宋瑞英

山東青島膠州市北關(guān)街道辦事處衛(wèi)生院檢驗科，山東青島 266300

尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白結(jié)果分析探討

宋瑞英

山東青島膠州市北關(guān)街道辦事處衛(wèi)生院檢驗科，山東青島 266300

目的 通過尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白(MAU)結(jié)果的比較,了解尿液分析儀檢測尿蛋白的準(zhǔn)確性、局限性及影響因素。方法 對235份新鮮尿液標(biāo)本分別進行尿蛋白干化學(xué)檢測和免疫熒光分析儀尿微量白蛋白定量檢測。結(jié)果 在尿液干化學(xué)法檢測尿蛋白 （-）的130份標(biāo)本中,有36份檢測到＞20 mg/L的尿微量白蛋白，呈假陰性（27.7%）；45份尿蛋白（±）標(biāo)本中36份尿微量白蛋白呈陽性（80.0%）,9份呈假陽性（20.0%）。結(jié)論 干化學(xué)法測定尿蛋白因靈敏性差及干擾因素較多,其準(zhǔn)確性受到一定限制,需做好尿檢質(zhì)量控制,避免漏診誤診；尿微量白蛋白檢測具有靈敏度高、特異性強、測定結(jié)果較為準(zhǔn)確等優(yōu)點,在糖尿病腎病,高血壓腎病等疾病的早期診斷中更具有臨床價值。

尿液分析儀；尿蛋白；尿微量白蛋白；影響因素

目前尿液分析儀已廣泛應(yīng)用于各級醫(yī)療單位,用其檢測尿蛋白,費用低廉，操作簡便,結(jié)果迅速,已成為臨床的常規(guī)檢測方法[1]。但因其敏感性差,干擾因素多,只能作為一種過篩試驗。而免疫熒光分析儀檢測尿微量白蛋白(MAU)具有特異性強,靈敏度高,可準(zhǔn)確定量等優(yōu)點,彌補了這方面的不足。該文用尿液分析儀檢測尿蛋白的同時,采用免疫熒光檢測儀檢測尿 MAU,以兩者含量之差異作為研究的切入點,結(jié)果分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇235例住院患者,其中男110例,女125例。年齡35～85歲,平均59歲。同時記錄有關(guān)患者資料(患者病情,臨床用藥等)。

1.2 儀器和試劑

尿蛋白檢測采用URIT-180型尿液分析儀,配套URIT-11A試紙條。尿微量白蛋白(MAU)檢測使用WF-0901/型免疫熒光檢測儀及公司配套試劑盒。

1.3 方法

患者留取中段晨尿10 mL,盛置于干凈的容器中,及時送檢,將URIT-11A試紙條放在尿液中10 s取出,放在衛(wèi)生紙上瀝干多余液體,用尿液分析儀測尿蛋白。同一份標(biāo)本用TopPette移液器準(zhǔn)確吸取75 μL,滴加到尿微量蛋白檢測卡的加樣孔中,室溫放置3 min,插入免疫熒光檢測儀中測試。

2 結(jié)果

以MAU＞20 mg/L視為陽性，從表格中可以看出,用尿液分析儀干化學(xué)法檢測的這批標(biāo)本,在尿中含有大量白蛋白（++～+++）時，與免疫熒光分析儀測定尿微量白蛋白結(jié)果相符,而蛋白含量相對較少時出現(xiàn)了假陽性和假陰性的情況：尿蛋白（-）的130份標(biāo)本中,36份檢測到＞20 mg/L的尿微量白蛋白,即36例假陰性（27.7%）；45份尿蛋白 （±）標(biāo)本中僅36份尿微量白蛋白呈陽性（80.0%），即9份假陽性（20.0%）；32份尿蛋白（+）標(biāo)本中31份尿微量白蛋白呈陽性,有1份假陽性（3.1%）。結(jié)果見表1。

