潘愛(ài)平 楊云霞 徐洪磊

2型糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清脂聯(lián)素與VEGF水平的變化及意義

潘愛(ài)平 楊云霞 徐洪磊

目的 探討2型糖尿病（T2DM）視網(wǎng)膜病變（DR）患者血清脂聯(lián)素（APN）與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）水平的變化及意義。方法 選取T2DM患者152例，分為無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變（NDR）組65例、非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變（NPDR）組53例、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變（PDR）組34例；另選取40例健康體檢者為正常對(duì)照（NC）組。采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定血清APN及VEGF水平，同時(shí)檢測(cè)相關(guān)臨床參數(shù)。結(jié)果 血清APN水平在NC、NDR、NPDR及PDR組中依次降低，VEGF水平依次增高，組間及組內(nèi)兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）；Spearman相關(guān)分析顯示，T2DM患者血清APN與VEGF呈顯著負(fù)相關(guān) （r=-0.317，P＜0.01）；血清APN與病程、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、C反應(yīng)蛋白（CRP）及胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）亦呈負(fù)相關(guān) （P＜0.05或P＜0.001），VEGF與病程、CRP及HOMA-IR則呈正相關(guān)（P＜0.05或P＜0.001）。結(jié)論 2型糖尿病患者體內(nèi)血清APN降低和VEGF水平升高可能與DR的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。

糖尿病視網(wǎng)膜病變 脂聯(lián)素 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 2型糖尿病

糖尿病視網(wǎng)膜病變（DR）是2型糖尿病（T2DM）最常見(jiàn)的微血管并發(fā)癥之一，其重要的臨床特征是隨著疾病的發(fā)展，視網(wǎng)膜出現(xiàn)新生血管形成，目前致病機(jī)制尚未完全闡明[1]。脂聯(lián)素（APN）是一種對(duì)血管功能有保護(hù)作用的因子，能通過(guò)調(diào)節(jié)相關(guān)因子的表達(dá)抑制視網(wǎng)膜中病理性微血管形成[2]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是血管形成的標(biāo)志物，其高表達(dá)不僅能促進(jìn)新生血管形成，亦影響著內(nèi)皮細(xì)胞功能[3]。本研究通過(guò)觀察T2DM合并DR患者血清APN及VEGF水平的變化及聯(lián)系，同時(shí)分析其與相關(guān)臨床參數(shù)的關(guān)系，探討DR可能的致病機(jī)制。

材料與方法

1 一般資料 選取2014年10月～2015年6月于本院就診的T2DM患者152例，診斷均符合1999年WHO制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。以直接眼底鏡檢查及眼底熒光血管造影為依據(jù)，按1984年全國(guó)眼底病協(xié)作組制定的DR診斷標(biāo)準(zhǔn)，將T2DM患者分為無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變（NDR）組65例，男34例，女31例，平均年齡（59.76±8.82）歲；非增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變（NPDR）組53例，男29例，女24例，平均年齡60.85±9.73歲；增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變（PDR）組34例，男15例，女19例，平均年齡（61.42±9.68）歲；另選取本院同期的健康體檢者40例為正常對(duì)照（NC）組，男23例，女17例，平均年齡（60.15±8.76）歲。所有研究對(duì)象均排除糖尿病急性并發(fā)癥、惡性腫瘤、急慢性感染、嚴(yán)重肝、腎功能不全等疾病。

2 檢測(cè)方法 血清APN及VEGF水平測(cè)定采用酶聯(lián)免疫法（ELISA），試劑分別購(gòu)自美國(guó)Linco公司及美國(guó)R&D公司，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書操作；空腹血糖（FBG）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）檢測(cè)使用羅氏公司P800全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑；糖化血紅蛋白 A1c （HbA1c）檢測(cè)采用美國(guó)伯樂(lè)公司的D-10糖化血紅蛋白分析儀及其配套試劑；血清C反應(yīng)蛋白（CRP）水平檢測(cè)采用美國(guó)Beckman Coulter公司IMMAGE 800特種蛋白分析儀及配套試劑；空腹胰島素水平檢測(cè)采用美國(guó) Beckman Coulter 公司UniCel DXI 800化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑；采用穩(wěn)態(tài)模型的胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）評(píng)估胰島素抵抗程度，公式為：HOMA-IR=（FBG×空腹胰島素）/22.5。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布數(shù)據(jù)用（±s）表示，偏態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)和四分位間距M（QR）表示表示。正態(tài)分布數(shù)據(jù)多組間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)；偏態(tài)分布的數(shù)據(jù)多組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)（Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)），組內(nèi)兩兩比較用Nemenyi檢驗(yàn)；關(guān)聯(lián)分析采用Spearman相關(guān)分析。

