馬茂濤 林少偉 殷光文 黃志堅(jiān)

(福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，福建省動(dòng)物藥物工程實(shí)驗(yàn)室，福州350002)

牡蠣多糖鋅配合物對(duì)脂多糖刺激斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腸道健康的影響

馬茂濤 林少偉 殷光文 黃志堅(jiān)*

(福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，福建省動(dòng)物藥物工程實(shí)驗(yàn)室，福州350002)

本試驗(yàn)旨在探討牡蠣多糖鋅配合物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和脂多糖刺激斷奶仔豬血清抗氧化能力以及空腸黏膜抗炎性因子含量和二糖酶活性的影響。試驗(yàn)選取30頭(28±1)日齡的仔豬，按體重相近的原則，隨機(jī)分為空白對(duì)照組(Ⅰ組)、應(yīng)激對(duì)照組(Ⅱ組)、牡蠣多糖低劑量組(Ⅲ組)、牡蠣多糖中劑量組(Ⅳ組)和牡蠣多糖高劑量組(Ⅴ組)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬。Ⅰ組和Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)飼糧，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加1 000、3 000和5 000 mg/kg牡蠣多糖鋅配合物的試驗(yàn)飼糧。飼養(yǎng)試驗(yàn)30 d后，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組試驗(yàn)豬按體重腹腔注射100 μg/kg的脂多糖，Ⅰ組注射等量的生理鹽水。各組于注射后3 h采血，測(cè)定血清抗氧化能力；采集空腸黏膜，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-10和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量以及二糖酶活性。試驗(yàn)結(jié)果顯示：1)與Ⅰ組和Ⅱ組相比，Ⅳ組和Ⅴ組平均日增重顯著提高(P<0.05)，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組料重比有降低趨勢(shì)(P>0.05)。2)與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組血清總超氧化物歧化酶顯著提高(P<0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性顯著提高(P<0.05)，血清丙二醛含量顯著降低(P<0.05)。3)與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組空腸黏膜IL-2和IL-10含量顯著提高(P<0.05)，其中，Ⅳ組IL-10含量還顯著高于Ⅱ組(P<0.05)；與Ⅱ組相比，Ⅲ組和Ⅳ組空腸黏膜TNF-α含量顯著降低(P<0.05)。4)與Ⅱ組相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組空腸蔗糖酶、麥芽糖酶和乳糖酶活性都有顯著性地提高(P<0.05)。由此可見(jiàn)，飼糧中添加牡蠣多糖鋅配合物能有效提高斷奶仔豬血清抗氧化能力和免疫耐受能力，提高空腸黏膜二糖酶的活性，對(duì)免疫應(yīng)激有明顯的緩解作用，其中以飼糧中添加3 000 mg/kg牡蠣多糖鋅配合物效果最佳。

牡蠣多糖鋅配合物；斷奶仔豬；生長(zhǎng)性能；抗氧化能力；炎性細(xì)胞因子；二糖酶

多糖具有降血脂、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、抗突變、抗病毒及抗腫瘤等作用，而且對(duì)正常的細(xì)胞沒(méi)有毒副作用，因此越來(lái)越受到研究人員的重視[1]。利用多糖等免疫藥物作為免疫增強(qiáng)劑，提高動(dòng)物的免疫力，成為畜牧業(yè)病害防治的重要方向。李志[2]研究表明牡蠣多糖(oyster polysaccharides，OPS)具有抗腫瘤、抗氧化衰老、抗菌抗病毒以及提高機(jī)體免疫功能等作用。而鋅是所有動(dòng)物必需的一種微量元素，它幾乎存在于機(jī)體所有組織和器官中。機(jī)體內(nèi)至少300種酶中含有鋅，這些鋅承擔(dān)著不同的生物功能，在動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、免疫、物質(zhì)代謝及繁殖等多方面起著重要作用[3]。孫國(guó)君[4]的研究結(jié)果顯示鋅對(duì)斷奶仔豬的腸道上皮細(xì)胞的免疫功能有調(diào)節(jié)作用。岳雙明[5]的研究結(jié)果顯示在仔豬飼糧中添加鋅可以提高仔豬生長(zhǎng)性能，同時(shí)可以增強(qiáng)仔豬抗氧化能力以及提高腸道黏膜免疫功能，保護(hù)腸道健康。現(xiàn)代藥理研究表明，天然藥物有效成分與金屬離子形成的配合物具有更強(qiáng)的藥理活性[6-8]。趙姝雯等[9]關(guān)于比較研究金針菇多糖與鋅螯合前后的抗腫瘤作用與其體外抗氧化活性的研究，其結(jié)果顯示金針菇多糖鋅配合物抗氧化活性較螯合前有所提高。

脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)可引發(fā)機(jī)體炎癥。革蘭氏陰性細(xì)菌感染時(shí)，細(xì)菌或LPS進(jìn)入血循環(huán)，激活多種炎癥細(xì)胞并誘導(dǎo)釋放炎性介質(zhì)，引起炎癥反應(yīng)。同時(shí)，機(jī)體產(chǎn)生大量自由基，促進(jìn)機(jī)體的氧化反應(yīng)過(guò)程[10]。LPS具有致熱、抗腫瘤、增強(qiáng)抗感染力等多種生物學(xué)功能，是目前建立免疫應(yīng)激模型最有效的免疫應(yīng)激原[11]。

羅剛等[12]和陳騰騰[13]的研究結(jié)果表明OPS可以促進(jìn)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能并對(duì)免疫應(yīng)激仔豬的腸道健康有緩解作用。本試驗(yàn)在他們?cè)囼?yàn)的基礎(chǔ)上，在一定反應(yīng)條件下，通過(guò)OPS和微量元素鋅發(fā)生螯合反應(yīng)，形成OPS鋅配合物(Zn-OPS)，探究Zn-OPS對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響，以及對(duì)由LPS引起的處于免疫應(yīng)激狀態(tài)下斷奶仔豬血清抗氧化能力、腸道黏膜抗炎性因子含量及二糖酶活性的影響，分析飼糧中添加Zn-OPS對(duì)由LPS引起的斷奶仔豬免疫應(yīng)激是否有緩解作用和對(duì)腸道健康是否有幫助，從而為Zn-OPS應(yīng)用于豬飼養(yǎng)生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

斷奶仔豬由福建省南平某豬場(chǎng)提供；Zn-OPS由實(shí)驗(yàn)室自制(火焰原子吸收法測(cè)定鋅含量為4.6%)。LPS(大腸桿菌血清型O55∶B5，Sigma公司)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒(Cusabio公司)；酶標(biāo)儀(芬蘭雷勃公司)；過(guò)氧化氫酶(CAT)活性測(cè)定試劑盒，丙二醛(MDA)含量測(cè)定試劑盒，總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性測(cè)定試劑盒，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性測(cè)定試劑盒，總蛋白含量測(cè)定試劑盒(以上試劑盒均來(lái)自南京建成生物工程研究所)。

1.2 斷奶仔豬免疫應(yīng)激模型的建立

試驗(yàn)選取30頭(28±1)日齡的杜洛克×長(zhǎng)白×大白三元閹公仔豬，按體重、窩別等原則隨機(jī)分為5個(gè)組，分別為空白對(duì)照組(Ⅰ組)、免疫應(yīng)激對(duì)照組(Ⅱ組)、Zn-OPS低劑量組(Ⅲ組)、Zn-OPS中劑量組(Ⅳ組)和Zn-OPS高劑量組(Ⅴ組)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬。Ⅰ和Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)飼糧，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加1 000、3 000和5 000 mg/kg Zn-OPS的飼糧。試驗(yàn)預(yù)試期3 d，正試期30 d。試驗(yàn)結(jié)束，禁食12 h后，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組豬按體重腹腔注射100 μg/kg LPS，Ⅰ組注射等量的生理鹽水。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items28～40日齡28to40daysofage41～60日齡41to60daysofage蔗糖Sucrose2.02.0預(yù)混料Premix1)8.06.0合計(jì)Total100.0100.0營(yíng)養(yǎng)水平Nutrientlevels2)粗蛋白質(zhì)Crudeprotein19.5819.52粗纖維Crudefiber2.042.82粗脂肪Crudefat6.044.72鈣Calcium0.780.75總磷Totalphosphorus0.500.54有效磷Availablephosphorus0.400.41干物質(zhì)Drymatter87.3687.53消化能Digestiveenergy/(MJ/kg)14.7614.27賴(lài)氨酸Lysine1.501.33錳Mn/(mg/kg)45.7445.33鋅Zn/(mg/kg)40.6040.60銅Cu/(mg/kg)134.17133.60

1)每千克預(yù)混料含有 One kilogram of premix contained：VA 2 400 IU，VD3240 IU，VE 60 IU，VK 8 IU，生物素 biotin 0.2 mg，氯化膽堿 choline chloride 400 mg，煙酸 niacin 30 mg，核黃素 riboflavin 16 mg，泛酸 pantothenic acid 20 mg，VC 70 mg，VB1240 μg，Cu 10 mg，I 0.15 mg，F(xiàn)e 100 mg，Mn 20 mg，Se 0.30 mg，Zn 125 mg。

2)消化能為計(jì)算值，其他為實(shí)測(cè)值。DE was a calculated value, while the others were measured values.