表1 尿液分析儀檢測尿蛋白和尿微量白蛋白檢測結(jié)果比較

3 討論

尿液分析儀檢測尿蛋白是采用指示劑的蛋白誤差原理,即蛋白質(zhì)模塊中主要含有酸堿指示劑溴酚藍、檸檬酸緩沖系統(tǒng)和表面活性劑。在pH為3.2時溴酚藍產(chǎn)生出陰離子,與蛋白攜帶的陽離子（主要是清蛋白）結(jié)合發(fā)生顏色變化而產(chǎn)生半定量。這種顏色變化的幅度與蛋白含量呈正比。試紙只對白蛋白敏感,對球蛋白等其它蛋白敏感性差,對血紅蛋白、肌紅蛋白、黏蛋白等蛋白一般不呈陽性反應(yīng),只能作為一種過篩試驗[2]。

該實驗檢測尿微量白蛋白（MAU）所用萬孚免疫熒光檢測儀,是基于免疫熒光定量技術(shù)、干化學(xué)層析技術(shù)和激光誘導(dǎo)技術(shù)原理進行檢測的儀器。MAU檢測試劑預(yù)先在硝酸纖維素膜上包被熒光標(biāo)記鼠抗白蛋白單克隆抗體,和尿液中的白蛋白抗原形成復(fù)合物,在層析作用下,反應(yīng)復(fù)合物沿硝酸纖維素膜向前移動被檢測區(qū)的單克隆抗體捕獲,尿液樣本中的白蛋白越多,檢測區(qū)上的復(fù)合物集聚越多，熒光抗體的信號強度反映了被捕獲的白蛋白數(shù)量。萬孚檢測儀可根據(jù)熒光強度的大小自動檢測計算出樣本中白蛋白的濃度。此方法特異性強,靈敏度高,可準(zhǔn)確定量尿液中的微量白蛋白含量。

鑒于尿液分析儀檢測尿蛋白與尿微量白蛋白檢測原理的不同,兩者的靈敏度也不同,尿液分析儀檢測尿蛋白的靈敏度為150 mg/L,而熒光免疫分析儀尿微量白蛋白檢測的靈敏度為5 mg/L,因此,尿微量白蛋白檢測的準(zhǔn)確性遠高于尿液分析儀,從檢測結(jié)果觀察隨著尿蛋白含量的增加,在尿蛋白（++）、（+++）的標(biāo)本與尿微量白蛋白測定完全相符,兩種結(jié)果的符合率為100.0%。但在尿液干化學(xué)檢測尿蛋白（-）的130份標(biāo)本中,有36份檢測到＞20 mg/L的尿微量白蛋白,假陰性達27.7%,即尿液分析儀漏診率達27.7%。該文中45份尿蛋白（±）的標(biāo)本,有9份假陽性（20.0%）,32份尿蛋白（+）標(biāo)本中,有1份假陽性（3.1%）。出現(xiàn)這種情況主要原因除兩者靈敏度不同外,還因為尿液分析儀檢測尿蛋白還受其他因素的影響[3]。

假陰性:①根據(jù)干化學(xué)法檢測尿蛋白的原理,試紙只對白蛋白敏感,對球蛋白其他蛋白敏感性差,對血紅蛋白、肌紅蛋白、黏蛋白等蛋白一般不呈陽性反應(yīng),可影響對一些疾病的檢出,如多發(fā)性骨髓瘤患者排出的本周蛋白尿（實質(zhì)為免疫球蛋白輕鏈或其聚合體）、溶血性疾病所致的血紅蛋白尿、大面積肌肉創(chuàng)傷或炎癥時的肌紅蛋白尿、單核細胞白血病時的溶菌酶蛋白尿等。②強酸性尿液：尿液pH＜4時,則抑制蛋白與染料呈色反應(yīng),故而尿蛋白的敏感性大為降低,造成假陰性需要稀堿來校正pH為5～7后,再測定尿蛋白。③試劑帶浸入尿液不足,量不夠,致使反應(yīng)不完全,可使尿蛋白偏低。④輸注大劑量青霉素,在一定的時間內(nèi)(2～6 h),尿液分析儀測定尿蛋白易出現(xiàn)假陰性由于這些標(biāo)本來自住院患者,其用藥多此類病例,需在輸注青霉素6 h以后,再留取標(biāo)本進行檢測[4]。

