林玉萍 王 津2 趙聲蘭 虎春艷

1．云南中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)院，昆明 650500；2．云南省昆明市公安局官渡分局，昆明 650200

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云南娃兒藤莖葉揮發(fā)性成分的GC-MS分析研究

林玉萍*王 津2*趙聲蘭*虎春艷*

1．云南中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)院，昆明 650500；2．云南省昆明市公安局官渡分局，昆明 650200

利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)對云南娃兒藤(TylophorayunnanensisSchltr)莖葉中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。從云南娃兒藤莖葉中鑒定出18個化合物，其結(jié)構(gòu)類型多樣，并運(yùn)用氣相色譜峰面積百分比法確定各個化合物的相對百分含量。其結(jié)果為云南娃兒藤的化學(xué)成分和藥理活性的研究提供理論依據(jù)。

云南娃兒藤；揮發(fā)性成分；氣相色譜-質(zhì)譜法

云南娃兒藤(TylophorayunnanensisSchltr)為蘿藦科娃兒藤屬植物，其根在彝藥中稱為小白薇，常用來治療尿路感染、腎炎、痢疾、氣虛無力等[1]。其主要生長于海拔2000m以下的山向陽曠野及草地，主產(chǎn)于云南、貴州和四川，云南分布較為廣泛，在大理、楚雄、昆明等均有分布[2]。娃兒藤屬植物在前期研究中具有抗腫瘤、抗炎活性[3-4]。在前期的活性研究中發(fā)現(xiàn)[5]，云南娃兒藤乙醇提取物和不同萃取部位對炎癥晚期肉芽組織增生有顯著的抑制作用[5]。為進(jìn)一步明確抗炎活性成分，促進(jìn)資源的綜合利用，研究利用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)對其莖葉中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析鑒定，以期為進(jìn)一步全面認(rèn)識云南娃兒藤的化學(xué)成分和生物活性研究提供理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 材料與試劑 云南娃兒藤莖葉于采自云南楚雄，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室普春霞副教授鑒定為蘿摩科Asclepiadaceae娃兒藤屬Tylophora云南娃兒藤TylophorayunnanensisSchltr，本論文研究材料為云南娃兒藤的莖葉；石油醚(分析純，天津市風(fēng)帆化學(xué)試劑科技有限公司)，甲醇(色譜級，德國默克公司)。

1.2 儀器與設(shè)備 Varian CP 3900-Varian saturn 2100T 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)；H.H.S11-4電熱恒溫水浴鍋； RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(亞榮生化儀器廠)。

2 方法

2.1 樣品處理方法 200g干燥的楚雄產(chǎn)地云南娃兒藤的莖葉，粉碎成粗粉，以石油醚回流提取3次，每次3h，合并3次提取液，減壓回收溶劑，得揮發(fā)性組分。取少量揮發(fā)性樣品，將樣品溶于色譜級甲醇中，備測。2.2 氣相色譜條件 色譜柱：DB-5(30m×0.25mm毛細(xì)柱；進(jìn)樣器溫度：280℃；升溫程序條件：初溫80℃，保持3min，程序升溫 20℃/min，終溫280℃保持10min；載氣：He(99.998%)，流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量1μL；分流比：30∶1。

2.3 質(zhì)譜條件 EI離子源，離子源溫度：150℃，Manifold溫度：50℃，傳輸線溫度：280℃；掃描范圍m/z：40～650；背景質(zhì)量：45u；標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖檢索庫NIST。

3 結(jié)果與分析

對從石油醚提取得到的揮發(fā)性成分樣品進(jìn)行GC-MS分析，其總離子圖見圖1。經(jīng)過質(zhì)譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)(NIST)自動檢索上述樣品的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，將相似度低、離子峰低、無標(biāo)準(zhǔn)譜核對的組分等去除，得到揮發(fā)性成分。各組分的相對含量根據(jù)總離子圖由計算機(jī)采用峰面積百分比法計算而得。從云南娃兒藤莖葉的揮發(fā)性成分樣品中鑒定出18 個化合物，結(jié)果見表1。

表1 云南娃兒藤莖葉揮發(fā)性成分GC-MS分析結(jié)果

續(xù)表1

表1 云南娃兒藤莖葉揮發(fā)性成分GC-MS分析結(jié)果

以上分析結(jié)果表明，從云南娃兒藤莖葉石油醚提取的揮發(fā)性成分中分析鑒定了18個化合物，分別為甾醇類、黃酮類、生物堿類、酯類、羧酸類等，其結(jié)構(gòu)類型多樣、復(fù)雜，具有多種生物活性。其中馬錢子堿具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和抗心律失常、鎮(zhèn)痛等作用[6-9]，角鯊烯具有調(diào)控膽固醇的代謝、抗氧化、抗腫瘤、保肝等作用[10-11]，麥角甾醇具有抗菌、抗結(jié)核等作用[12-13]，β-谷甾醇具有抗氧化、抗腫瘤等作用[14-15]。由于石油醚提取得到的揮發(fā)性成分，極性較小，難于分離得到單一化合物，通過GC-MS可以對其化學(xué)成分進(jìn)行分析和鑒定，為其進(jìn)一步的研究鑒定基礎(chǔ)。

4 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)利用氣相色譜-質(zhì)譜法研究了云南娃兒藤中的揮發(fā)性成分，鑒定其中18 種主要組分，并確定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)，這些結(jié)果為云南娃兒藤的活性成分的研究和資源的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

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GC-MS Analysis of Volatile Components from the Stems and Leaves of Tylophora yunnanensis Schltr

LIN Yuping1WANG Jin2*ZHAO Shenglan1HU Chunyan1

1.College of traditional Chinese medicine, Yunnan university of traditional Chinese medicine,Kunming 650500,China;2.Kunming police station guandu district substation, Kunming 650200,China

To analyze the chemical constituents of volatile components fromTylophorayunnanensisSchltr. The air-dried stems and leaves ofTylophorayunnanensisSchltr were extracted with the petroleum ether and identified by GC-MS.18 constituents were identified from the petroleum ether extraction ofTylophorayunnanensisSchltr，and the relative contents of the components were determined with area percentage method. The research provides a theoretical basis for the study of chemical constituents and pharmaceutical activities ofTylophorayunnanensisSchltr.

TylophorayunnanensisSchltr; Volatile components; GC-MS

2017年云南省科技廳-云南中醫(yī)學(xué)院聯(lián)合專項(xiàng)項(xiàng)目；云南省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(09Z0046；2014z119)。

林玉萍(1975-)，女，漢族，副教授，碩士，研究方向?yàn)樘烊凰幬锘钚猿煞帧-mail：11217005@qq.com

王津(1975-)，男，漢族，本科，講師，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物理化檢驗(yàn)研究。E-mail:540275325@qq.com

R284.1

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1007-8517(2017)08-0024-03

2017-02-18 編輯：梁志慶)