張建華, 趙宗霞, 張 瑾

(西安醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 陜西 西安, 710038)

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HPV-DNA聯(lián)合HPV-E6蛋白檢測(cè)在宮頸癌篩查中的價(jià)值

張建華, 趙宗霞, 張 瑾

(西安醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科, 陜西 西安, 710038)

目的 探討HPV-DNA聯(lián)合HPV-E6蛋白檢測(cè)用于篩查宮頸癌的價(jià)值。方法 選取近期來(lái)我院門(mén)診就診檢查的患者中選取宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)為陽(yáng)性的患者作為觀察對(duì)象，共計(jì)525例，并對(duì)以上患者分別行HPV-DNA檢測(cè)、HPV-E6蛋白檢測(cè)及宮頸活組織檢查，比較HPV-DNA及HPV-E6蛋白兩種單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于宮頸癌篩查的臨床價(jià)值。結(jié)果 TCT陽(yáng)性的患者中, 375例為子宮頸正?；?qū)m頸炎, 134例為上皮內(nèi)瘤變, 14例為宮頸癌。HPV-DNA檢測(cè)出的陽(yáng)性率在宮頸癌前病變中均顯著高于HPV-E6蛋白檢測(cè)法(P<0.05)。宮頸癌的檢測(cè)率均為100.0%。在上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的檢出率比較中, 3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 其中聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白單獨(dú)檢測(cè)。結(jié)論 隨著宮頸病變程度的加重，檢測(cè)的陽(yáng)性率也逐漸升高, HPV-DNA檢測(cè)具有較高的靈敏度, HPV-E6蛋白檢測(cè)有較高的特異度, 二者聯(lián)合檢測(cè)可提高宮頸病變檢出的靈敏度。

HPV-DNA; HPV-E6蛋白檢測(cè); 宮頸癌; 篩查

宮頸癌屬于女性常見(jiàn)的惡性腫瘤疾病之一，近年來(lái)該病發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)和年輕化，已嚴(yán)重威脅女性的生命健康[1]。宮頸癌的主要治療在于預(yù)防，早期發(fā)現(xiàn)并采取必要的措施是治療宮頸癌的重要手段，也是降低宮頸癌患者發(fā)病率及死亡率的重要途徑[2]。目前臨床上關(guān)于宮頸癌發(fā)病的重要致病因素報(bào)道較多，但最為主要的致病因素仍然以高危型人乳頭瘤病毒(HPV)為主[3]。中國(guó)已逐步加強(qiáng)對(duì)于宮頸癌的篩查工作，其中以HPV-DNA檢測(cè)作為重要的輔助手段，然而HPV-DNA在凋亡細(xì)胞及細(xì)胞碎屑中也可表達(dá)，故單純的采用HPV-DNA檢測(cè)有可能造成宮頸病變的過(guò)度治療[4]。有研究[5]發(fā)現(xiàn), HPV-E6基因能夠抑制腫瘤抑制因子p53的凋亡作用，可導(dǎo)致HPV癌蛋白的表達(dá)，在抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)腫瘤表達(dá)等方面起到至關(guān)重要的作用。本文通過(guò)比較HPV-DNA與HPV-E6蛋白聯(lián)合檢測(cè)在正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌中的檢出率，評(píng)價(jià)其在宮癌篩查中的靈敏度及特異度，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月—2015年3月來(lái)本院門(mén)診就診檢查的患者中宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)為陽(yáng)性(以無(wú)明確意義的非典型細(xì)胞的改變及其以上者判斷為細(xì)胞學(xué)結(jié)果陽(yáng)性)的患者作為觀察對(duì)象，共計(jì)525例。年齡20～85歲，平均年齡(42.5±12.5)歲，對(duì)所有患者均行HPV-DNA檢測(cè)、HPV-E6蛋白及宮頸活組織檢查，最終診斷以病理結(jié)果為準(zhǔn)。所有患者均簽署知情同意書(shū)。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 所有患者自愿行宮頸癌篩查; ② 所有患者否認(rèn)宮頸癌病史; ③ 患者近期至少1周內(nèi)無(wú)性生活, 1年內(nèi)未行宮頸活檢; ④ 患者近期無(wú)陰道感染史，未行陰道及宮頸操作或治療史; ⑤ 檢查期間月經(jīng)未來(lái)潮。排除標(biāo)準(zhǔn)：患者有自身免疫性疾病，自身合并有嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙，無(wú)性生活史，既往有宮頸癌病史或合并有惡性腫瘤病史，既往行全子宮切除術(shù)或治療史。