1.3 樣品的采集及測(cè)定

前腔靜脈釆血，3 500 r/min離心10 min，分離血清用于抗氧化能力的測(cè)定。采用頸靜脈放血處死，打開(kāi)腹腔，將空腸從其腸系膜處取下后于冰上取樣。于空腸1/2處截取20 cm左右腸段，剖開(kāi)空腸，于0.9%生理鹽水中輕輕沖洗除去腸壁上的內(nèi)容物，放置于濾紙上吸干水分，用刀背刮取空腸黏膜10 g于無(wú)菌凍存管中，立即放入冰中帶回。用勻漿管將空腸黏膜與10 mL蒸餾水充分研磨，3 500 r/min離心10 min，取上清液用于白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-10、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量和二糖酶活性的測(cè)定。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)仔豬在試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)分別逐只空腹稱(chēng)重，每次稱(chēng)重前12 h停止喂食。試驗(yàn)期間記錄各組試驗(yàn)仔豬的日采食量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.4.2 血清抗氧化能力

CAT和GSH-Px活性采用比色法測(cè)定，MDA含量采用苯巴比妥法測(cè)定，T-SOD活性采用黃嘌呤氧化法測(cè)定。測(cè)定試劑盒購(gòu)于購(gòu)自南京建成生物工程研究所，所用儀器為PERSEE-TU1810紫外光分光光度計(jì)(北京普析通用儀器責(zé)任有限公司)，具體操作步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4.3 空腸黏膜抗炎性因子含量

IL-2、IL-10、TNF-α含量均使用ELISA方法測(cè)定，測(cè)定試劑盒購(gòu)于Cusabio公司，所用儀器為T(mén)ECAN-F50酶標(biāo)儀，測(cè)定方法按照試劑盒使用手冊(cè)測(cè)量。

1.4.4 空腸二糖酶活性

麥芽糖酶、乳糖酶和蔗糖酶活性測(cè)定均按照測(cè)試試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)量，試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所，所用儀器為PERSEE-TU1810紫外光分光光度計(jì)(北京普析通用儀器責(zé)任有限公司)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著，試驗(yàn)結(jié)果使用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 Zn-OPS對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，Ⅳ和Ⅴ組的平均日增重較Ⅰ和Ⅱ組有顯著性地提高(P<0.05)，其中Ⅳ組的平均日增重相較于Ⅰ組提高了18.3%(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組的平均日采食量相較于Ⅰ和Ⅱ組有顯著性地提高(P<0.05)。Ⅳ和Ⅴ組料重比相較Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組都有降低，但差異不顯著(P>0.05)。

表2 Zn-OPS對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬血清抗氧化能力的影響

由表3可知，Ⅱ組血清CAT活性較Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組有顯著性地提高(P<0.05)，Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Ⅱ組相較于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清GSH-Px活性顯著性地降低(P<0.05)，Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Ⅰ、

Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清MDA含量較Ⅱ組分別顯著降低了11.6%、5.9%、7.3%、5.4%(P<0.05)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清SOD活性較Ⅱ組分別提高了0.9%(P>0.05)、2.5%(P<0.05)、0.9%(P>0.05)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

2.3 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬腸道黏膜抗炎性因子含量的影響

由表4可知，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組IL-2和IL-10含量較Ⅰ組都有顯著性地提高(P<0.05)，同時(shí)Ⅳ組IL-2含量較Ⅱ組提高了1.3%(P>0.05)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組IL-10含量較Ⅱ組分別提高了14.5%(P>0.05)、27.1%(P<0.05)和20.3%(P>0.05)。Zn-OPS添加組各組之間IL-2和IL-10含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。Ⅱ組TNF-α含量顯著高于Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ組(P<0.05)，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組TNF-α含量較Ⅱ組降低了23.5%(P<0.05)、35.3%(P<0.05)和5.9%(P>0.05)。