結(jié) 果

1 各組間一般臨床資料比較 各組間性別及年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。NDR、NPDR及PDR組中FBG、TC、TG、LDL-C、HbA1c、CRP及HOMA-IR均高于NC組，HDL-C低于NC組（P＜0.05或P＜0.01）；PDR組中病程、CRP及HOMA-IR均高于NPDR及NDR組，NPDR組高于NDR組，組間及組內(nèi)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見(jiàn)表1。

2 各組間血清APN及VEGF水平比較 血清APN水平在NC、NDR、NPDR及PDR組中依次升高，VEGF水平則依次降低，組間及組內(nèi)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。見(jiàn)表2。

3 T2DM患者血清APN與VEGF水平的關(guān)系T2DM患者血清APN與VEGF水平呈顯著負(fù)相關(guān)（Spearman相關(guān)系數(shù)：r=-0.317，P＜0.01），見(jiàn)圖1。

表1 各組間一般臨床資料比較[（±s）或 M （QR）]

表2 各組間血清APN及VEGF水平比較 [M （QR）]

4 T2DM患者血清APN及VEGF與其他臨床參數(shù)間的關(guān)系 Spearman相關(guān)分析顯示，APN與收縮壓、舒張壓、病程、TC、TG、CRP及HOMA-IR亦呈負(fù)相關(guān) （P＜0.05或P＜0.001），VEGF與收縮壓、病程、CRP及HOMA-IR呈正相關(guān) （P＜0.05或P＜0.001），見(jiàn)表3。

討 論

圖1 T2DM患者血清APN水平與VEGF水平間的關(guān)系

表3 T2DM患者血清APN及VEGF與其他臨床參數(shù)間的關(guān)系

DR的發(fā)展是一個(gè)長(zhǎng)期的慢性過(guò)程，由于長(zhǎng)期的高血糖引起視網(wǎng)膜微血管生物學(xué)及血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生改變，導(dǎo)致視網(wǎng)膜局部供血供氧不足，從而引起內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂、微循環(huán)障礙，細(xì)胞水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，直至視網(wǎng)膜新生血管形成以及局部組織結(jié)構(gòu)破壞等一系列的病理生理過(guò)程[4]。

目前研究認(rèn)為，血管內(nèi)皮損傷在糖尿病及其血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用[5]。VEGF作為內(nèi)皮細(xì)胞特異性的絲裂原，是目前已知的內(nèi)皮細(xì)胞通透性最強(qiáng)的促進(jìn)劑，其活化后可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、增加血管壁通透性[6]。血管內(nèi)皮細(xì)胞可分泌一種活性物質(zhì)—一氧化氮（NO），其對(duì)維持血管壁正常機(jī)能狀態(tài)具有重要意義。有研究發(fā)現(xiàn)，新診斷的T2DM患者NO即已呈現(xiàn)不同程度降低，提示T2DM患者在發(fā)病之初血管內(nèi)皮功能已發(fā)生不同程度的損傷[7]。APN是脂肪細(xì)胞分泌的一種血漿蛋白，在內(nèi)臟及皮下脂肪組織中呈高表達(dá)并分泌進(jìn)入外周循環(huán)。APN除具有抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化及調(diào)節(jié)糖脂代謝等效應(yīng)[2]，還可通過(guò)刺激NO的產(chǎn)生調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能，從而調(diào)節(jié)血管生長(zhǎng)因子如VEGF等表達(dá)，發(fā)揮對(duì)血管功能的保護(hù)作用[8]。

