李莉華 何路軍 馬印圖

核酸檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用于血站血液篩查的使用前確認(rèn)*

李莉華 何路軍 馬印圖

目的 回顧性分析華益美核酸檢測(cè) （nucleic acid technology，NAT）系統(tǒng)應(yīng)用于血站實(shí)驗(yàn)室血液篩查的使用前確認(rèn)的內(nèi)容和方法，為采供血單位順利開(kāi)展核酸檢測(cè)提供參考。方法 按照《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》及《血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證指南》的要求進(jìn)行使用前確認(rèn)，主要包括檢測(cè)設(shè)備的安裝、運(yùn)行、性能確認(rèn)，實(shí)驗(yàn)人員資質(zhì)和能力、試劑性能、核酸實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件、信息系統(tǒng)的確認(rèn)，以及標(biāo)本處置和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等方面。結(jié)果 通過(guò)對(duì)華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng)使用前的確認(rèn)，為后續(xù)NAT有效、平穩(wěn)開(kāi)展提供了文件化的證據(jù)，提高了血站實(shí)驗(yàn)室核酸檢測(cè)的工作質(zhì)量。結(jié)論 有效開(kāi)展核酸檢測(cè)系統(tǒng)使用前確認(rèn)活動(dòng)是常規(guī)核酸檢測(cè)的前提，是降低實(shí)際運(yùn)行過(guò)程中風(fēng)險(xiǎn)的有效手段。

血站 核酸檢測(cè)（NAT） 血液篩查 實(shí)驗(yàn)室管理 系統(tǒng)確認(rèn)

根據(jù)我國(guó)《衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展“十二五”規(guī)劃》的要求，采供血機(jī)構(gòu)實(shí)現(xiàn)“到2015年底，血液篩查核酸檢測(cè)基本覆蓋全國(guó)”的工作要求，目前，國(guó)內(nèi)多數(shù)采供血機(jī)構(gòu)基本實(shí)現(xiàn)了NAT全覆蓋。使得NAT系統(tǒng)在獻(xiàn)血者血液篩查中得到極大的應(yīng)用。NAT直接檢測(cè)病毒核酸，具有極高的靈敏度和特異性，操作技術(shù)要求高，檢測(cè)系統(tǒng)運(yùn)行狀態(tài)的好壞直接關(guān)系到血液檢測(cè)的結(jié)果和質(zhì)量；特別是部分血站剛剛開(kāi)展，對(duì)NAT實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行模式、系統(tǒng)確認(rèn)等方面不熟悉，工作中存在盲點(diǎn)和誤區(qū)。因此，有效開(kāi)展NAT系統(tǒng)使用前確認(rèn)活動(dòng)是常規(guī)NAT的前提，是降低實(shí)際運(yùn)行過(guò)程中風(fēng)險(xiǎn)的有效手段。本文總結(jié)了華益美NAT系統(tǒng)應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)室血液篩查的使用前確認(rèn)內(nèi)容和確認(rèn)方法，為采供血單位順利開(kāi)展核酸檢測(cè)提供參考。

1 依據(jù)與原則

1.1 NAT系統(tǒng)使用前確認(rèn)的依據(jù) 核酸檢測(cè)系統(tǒng)使用前確認(rèn)活動(dòng)依據(jù)的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)包括《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證指南》等。

1.2 NAT系統(tǒng)使用前確認(rèn)的基本原則 NAT設(shè)備作為血液篩查實(shí)驗(yàn)室中大型關(guān)鍵設(shè)備之一，在正式投入運(yùn)行前需按照《血站質(zhì)量管理規(guī)范》及《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》的要求進(jìn)行使用前確認(rèn)。而核酸檢測(cè)系統(tǒng)投入使用前開(kāi)展的確認(rèn)活動(dòng)不僅包括設(shè)備的確認(rèn)，其涵蓋范圍更廣泛。因此，確認(rèn)活動(dòng)結(jié)合核酸檢測(cè)的方法學(xué)特性宜遵循以下幾個(gè)原則。

1.2.1 多環(huán)節(jié)全面的原則 NAT系統(tǒng)的使用確認(rèn)包括檢測(cè)設(shè)備的安裝、運(yùn)行、性能確認(rèn)，實(shí)驗(yàn)人員資質(zhì)和能力、試劑性能、核酸實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件、信息系統(tǒng)的確認(rèn)，以及標(biāo)本處置的確認(rèn)等方面。使用前確認(rèn)活動(dòng)應(yīng)考慮到NAT體系相互關(guān)聯(lián)的多個(gè)環(huán)節(jié)。

1.2.2 可測(cè)量量化的原則 確認(rèn)活動(dòng)應(yīng)通過(guò)可以測(cè)量的量化指標(biāo)來(lái)證實(shí)檢測(cè)系統(tǒng)的應(yīng)用是否符合預(yù)期，是否滿足檢測(cè)需求。