表4 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬腸道黏膜抗炎性因子的影響

2.4 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬空腸二糖酶活性的影響

由表5可知，Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組各組之間的仔豬空腸乳糖酶、麥芽糖酶和蔗糖酶活性較Ⅱ組都有顯著性地提高(P<0.05)，Ⅲ組乳糖酶活性較Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組有顯著性地降低(P<0.05)，Ⅰ組麥芽糖酶活性相較于Zn-OPS添加組有顯著性地提高(P<0.05)，Zn-OPS添加組各組之間麥芽糖酶及蔗糖酶活性無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表5 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激仔豬空腸二糖酶活性的影響

3 討 論

3.1 Zn-OPS對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

大量研究表明，仔豬飼糧中添加多糖能提高仔豬的平均日增重，有利于仔豬的健康生長(zhǎng)[14]。陳騰騰[13]研究表明，飼糧中添加OPS可增加平均日增重，提高生長(zhǎng)性能。宋志學(xué)等[15]研究表明，飼糧中添加紅芪粗多糖可顯著提高仔豬的生長(zhǎng)性能。鋅是仔豬生長(zhǎng)必不可少的一種微量元素，鋅可以增加仔豬的采食量，增強(qiáng)腸道消化能力，提高飼料利用率，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)[3,16]。岳雙明[5]的研究表明，飼糧中添加高鋅能提高仔豬的生長(zhǎng)性能。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組相較于Ⅰ和Ⅱ組，平均日采食量、平均日增重和料重比都有改善，其中Ⅳ組相較于其他各組效果更為明顯，這表明飼糧中添加Zn-OPS能增加仔豬的采食量，提高飼料利用率和斷奶仔豬生長(zhǎng)性能。可能的原因是Zn-OPS增強(qiáng)了仔豬腸道免疫能力，從而增進(jìn)仔豬食欲，降低腹瀉率。蔡旭濱等[17]關(guān)于太子參莖葉多糖應(yīng)用于斷奶仔豬的試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加太子參莖葉多糖可以降低斷奶仔豬的腹瀉率，提高生長(zhǎng)性能。

3.2 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬血清抗氧化能力的影響

LPS進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體之后通過(guò)改變細(xì)胞膜氧化酶系統(tǒng)和微粒體代謝過(guò)程，釋放大量自由基。自由基具有很強(qiáng)的氧化性，可與體內(nèi)細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)及核酸發(fā)生氧化反應(yīng)，改變它們的功能，對(duì)機(jī)體造成巨大危害[18]。機(jī)體內(nèi)存在酶類(lèi)抗氧化系統(tǒng)和非酶類(lèi)抗氧化系統(tǒng)維持體內(nèi)自由基的平衡，T-SOD、GSH-Px、CAT是酶類(lèi)抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分。T-SOD可清除超氧陰離子，使細(xì)胞和組織免受損害；CAT可以降低細(xì)胞中自由基前體的過(guò)氧化氫(H2O2)濃度；GSH-Px通過(guò)清除氫氧化物和脂質(zhì)氧化物而抑制自由基的生成反應(yīng)[19]。MDA作為由自由基引起的脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，可作為由于氧化作用而造成細(xì)胞損傷程度的重要指標(biāo)[20-21]。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清MDA含量和T-SOD活性較Ⅰ組有顯著性地提高，CAT活性也呈現(xiàn)升高趨勢(shì)。這與Ben-Shaul等[22]的研究結(jié)果一致，提示仔豬在注射LPS后，血清中自由基含量大量增加，機(jī)體進(jìn)入免疫應(yīng)激狀態(tài)。Ⅱ組血清中GSH-Px活性相較于Ⅰ組有顯著性地降低，可能的原因是注射LPS后，仔豬機(jī)體產(chǎn)生急性免疫應(yīng)激，GSH-Px活性的降低導(dǎo)致了機(jī)體血清中自由基含量的上升[23-24]。此外，本試驗(yàn)中，Zn-OPS添加組的血清T-SOD和GSH-Px活性與Ⅱ組相比都有顯著性地提高，血清MDA含量顯著性地降低。大量研究均表明飼糧中添加鋅和多糖都可以提高機(jī)體的抗氧化能力[25-27]。冷煒博等[28]的研究顯示飼糧中添加天冬氨酸可以提高黏膜抗氧化酶的活性，顯著降低空腸和回腸MDA的含量。宋志學(xué)等[15]的研究結(jié)果表明飼糧中添加紅芪粗多糖可以有效增強(qiáng)仔豬在免疫應(yīng)激狀態(tài)的抗氧化能力。本次試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明在飼糧中添加Zn-OPS可以使酶類(lèi)自由基清除系統(tǒng)活性提高，增強(qiáng)機(jī)體的血清抗氧化能力。