本研究中，隨著DR的發(fā)展，血清VEGF水平逐漸升高，APN水平逐漸降低，提示APN水平降低和VEGF水平升高可能與DR的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。本研究還觀察到APN與VEGF表現(xiàn)為顯著負(fù)相關(guān)，提示DR的新生血管形成可能與APN水平的降低有關(guān)。新近的一項(xiàng)體外細(xì)胞學(xué)研究同樣顯示APN的表達(dá)與VEGF水平呈負(fù)相關(guān)[9]，與本研究結(jié)果一致。本研究還發(fā)現(xiàn)HOMA-IR及CRP 在NC、NDR、NPDR及PDR組中依次增高，而APN水平與兩者均呈顯著負(fù)相關(guān)，提示隨著DR的發(fā)展，胰島素抵抗逐漸增強(qiáng)、炎性反應(yīng)逐漸加重，APN可能負(fù)調(diào)控胰島素抵抗和炎性反應(yīng)。Trevaskis[10]等進(jìn)行的一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，血清APN水平降低與胰島素抵抗程度及慢性炎癥的加重密切關(guān)聯(lián)，與本研究結(jié)果一致。本研究還得出VEGF與CRP呈顯著正相關(guān)，表明DR新生血管形成與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。新近有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，炎癥反應(yīng)是微血管生成的主要促進(jìn)因素[11]。Zittermann等[12]研究顯示，VEGF及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）在高表達(dá)時(shí)能促進(jìn)單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞的募集、活化，從而促進(jìn)炎癥反應(yīng)。因此，在DR發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中，新生血管形成與炎性反應(yīng)可能具有相互影響的作用。

綜上所述，本研究初步結(jié)果顯示體內(nèi)APN降低和VEGF水平增高可能在DR的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中起一定的介導(dǎo)作用，其確切機(jī)制及其相互關(guān)系尚待進(jìn)一步探討。

1 Echouffo-Tcheugui JB，Ali MK，Roglic G，et al. Screening intervals for diabetic retinopathy and incidence of visual loss：a systematic review [J]. Diabet Med，2013，30（11）：1272-1292.

2 Higuchi A，Ohashi K，Kihara S，et al. Adiponectin suppresses pathological microvessel formation in retina through modulation of tumor necrosis factor-alpha expression [J]. Circ Res. 2009，104（9）：1058-1065.

3 Caldwell RB，Bartoli M，Behzadian MA，et al. Vascular endothelial growth factor and diabetic retinopathy：pathophysiological mechanisms andtreatment perspectives [J]. Diabetes Metab Res Rev，2003，19（6）：442-455.

4 Bandello F，Lattanzio R，Zucchiatti I，et al. Pathophysiology and treatment of diabetic retinopathy [J]. Acta Diabetol，2013，50（1）：1-20.

5 Onat D，Brillon D，Colombo PC，et al. Human vascular endothelial cells：a model system for studying vascular inflammation indiabetes and atherosclerosis [J]. Curr Diab Rep，2011，11（3）：193-202.

6 Byrne AM，Bouchier-Hayes DJ，Harmey JH. Angiogenic and cell survival functions of vascular endothelial growth factor （VEGF） [J]. J Cell Mol Med，2005，9（4）：777-794.

7 王艷燕，任安. 新診斷 2型糖尿病患者血清血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘蛋白的變化及其意義 [J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2010，12（2）：134-136.

8 Cao Y，Tao L，Yuan Y，et al. Endothelial dysfunction in adiponectin deficiency and its mechanisms involved [J]. J Mol Cell Cardiol，2009，46（3）：413-419. 9 Srinivasan V，Sulochana KN. Effect of adiponectin on expression of vascular endothelial growth factor and pigment epithelium-derived factor： an in vitro study [J]. Indian J Pharmacol，2015，47（1）：117-120. 10 Trevaskis JL，Gawronska-Kozak B，Sutton GM，et al. Role of adiponectin and inflammation in insulin resistance of Mc3r and Mc4r knockout mice [J]. Obesity （Silver Spring），2007，15（11）：2664-2672.

11 Xiao W，Jia Z，Zhang Q，Wei C，et al. Inflammation and oxidative stress，rather than hypoxia，are predominant factors promoting angiogenesis in the initial phases of atherosclerosis [J]. Mol Med Rep，2015，12（3）：3315-3322.

12 Zittermann SI，Issekutz AC. Endothelial growth factors VEGF and bFGF differentially enhance monocyte and neutrophil recruitment to inflammation [J]. J Leukoc Biol，2006，80（2）：247-257.

R446.11 R587.1

A

1671-2587（2017）02-0170-04

2016-10-26）（

本文編輯：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.022

224600 江蘇省響水縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

潘愛(ài)平（1962–），男，江蘇響水人，副主任技師，學(xué)士，主要從事臨床生化及微生物學(xué)檢驗(yàn)研究，（E-mail）apan126y@163.com。