013 Jul 24；8（7）：e68838.

[2]Expression of the lncRNA Maternally Expressed Gene 3 （MEG3） Contributes to the Control of Lung CancerCell Proliferation by the Rb Pathway.Kruer TL， Dougherty SM， Reynolds L， et al.PLoS One. 2016 Nov 10；11（11）：e0166363.