假陽性：①患者服用奎寧和磺胺嘧啶等藥物引起的堿性尿液（pH＞9.0）時,試帶染色的電離度增大,堿離子濃度增加出現(xiàn)與尿蛋白一樣的蘭色,造成假陽性。應(yīng)盡量避免在服用有干擾作用藥物后不久留取標(biāo)本。②青霉素、氨芐青霉素的干擾：由于與染料結(jié)合,使其在尿液濃縮引起假陽性。③尿路感染的尿液使尿液蛋白呈陽性。④膽紅素呈強陽性的尿液：當(dāng)尿膽紅素（+++）時,蛋白也呈陽性。⑤另外一些可致假陽性的因素如高比重尿,試紙條如浸尿過多將緩沖劑沖脫也可致假陽性[5]。

4 結(jié)論

血液中有一定量的蛋白質(zhì)存在,一部分的蛋白質(zhì)在隨血液經(jīng)過腎臟時被過濾至尿液中,隨后又在腎小管處被重吸收而進入血液。但是當(dāng)腎臟或者輸尿管出現(xiàn)病變時就會透過更多的蛋白質(zhì),超出了腎小管的吸收能力,從而形成蛋白尿。人體正常代謝情況下,尿中的白蛋白極少,具體到每升尿白蛋白不超過20 mg（＜20 mg/L）。尿分析儀法測尿蛋白遠不及尿微量蛋白檢測敏感,糖尿病腎病,高血壓腎病發(fā)病隱匿,初始濃度低,受靈敏度限制尿常規(guī)檢測蛋白的顯示為陰性（-）或（+-）,而MAU的測量正可以彌補這一缺陷。此時經(jīng)過規(guī)范的治療,可修復(fù)腎單位消除蛋白尿,故早期發(fā)現(xiàn)診斷,對于腎病的預(yù)防及早期治療都起的了積極作用。避免尿蛋白檢測陽性時,患者腎臟已經(jīng)進入不可逆的損傷期。不僅如此尿 微量白蛋白還對高血壓和心血管疾病的進展、預(yù)測、治療效果評價等具有重要參考價值[6]。

綜上所述,尿MAU的檢測具有特異性強,靈敏度高,可準(zhǔn)確定量等特點,在懷疑有早期腎損傷時,檢測尿微量蛋白比尿蛋白更有臨床意義。尿液分析儀檢測尿蛋白只是一個半定量分析方法,如果將檢查結(jié)果誤認(rèn)為是尿蛋白定量結(jié)果,就會影響到臨床醫(yī)生對患者疾病的分析和判斷,以致造成誤診或漏診。

[1]范世珍,陳安彬,林松青.尿微量白蛋白在高血壓和糖尿病腎病早期診斷中意義[J].臨床研究雜志,2013,2（10）：35-36.

[2]叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗學(xué)[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,1997：236.

[3]胥伯如.尿液分析儀檢驗?zāi)虻鞍着c尿微量蛋白結(jié)果分析[J].中國藥物經(jīng)濟學(xué)雜志,2013,11（8）：292-293.

[4]叢玉隆，陳建良.大劑量青霉素中尿蛋白定性結(jié)果的探討[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,1994,17(3):167.

[5]桂滿元,黃成文，兩種尿蛋白測定方法的比較[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床雜志，2007,1（4）：34-35.

[6]胥鳳,趙敏,尿微量白蛋白的檢測及臨床意義[J].西藏醫(yī)藥雜志,2005,26(4):85.

R446.1

A

1672-5654（2017）02（c）-0048-02

2016-11-24）

宋瑞英（1974.4-），女，山東青島人，本科，主管技師，研究方向：尿蛋白和尿微量白蛋白在臨床中的診斷價值。

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.06.048