1.2 方法

所有患者仰臥于婦科專(zhuān)用檢查床上，用陰道內(nèi)窺器充分暴露宮頸，并用無(wú)菌紗布擦凈宮頸口分泌物。使用TCT采樣專(zhuān)用宮頸刷，沿宮頸鱗柱狀交界部位順序旋轉(zhuǎn)10圈，并將采集的脫落細(xì)胞裝在專(zhuān)用固定液的收集瓶?jī)?nèi)，收集完畢后，填寫(xiě)患者相關(guān)信息送病理科待檢。HPV-DNA采樣使用專(zhuān)用采樣刷，沿宮頸鱗柱狀交界部位順序旋轉(zhuǎn)5圈，將采集的脫落細(xì)胞裝在含有保存液的HPV-DNA專(zhuān)用采樣管內(nèi)，收集完畢后，填寫(xiě)患者相關(guān)信息送病理科待檢。HPV-E6蛋白采樣使用專(zhuān)用棉簽，沿宮頸鱗柱狀交界部位刷取脫落細(xì)胞，并置于干凍管中，送實(shí)驗(yàn)室凍存并檢測(cè)。本次診斷結(jié)果以病例檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn), 525例中TCT檢查陽(yáng)性的患者中有375例患者病理結(jié)果提示宮頸正?；?qū)m頸炎; 136例患者病理結(jié)果提示宮頸上皮內(nèi)瘤變，其中CINⅠ70例、CINⅡ40例、CINⅢ26例; 14例病理結(jié)果診斷為宮頸癌。所有病理診斷結(jié)果均由病理科的病理技師和病理醫(yī)師完成。

2 結(jié) 果

2.1 單獨(dú)使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA與聯(lián)合

檢測(cè)病理結(jié)果的比較

經(jīng)病理科組織病理學(xué)檢查結(jié)果確診的上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)及宮頸癌共150例，HPV-DNA陽(yáng)性率分別為87.1%、90.0%、88.5%、100.0%。HPV-E6蛋白陽(yáng)性率分別為48.6%、55.0%、84.6%、100.0%。二者聯(lián)合陽(yáng)性率分別為91.4%、92.5%、100.0%、100.0%。對(duì)以上4種病理結(jié)果進(jìn)行分析、比較，發(fā)現(xiàn)隨著宮頸病變程度的加重，檢測(cè)的陽(yáng)性率也逐漸升高，其中HPV-DNA檢測(cè)出的陽(yáng)性率在宮頸癌前病變中均顯著高于HPV-E6蛋白檢測(cè)法(P<0.05)。宮頸癌的檢測(cè)率均為100.0%, 無(wú)1例漏診。病理陽(yáng)性者中, HPV-DNA、HPV-E6蛋白及二者聯(lián)合檢測(cè)在上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的檢出率比較中, 3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 其中聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白單獨(dú)檢測(cè)。見(jiàn)表1。

表1 單獨(dú)使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA與聯(lián)合檢測(cè)病理結(jié)果的比較[n(%)]

2.2 單獨(dú)使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA與聯(lián)合檢測(cè)相關(guān)評(píng)價(jià)指標(biāo)的對(duì)比

分析、比較HPV-DNA、HPV-E6蛋白與聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率，發(fā)現(xiàn)HPV-DNA靈敏度高于HPV-E6蛋白檢測(cè)，漏診率少, HPV-E6蛋白檢測(cè)特異度高達(dá)90.7%, 但靈敏度相對(duì)較低，僅為61.3%, 漏診率較高，較HPV-DNA檢測(cè)方法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。聯(lián)合檢測(cè)相對(duì)于單獨(dú)檢測(cè)稍提高靈敏度，降低了漏診率。見(jiàn)表2。

表2 單獨(dú)使用HPV-DNA、HPV-E6蛋白與聯(lián)合檢測(cè)相關(guān)評(píng)價(jià)指標(biāo)的對(duì)比 %

3 討 論

宮頸癌在婦科惡性腫瘤發(fā)病率中位居第2位，該病屬于漸進(jìn)性疾病，宮頸上皮內(nèi)瘤變是發(fā)展為宮頸癌的必經(jīng)之路，而由上皮內(nèi)瘤變發(fā)展為宮頸癌是一個(gè)較為漫長(zhǎng)的過(guò)程，因此對(duì)于預(yù)防宮頸癌發(fā)生的患者來(lái)說(shuō)，早期診治是預(yù)防發(fā)生的宮頸癌的重要措施[6]。近年來(lái)關(guān)于宮頸癌發(fā)病因素最重要的因素之一就是HPV感染，檢測(cè)HPV的方法是目前普遍用于篩查宮頸癌的重要措施[7]。該檢測(cè)方法敏感度較高，可重復(fù)性好，對(duì)于低級(jí)別的CIN特異度高。由于HPV-DNA在壞死及凋亡細(xì)胞中也可被表達(dá)，對(duì)于區(qū)分是宮頸炎還是宮頸癌較為受限，因此在篩查后會(huì)造成過(guò)度診治的可能，對(duì)患者造成不可預(yù)估的傷害[8]。為了提高篩查宮頸癌及癌前病變的特異度，研究[9]發(fā)現(xiàn)HPV-E6是導(dǎo)致宮頸癌及其癌前病變的主要基因, HPV-E6蛋白的表達(dá)與病情的嚴(yán)重程度呈正比。

