郝 鋼 韓 峰 盛 惟

(內(nèi)蒙古自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000)

在世界范圍內(nèi),心血管疾病是人類死亡的主要原因。高脂血癥是導(dǎo)致心血管疾病的主要因素[1]。高脂血癥會導(dǎo)致冠心病、心肌梗死、腦卒中和腎功能衰竭等非常嚴(yán)重的后果。探究高脂血癥的預(yù)防、治療以及尋找高效低毒的降血脂新藥,早已成為目前國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn),而研究血脂代謝的關(guān)鍵在于選擇一個理想的高血脂動物模型。有關(guān)應(yīng)用于降血脂和抗動脈粥樣硬化研究的動物主要有鼠類、鳥類、兔、豬以及非人靈長類動物[2]。目前，廣泛開展的蒙藥及蒙藥復(fù)方制劑治療高脂血癥的研究中,實(shí)驗(yàn)性動物模型的制備具有十分重要的作用[3]。Triton wr-1339 (tyloxapol ,簡稱 Triton)是一種表面活性劑。它可以抑制卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶、影響脂蛋白之間的脂質(zhì)交換和形成脂蛋白復(fù)合物 。同時也抑制脂質(zhì)在血液中的清除,使血脂升高[4]。蒙藥保利爾膠囊系由純蒙藥制成的復(fù)方制劑，具有良好的降血脂作用、療效持久穩(wěn)定。本實(shí)驗(yàn)旨在通過建立兩種高脂血癥模型，研究保利爾膠囊對血脂的作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動物：SPF級雄性SD大鼠，體重180～250g。購于北京市海淀區(qū)興隆實(shí)驗(yàn)動物養(yǎng)殖場，動物質(zhì)量合格證號：SCXK(京)2011-0006。

實(shí)驗(yàn)環(huán)境：內(nèi)蒙古食品藥品檢驗(yàn)所SPF級動物實(shí)驗(yàn)室，動物使用許可證號：SYXK(蒙)2011-0002。飼養(yǎng)條件：溫度：22～23℃、濕度：40%～50%。飼料購于北京科澳協(xié)力飼料有限公司，批號：14023211。飲水：LHW-200型動物飲水機(jī)，由重慶浪華實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)。

1.2 藥品與試劑：保利爾膠囊：市售；Triton wr-1339：Sigma公司，批號：MKBP8657V；辛伐他汀片：杭州默沙東制藥有限公司，批號：130225；生理鹽水：山東齊都藥業(yè)有限公司，批號：1A14012902；生化分析儀試劑盒:邁克生物科技有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器：7020生化分析儀：日立公司;電子d平AE100：梅特勒-托利多公司；DL-5000醫(yī)用離心機(jī)：上海菲恰爾分析儀器有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 保利爾膠囊對高脂飼料高脂血癥模型的影響：選取健康雄性SD大鼠60只，每組10只，分成6組，分別是空白對照組、模型對照組、辛伐他汀對照組、保利爾膠囊高劑量組(0.9g/kg)、保利爾膠囊中劑量組(0.45g/kg)和保利爾膠囊低劑量組(0.225g/kg)。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，空白對照組用普通飼料喂養(yǎng)，其余6個劑量組給予高脂飼料喂養(yǎng)，飼養(yǎng)四周后，每d灌胃給藥，共給藥8周后，禁食12h自由飲水，用乙醚麻醉后，腹主動脈取血,1000rpm，離心10min，取血清，用生化分析儀測定大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、載脂蛋白B(APOB)、脂蛋白a(LPA)。

2.2 統(tǒng)計學(xué)方法：使用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用表示。

2.3 保利爾膠囊對Triton wr-1339大鼠高血脂癥模型的影響：選取健康雄性SD大鼠60只，每組10只，分成6組，分別是空白對照組、模型對照組、辛伐他汀對照組、保利爾膠囊高劑量組(0.9g/kg)、保利爾膠囊中劑量組(0.45g/kg)和保利爾膠囊低劑量組(0.225g/kg)。

根據(jù)文獻(xiàn)設(shè)計實(shí)驗(yàn)方法[5-7]，大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,預(yù)防性灌胃給藥15d，空白對照組和模型對照組灌胃等量生理鹽水。其他各組分別灌胃辛伐他汀溶液和保利爾膠囊高劑量溶液，保利爾膠囊中劑量溶液，保利爾膠囊低劑量溶液。