3.3 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬腸道黏膜抗炎性因子含量的影響

LPS是革蘭氏陰性菌外壁的主要化學(xué)成分，通過(guò)胃腸道進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體后，可以刺激IL(如IL-2、IL-10)以及TNF-α等細(xì)胞因子，激活免疫細(xì)胞，增強(qiáng)特異性和非特異性免疫反應(yīng)[11]。IL-2是T淋巴細(xì)胞分泌的一種具有提升免疫反應(yīng)以及介導(dǎo)免疫耐受，具有雙向免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子[29]。韓杰等[30]研究結(jié)果表明，在斷奶仔豬飼料中添加多糖可以提高斷奶仔豬血液中IL-2的含量。IL-10是由多種細(xì)胞分泌的一種多效價(jià)細(xì)胞因子，既有免疫抑制作用也有免疫刺激作用[31-32]。TNF-α是一個(gè)多功能的細(xì)胞因子，主要介導(dǎo)動(dòng)物體的免疫及炎癥反應(yīng)。

本次試驗(yàn)結(jié)果顯示，Ⅱ組和Zn-OPS添加組在腹腔注射LPS后，與Ⅰ組相比，腸道黏膜中的IL-2、IL-10和TNF-α含量顯著性地提高，這與朱春甲等[33]和徐占云等[34]的研究結(jié)果一致。說(shuō)明斷奶仔豬在LPS的刺激已經(jīng)進(jìn)入免疫應(yīng)激狀態(tài)。Zn-OPS添加組與Ⅱ組對(duì)比，腸道黏膜中IL-2和IL-10含量有不同程度地提高，而TNF-α含量卻有顯著性地降低。羅剛等[12]關(guān)于OPS對(duì)免疫應(yīng)激仔豬炎性細(xì)胞因子和過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體γ(PPARγ) mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響以及周丹[35]關(guān)于TNF-α在大鼠早期炎癥過(guò)程中的初步研究的研究結(jié)果均提示血清TNF-α含量的上升。本試驗(yàn)中TNF-α含量下降的原因可能有以下2點(diǎn)：1)Zn-OPS可以提升機(jī)體的免疫能力和免疫耐受能力，使得IL-2、IL-10含量上升和TNF-α含量下降，試驗(yàn)結(jié)果與施惠娟等[36]關(guān)于氧化苦參堿對(duì)銀屑病小鼠模型血清中IL-2、IL-10、TNF-α含量的影響的研究結(jié)果基本一致。2)Zn-OPS中所含的鋅元素對(duì)提升腸道免疫功能起到作用[4]，提示Zn-OPS可以通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)免疫應(yīng)激仔豬腸道產(chǎn)生保護(hù)作用。

3.4 Zn-OPS對(duì)免疫應(yīng)激斷奶仔豬空腸二糖酶活性的影響

小腸是機(jī)體中食物消化最主要的部位，二糖不能被小腸黏膜直接吸收，所以小腸黏膜上二糖酶的活性對(duì)糖水化合物的吸收起著至關(guān)重要的作用，其中以麥芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶最為重要[31]，其中以空腸二糖酶活性最高[37]。仔豬斷奶會(huì)引起豬小腸二糖酶活性的下降[38]。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示：注射LPS的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組空腸二糖酶活性都顯著性地低于Ⅰ組，說(shuō)明LPS確實(shí)可以導(dǎo)致仔豬空腸二糖酶活性的降低[39]。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的二糖酶活性與Ⅱ組相比都有顯著地提高。陳騰騰[13]關(guān)于OPS對(duì)LPS刺激斷奶仔豬小腸健康的影響的研究結(jié)果顯示腹腔注射LPS會(huì)導(dǎo)致斷奶仔豬小腸二糖酶活性的下降，但是飼糧中添加OPS可顯著提高二糖酶活性。許梓榮等[38]的研究結(jié)果顯示微量鋅可以提高小腸黏膜中蔗糖酶的活性，但是也一定程度上抑制小腸黏膜中麥芽糖酶的活性。郭彤等[40]研究結(jié)果顯示Cu2+/ZnO-蒙脫石可以顯著提高空腸黏膜二糖酶的活性。本次試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，Zn-OPS可以提高免疫應(yīng)激斷奶仔豬空腸黏膜的二糖酶活性，能有效緩解LPS引起的免疫應(yīng)激。