本研究探討HPV-DNA檢測(cè)及HPV-E6蛋白檢測(cè)兩種單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)應(yīng)用于篩查宮頸癌的價(jià)值。結(jié)果發(fā)現(xiàn), TCT陽(yáng)性的患者中375例為子宮頸正常或?qū)m頸炎, 134例為上皮內(nèi)瘤變，14例為宮頸癌。HPV-DNA檢測(cè)出的陽(yáng)性率在宮頸癌前病變中均顯著高于HPV-E6蛋白檢測(cè)法(P<0.05)。宮頸癌的檢測(cè)率均為100.0%, 無(wú)1例漏診。在上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的檢出率比較中, 3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 其中聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白單獨(dú)檢測(cè)。HPV-DNA靈敏度高于HPV-E6蛋白檢測(cè)，漏診率少, HPV-E6蛋白檢測(cè)特異度高達(dá)90.7%, 但靈敏度相對(duì)較低，僅為61.3%, 漏診率較高，較HPV-DNA檢測(cè)方法有顯著差異(P<0.05)。隨著宮頸癌的程度的加重，兩種檢測(cè)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率也呈上升趨勢(shì)[10]。該結(jié)果也從側(cè)面反映出，宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展與HPV的感染關(guān)系密切，因此臨床上在篩查宮頸癌時(shí)，尤其要著重檢測(cè)HPV[12]。有報(bào)道[13]指出, HPV感染的陽(yáng)性率與宮頸病變的程度平行，在宮頸癌篩查的早期，檢測(cè)HPV感染具有重要的意義。盡管HPV-DNA檢測(cè)操作簡(jiǎn)單，可重復(fù)性好，靈敏度高，但也存在不足之處，由于該檢測(cè)特異度低，會(huì)導(dǎo)致誤診率的增高，在一定程度上會(huì)發(fā)生過(guò)度治療的可能，因此，結(jié)合其他輔助檢查，幫助提高宮頸病變的特異度顯得尤為重要[14]。本研究發(fā)現(xiàn)HPV-DNA檢測(cè)的靈敏度高，特異度低, HPV-E6蛋白檢測(cè)特異度高，但靈敏度較低。因此采用聯(lián)合檢測(cè)，可進(jìn)一步降低漏診率，且增加靈敏度，在臨床上篩查宮頸癌時(shí)具有較高的參考價(jià)值。

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Value of HPV-DNA combined with HPV-E6 protein in screening of cervical cancer

ZHANG Jianhua, ZHAO Zongxia, ZHANG Jin

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,TheSecondAffiliatedHospitalofXi′anMedicalCollege,Xi′an,Shaanxi, 710038)

Objective To explore the value of HPV-DNA combined with HPV-E6 protein in the detection of cervical cancer. Methods A total of 525 patients with positive TCT were selected and treated with HPV-DNA detection, HPV detection of E6 protein and cervical biopsy. Value of HPV-DNA and HPV-E6 proteins single application and combined detection for cervical cancer screening was compared. Results In the patients with positive TCT, 375 cases were normal or cervicitis, 134 cases were intraepithelial neoplasia, and 14 cases were cervical cancer. The positive rate of HPV-DNA was significantly higher than that of HPV-E6 protein in cervical precancerous lesions (P<0.05). The detection rate of cervical cancer was 100%. In comparison of the detection rate of intraepithelial neoplasia and cervical cancer, there were significant differences between the three groups (P<0.05), and the positive rate of combined detection was higher than that of HPV-DNA and HPV-E6 protein. Conclusion With the increasing severity of cervical lesions, the positive detection rate increases gradually. HPV-DNA has higher detection sensitivity, and detection of HPV-E6 protein has high specificity. The combined detection can improve the sensitivity of cervical lesions.

HPV-DNA; HPV-E6 protein detection; cervical cancer; screening

2017-01-12

陜西省教育廳科研課題(2013JK0797)

R 737.33

A

1672-2353(2017)07-074-03

10.7619/jcmp.201707020