給藥15d后，禁食12h自由飲水，除空白對照組外其他各組尾靜脈注射Triton wr-1339 220mg/kg。24h后，用乙醚麻醉，腹主動脈取血, 放置，3000rpm，離心10 min，取血清，用生化分析儀測定大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、載脂蛋白B(APOB)、脂蛋白a(LPA)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 保利爾膠囊對高脂飼料高脂血癥模型的影響： 由表1中可見，模型對照組與空白對照組的TC、LDL分別進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異，證明造模成功。其中，模型對照組血清中的TC比空白組的升高7.7倍，LDL升高26.5倍；模型對照組血清中的TG、LPA低于空白對照組；而模型對照組血清中的HDL高于空白對照組。

辛伐他汀組與空白對照組各項(xiàng)分別進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05)，TC、LDL均有顯著性差異。高劑量組、中劑量組、低劑量組與空白對照組進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05)，TC、LDL均有顯著性差異。辛伐他汀組與模型對照組分別進(jìn)行TC、LDL的t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。高劑量組、中劑量組、低劑量組與模型對照組分別進(jìn)行TC、LDL的t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。結(jié)果見表1。

表1 保利爾膠囊對大鼠高血脂模型的影響

注：△，△△與空白組比較P<0.05，P<0.01；*，**與模型組比較P<0.05，P<0.01。

3.2 保利爾膠囊對Triton wr-1339造大鼠血脂模型的影響：由表2中可見，模型對照組與空白對照組各項(xiàng)分別進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異，證明造模成功。模型對照組血清中的TC比空白對照組的升高5.6倍，TC升高27.9倍、LDL升高2.2倍；而模型對照組血清中的HDL和LPA均低于空白對照組。

辛伐他汀組與空白對照組各項(xiàng)分別進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。其中辛伐他汀組的TC、TG和LDL比空白對照組的高；模型組的HDL和LPA比空白對照組的少。高劑量組與空白對照組進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05),均有顯著性差異。其中高劑量組的TC、TG和LDL比空白組的高。高劑量組的HDL和LPA比空白對照組的少。中劑量組與空白對照組進(jìn)行t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。其中中劑量組TC、TG和LDL比空白對照組的高。中劑量組的HDL和LPA比空白對照組的低。

辛伐他汀組與模型對照組分別進(jìn)行TC、TG、LDL和LPA的t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。高劑量組與模型對照組分別進(jìn)行TC、TG、LDL和LPA的t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。中劑量組與模型對照組分別進(jìn)行TC、TG、LDL和LPA的t檢驗(yàn)(P>0.05)，均有顯著性差異。結(jié)果見表2。

表2 保利爾膠囊對wr-1339造大鼠高血脂模型的影響

注：△，△△與空白組比較P<0.05，P<0.01；*，**與模型組比較P<0.05，P<0.01。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

保利爾膠囊在高脂飼料高脂血癥模型的實(shí)驗(yàn)中顯著的降低了總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)的升高的幅度；保利爾膠囊在Triton wr-1339模型的實(shí)驗(yàn)中顯著地降低了總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的升高的幅度，同時它顯著的增大了脂蛋白(LPA)的升高幅度。兩個模型實(shí)驗(yàn)均說明保利爾膠囊具有降低血脂的作用。

5 討論

5.1 高脂血癥的主要特征是總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)的顯著升高或高密度脂蛋白(HDL)的顯著降低。大鼠是目前研究高脂血癥最常用的動物，能較好地反映多種實(shí)驗(yàn)因素對脂質(zhì)吸收、分解及合成等代謝環(huán)節(jié)的影響，同時具有成本低、易于飼養(yǎng)、取血量大等優(yōu)點(diǎn)，因而被作為高脂血癥動物模型廣泛用于降脂藥物的研究[8]。此外，動物性別也是一個很大的影響因素，由于體內(nèi)激素水平的不同，一般而言，雄性動物較雌性動物容易形成高脂血癥。所以，目前復(fù)制高脂動物模型大多選用雄性動物[9]。

5.2 通過保利爾膠囊對高脂飼料高脂血癥模型和Triton wr-1339大鼠高血脂癥模型實(shí)驗(yàn)的研究，證明保利爾膠囊和辛伐他汀降低血脂水平的幅度相近。

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