1.2.3 可操作適度的原則 NAT系統(tǒng)的確認(rèn)活動(dòng)既要結(jié)合其技術(shù)特點(diǎn)、實(shí)際情況，又要結(jié)合試劑盒使用說(shuō)明書(shū)，確定適宜的確認(rèn)范圍和深度，具有可操作性。

1.3 提出確認(rèn)申請(qǐng)、制定確認(rèn)計(jì)劃 NAT系統(tǒng)確認(rèn)活動(dòng)涉及采供血業(yè)務(wù)流程的多個(gè)相關(guān)部門(mén)，在向業(yè)務(wù)主管部門(mén)提出確認(rèn)申請(qǐng)后，核酸實(shí)驗(yàn)室主管負(fù)責(zé)各部門(mén)的溝通協(xié)調(diào)，制定確認(rèn)計(jì)劃和確認(rèn)方案。實(shí)驗(yàn)室明確確認(rèn)目的、對(duì)象，確認(rèn)活動(dòng)時(shí)間表，小組成員及分工等。制定確認(rèn)方案，以確立各項(xiàng)確認(rèn)內(nèi)容、所需材料、擬用的檢測(cè)方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、結(jié)果結(jié)論等。

2 確認(rèn)與實(shí)施

確認(rèn)實(shí)施階段是確認(rèn)活動(dòng)的重點(diǎn)環(huán)節(jié)，大部分的確認(rèn)活動(dòng)在此階段開(kāi)展。根據(jù)確認(rèn)方案中既定的確認(rèn)內(nèi)容，實(shí)施各項(xiàng)確認(rèn)，評(píng)估所得數(shù)據(jù)是否符合預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)。以華益美NAT系統(tǒng)為例實(shí)施確認(rèn)活動(dòng)。

2.1 NAT設(shè)備安裝、運(yùn)行確認(rèn)

2.1.1 在NAT設(shè)備到貨前首先對(duì)實(shí)驗(yàn)室是否具備安裝條件進(jìn)行評(píng)估，具體核實(shí)的內(nèi)容見(jiàn)表1。

2.1.2 安裝確認(rèn)（IQ）涉及工程質(zhì)量管理規(guī)范在設(shè)備安裝時(shí)的驗(yàn)證［1］，檢查設(shè)備安裝是否正確，一般包括設(shè)備硬件和軟件的安裝。具體安裝確認(rèn)內(nèi)容見(jiàn)表2。

2.1.3 運(yùn)行確認(rèn)（OQ）是檢查設(shè)備的各種參數(shù)設(shè)置和空載運(yùn)行的可靠性和穩(wěn)定性，確保設(shè)備可在要求的范圍內(nèi)正確運(yùn)行［2］。確認(rèn)內(nèi)容見(jiàn)表3。

2.2 實(shí)驗(yàn)人員資質(zhì)和能力確認(rèn) 與血清學(xué)檢測(cè)比較，NAT技術(shù)含量高、操作復(fù)雜，要求實(shí)驗(yàn)人員具備熟練的操作能力，以減少NAT無(wú)效運(yùn)行，避免報(bào)告發(fā)放周期延長(zhǎng)。因此，操作人員能力和資質(zhì)的確認(rèn)也自然成為NAT過(guò)程確認(rèn)的重要組成部分［3］。此次華益美NAT系統(tǒng)的人員培訓(xùn)工作本著少人次多循環(huán)的原則，以保證實(shí)驗(yàn)人員能更多地獨(dú)立操作、獨(dú)立處理問(wèn)題?；趯?shí)驗(yàn)人員除需要具備一定的基礎(chǔ)理論和基本知識(shí)外，更重要的是需要具備熟練的操作能力和應(yīng)急處理能力，以及血液檢測(cè)過(guò)程控制和質(zhì)量管理理念和技能［4］，培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)結(jié)合NAT實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)，涉及理論、實(shí)際操作、流程控制以及應(yīng)急處理等方面，最后采用理論加操作相結(jié)合的考核方式對(duì)培訓(xùn)效果、人員資質(zhì)進(jìn)行評(píng)估。

2.3 NAT系統(tǒng)性能確認(rèn) 性能確認(rèn)（PQ）是通過(guò)模擬檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的方式，進(jìn)行設(shè)備的試運(yùn)行，確認(rèn)設(shè)備是否符合實(shí)驗(yàn)要求［2］。國(guó)際輸血協(xié)會(huì)（International Society Blood Transfusion，ISBT）指出IQ、OQ、PQ是設(shè)備確認(rèn)的3個(gè)連續(xù)階段，并對(duì)具體操作進(jìn)行了說(shuō)明［5］。本實(shí)驗(yàn)室實(shí)施性能確認(rèn)旨在對(duì)已安裝調(diào)試完畢的華益美NAT系統(tǒng)（設(shè)備與試劑）進(jìn)行評(píng)估，確保檢測(cè)性能符合產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)標(biāo)準(zhǔn)。見(jiàn)表4。