4 結(jié) 論

飼糧中添加Zn-OPS可以提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，同時(shí)可以有效提高斷奶仔豬血清的抗氧化能力，提高仔豬免疫耐受能力，對(duì)免疫應(yīng)激有明顯的緩解能力，并且可以顯著提高仔豬空腸二糖酶的活性。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在飼糧中添加3 000 mg/kg的Zn-OPS效果最佳。

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*Corresponding author, professor, E-mail: huangzj1999@sina.com

(責(zé)任編輯 田艷明)

Effects of Oyster Polysaccharide-Zinc Complex on Growth Performance and Intestinal Health of Weaned Piglets Induced by Lipopolysaccharide

MA Maotao LIN Shaowei YIN Guangwen HUANG Zhijian*

(EngineeringLaboratoryofAnimalPharmaceuticals,CollegeofAnimalScience,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002,China)

This study was conducted to investigate the effects of oyster polysaccharide (OPS)-zinc complex (Zn-OPS) on growth performance of weaned piglets, and serum antioxidant capacity and anti-inflammatory factor content and disaccharidase activity in jejunum mucosa of immunized pigs with lipopolysaccharide (LPS). A total of thirty piglets of (28±1) days of age were randomly allocated into five groups named blank control (group Ⅰ), immunological stress control (group Ⅱ) and low OPS (group Ⅲ), medium OPS (group Ⅳ) and high OPS (group Ⅴ) with six replicates per group and one pig in each replicate according to the principle of similar weight. Piglets in groups Ⅰ and Ⅱ were fed basal diets, and in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ were fed basal diets supplemented with 1 000, 3 000 and 5 000 mg/kg Zn-OPS, respectively. The piglets were injected intraperitoneally with a dose of LPS (100 μg/kg BW) except in group Ⅰ which were injected with the same dose of normal saline after 30 days of feeding experiment. And three hours after injection, the serum samples were collected to measure antioxidant capacity, and the jejunum mucosa was collected for measuring contents of interleukin (IL)-2, IL-10 and tumor necrosis factor-α (TNF-α) and disaccharidase activity by enzyme linked immunosorbent assay. The results showed as follows: 1) compare with groups Ⅰ and Ⅱ, average daily gain of weaned piglets in groups Ⅳ and Ⅴ was significantly increased (P<0.05), and the ratio of feed to gain in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ was decreased in some tendency (P>0.05). 2) Compare with group Ⅰ, the serum total superoxide dismutase activity in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ was significantly increased (P<0.05). And compare with group Ⅱ, the serum glutathione peroxidase activity in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ was significantly increased (P<0.05), while the serum malondialdehyde content was significantly decreased (P<0.05). 3) Compare with group Ⅰ, the contents of IL-2 and IL-10 of jejunum mucosa in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ were significantly increased (P<0.05), and IL-10 content in group Ⅳ was significantly higher than that in group Ⅱ (P<0.05). Compare with group Ⅱ, TNF-α content of jejunum mucosa in groups Ⅲ and Ⅳ was significantly decreased (P<0.05). 4) Compare with group Ⅱ, the activities of sucrose, maltase and lactase of jejunum mucosa in groups Ⅲ, Ⅳ and Ⅴ were significantly increased (P<0.05). It is concluded that dietary Zn-OPS can improve the serum antioxidant capacity and immune tolerance of piglets, increase the jejunum mucosal disaccharidase activity, which can relieve the immune stress. The effect of Zn-OPS supplemented with 3 000 mg/kg is the best.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(4)：1359-1366]

Zn-OPS; weaned piglets; growth performance; antioxidant capacity; inflammatory cytokines; disaccharidase

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.04.034

2017-01-16

福建省科技廳引導(dǎo)項(xiàng)目(2015N0017)；國(guó)家自然科學(xué)基金——青年基金項(xiàng)目(31502058)；?？萍及l(fā)展資金項(xiàng)目(KF2015017)

馬茂濤(1991—)，男，福建寧德人，碩士研究生，從事臨床獸醫(yī)學(xué)研究。E-mail: 452650019@qq.com

*通信作者:黃志堅(jiān)，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: huangzj1999@sina.com

S816.7

A

1006-267X(2017)04-1359-08