2.4 NAT實(shí)驗(yàn)室體系文件的確認(rèn) 我中心實(shí)驗(yàn)室自2009年將NAT應(yīng)用于血液篩查，采用Procleix TIGRIS NAT系統(tǒng)和上海浩源NAT系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，NAT實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理已納入中心質(zhì)量體系中，建立了相應(yīng)的體系文件。根據(jù)《血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證指南》要求：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用經(jīng)過(guò)評(píng)估和確認(rèn)的NAT標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作。本次確認(rèn)活動(dòng)由實(shí)驗(yàn)人員與廠方工程師配合完成編寫(xiě)華益美檢測(cè)系統(tǒng)SOP 及相關(guān)管理程序，重新構(gòu)建NAT實(shí)驗(yàn)室體系文件。

表1 實(shí)驗(yàn)室安裝NAT設(shè)備前評(píng)估的內(nèi)容

表2 華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng)安裝確認(rèn)內(nèi)容

表3 華益美NAT系統(tǒng)運(yùn)行確認(rèn)內(nèi)容

表4 華益美NAT系統(tǒng)性能確認(rèn)主要內(nèi)容

2.5 信息系統(tǒng)的確認(rèn) 血液篩查實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIMS）覆蓋了整個(gè)血液檢測(cè)過(guò)程對(duì)流程、設(shè)備、人員、試劑、耗材、記錄、環(huán)境監(jiān)控等各環(huán)節(jié)的管理和控制，無(wú)論是新建還是在用系統(tǒng)的修改都應(yīng)該實(shí)施全面的確認(rèn)活動(dòng)［6］。本實(shí)驗(yàn)室在啟用新NAT系統(tǒng)前，對(duì)核酸相關(guān)信息系統(tǒng)進(jìn)行了確認(rèn)，包括軟件添加物料、設(shè)備、檢測(cè)方法、設(shè)備接口，采集服務(wù)配置，文件生成，數(shù)據(jù)傳輸，報(bào)告審核簽發(fā)等系列內(nèi)容。

2.6 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 NAT系統(tǒng)投入使用前首先對(duì)其相關(guān)過(guò)程進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，對(duì)可能存在的風(fēng)險(xiǎn)采取措施使之處于可接受范圍內(nèi)。如設(shè)備運(yùn)行的安全控制、故障處理、核酸試劑的庫(kù)存管理、檢測(cè)報(bào)告時(shí)限，實(shí)驗(yàn)人員再培訓(xùn)等方面進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并制定措施。

2.7 形成確認(rèn)報(bào)告 我中心實(shí)驗(yàn)室在華益美NAT系統(tǒng)使用前開(kāi)展了一系列確認(rèn)活動(dòng)，所有測(cè)試結(jié)果有效，各個(gè)確認(rèn)項(xiàng)目達(dá)到各自可接受標(biāo)準(zhǔn)，證實(shí)該系統(tǒng)在本實(shí)驗(yàn)室的使用性能與預(yù)期一致，可以常規(guī)開(kāi)展檢測(cè)。本次確認(rèn)活動(dòng)有效。

3 結(jié)語(yǔ) 《血站質(zhì)量管理規(guī)范》中規(guī)定：建立和實(shí)施確認(rèn)程序，對(duì)新的或有變化的過(guò)程、程序、設(shè)備、軟件、試劑或其他關(guān)鍵物料進(jìn)行系統(tǒng)檢查，以保證在正式使用前符合預(yù)期的使用要求［7］。隨著規(guī)范在血站系統(tǒng)的有效實(shí)施，確認(rèn)工作越來(lái)越多地應(yīng)用到血站質(zhì)量管理活動(dòng)中，成為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系不可或缺的要素。本次開(kāi)展的華益美NAT系統(tǒng)使用前確認(rèn)活動(dòng)，為后續(xù)NAT有效、平穩(wěn)開(kāi)展提供了文件化的證據(jù)，也為其他血站實(shí)驗(yàn)室實(shí)施NAT系統(tǒng)的確認(rèn)工作提供參考，以達(dá)到深化認(rèn)識(shí)持續(xù)改進(jìn)的目的。

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R457.1+2 R392.11

C

1671-2587（2017）02-0198-04

2016-10-12）

（本文編輯：姚萍）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.031

*本課題受河北省衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)指令性課題（No. IL-20140122）資助

050071 石家莊，河北省血液中心（李莉華，何路軍）；解放軍白求恩國(guó)際和平醫(yī)院輸血科（馬印圖）

李莉華（1971–），女，河北石家莊人，副主任檢驗(yàn)師，學(xué)士，主要從事輸血相關(guān)傳染病檢測(cè)研究，（E-mail）15931096399@163.com。

馬印圖，男，副主任技師，主要從事臨床輸血風(fēng)險(xiǎn)控制研究，（E-mail）13722793663@163.com。